ENSAYOS PCR DE HPV MULTIPLEX FLUORESCENTE QUE USAN FLUOROFOROS MULTIPLES.
Un procedimiento para detectar la presencia de un subtipo de papilomavirus humano (HPV) en una muestra que contiene ácido nucleico que comprende:
(a) amplificar el ácido nucleico en presencia de una polimerasa de ácido nucleico y tres series de oligonucleótidos; en el que cada serie de oligonucleótidos está constituida por (i) un cebador directo discriminatorio de PCR que hibrida con una primera región de un subtipo de HPV, (ii) un cebador inverso discriminatorio de PCR que hibrida una segunda región del subtipo de HPV secuencia abajo de la primera región, (iii) una sonda fluorescente marcada con una molécula extintor y un fluoróforo que emite energía a una única emisión máxima; dicha sonda hibridando una región del subtipo de HPV entre la primera y la segunda región; en el que cada serie de oligonucleótidos hibrida específicamente con un amplicón diferente de HPV derivado del mismo subtipo de HPV; (b) permitir a dicha polimerasa de ácido nucleico digerir cada sonda fluorescente durante laamplificación para disociar dicho fluoróforo de dicha molécula extintor; (c) detectar un cambio de fluorescencia tras la disociación del fluoróforo y la molécula extintor, correspondiendo el cambio de fluorescencia a la existencia de amplificación del ácido nucleico; y (d) determinar que la muestra es positiva para el subtipo de HPV si se detecta un cambio de fluorescencia en al menos dos emisiones máximas.
Tipo: Resumen de patente/invención.
Solicitante: MERCK & CO., INC..
Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.
Dirección: 126 EAST LINCOLN AVENUE,RAHWAY, NJ 07065-0907.
Inventor/es: JANSEN, KATHRIN, U., TADDEO,FRANK,J, LI,WEILI, DICELLO,ANTHONY,C.
Fecha de Publicación: .
Fecha Concesión Europea: 13 de Diciembre de 2006.
Clasificación PCT:
- C12N15/09 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Tecnología del ADN recombinante.
- C12Q1/68 C12 […] › C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS, ÁCIDOS NUCLEICOS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas, ácidos nucleicos o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › en los que intervienen ácidos nucleicos.
- C12Q1/70 C12Q 1/00 […] › en los que intervienen virus o bacteriófagos.
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