ENSAYOS DE CAPTURA.

SE PROPORCIONA UN METODO PARA DETERMINAR LA PRESENCIA Y/O CANTIDAD DE UN MICROORGANISMO Y/O SU MATERIAL INTRACELULAR PRESENTE EN UNA MUESTRA CARACTERIZADO EN QUE:

(A) EXPOSICION DE LA MUESTRA A UN AGENTE DE UNION ESPECIFICO QUE HA SIDO INMOVILIZADO MEDIANTE UN SUSTRATO SOLIDO, EL AGENTE DE UNION ESPECIFICO SIENDO CAPAZ DE UNIRSE AL MICROORGANISMO A SU MATERIAL INTRACELULAR DE MODO QUE LLEGUE A ESTAR ASOCIADO CON EL SUSTRATO SOLIDO, (B) EXPOSICION DEL SUSTRATO SOLIDO A UN AGENTE CAPAZ DE HACER ACCESIBLE A CINASA DE ADENILATO ASOCIADO CON EL MICROORGANISMO Y/O SU MATERIAL INTRACELULAR A SOLUCIONES APLICADAS AL SUSTRATO, (C) APLICACION DE UNA SOLUCION QUE CONTIENE DIFOSFATO DE ADENOSINA (ADP) AL SUSTRATO BAJO CONDICIONES POR LAS QUE PUEDE PRODUCIRSE TRIFOSFATO DE ADENOSINA (ATP) MEDIANTE CUALQUIER CINASA DE ADENILATO PRESENTE, Y (D) MEDICION DE LA CANTIDAD DE TRIFOSFATO DE ADENOSINA (ATP) Y RELACION CON LA PRESENCIA Y/O CANTIDAD DE MICROORGANISMOS O CONTENIDO INTRACELULAR. EL PASO (D) PUEDE LLEVARSE A CABO MEDIANTE UN ENSAYO QUE INCLUYA UNA REACCION FORMADORA DE COLOR, AUNQUE ES PREFERIBLEMENTE LLEVADA A CABO MEDIANTE EL USO DE REACTIVO DE LUCIFERASA/LUCIFERINA PARA PRODUCIR LUZ PROPORCIONAR A LA CANTIDAD DE ATP PRODUCIDA, Y QUE ES DETECTADA MEDIANTE UN LUMINOMETRO. PREFERIBLEMENTE EL PASO (C) INCLUYE LA PRESENCIA DE IONES DE MAGNESIO EN UNA CONCENTRACION MOLAR SUFICIENTE PARA PERMITIR LA CONVERSION MAXIMA DE ADP EN ATP. EN CONCRETO EL PASO (B) Y EL PASO (C) SE LLEVAN A CABO MEDIANTE LA ADICION DE EXTRACTO, ADP E IONES DE MAGNESIO A LA MUESTRA E INCUBANDO LA MEZCLA DURANTE UN PERIODO PREDETERMINADO PARA EFECTUAR LA CONVERSION DE ADP EN ATP.

Tipo: Resumen de patente/invención.

Solicitante: THE SECRETARY OF STATE FOR DEFENCE.

Nacionalidad solicitante: Reino Unido.

Dirección: DEFENCE EVALUATION & RESEARCH AGENCY,FARNBOROUGH, HAMPSHIRE GU14 6T.

Inventor/es: SQUIRRELL, DAVID JAMES.

Fecha de Publicación: 1 de Diciembre de 1999.

Fecha Solicitud PCT: 12 de Julio de 1995.

Fecha Concesión Europea: 1 de Septiembre de 1999.

Clasificación Internacional de Patentes:

C12Q1/04 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS, ÁCIDOS NUCLEICOS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas, ácidos nucleicos o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › Determinación de la presencia o del tipo de microorganismo; Empleo de medios selectivos para la investigación o análisis de antibióticos o bactericidas; Composiciones para este fin que contienen un indicador químico.
C12Q1/06 C12Q 1/00 […] › Determinación cuantitativa.
C12Q1/48 C12Q 1/00 […] › en los que interviene una transferasa.
C12Q1/66 C12Q 1/00 […] › en los que interviene una luciferasa.
G01N33/543 FISICA. › G01 METROLOGIA; ENSAYOS. › G01N INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION DE SUS PROPIEDADES QUIMICAS O FISICAS (procedimientos de medida, de investigación o de análisis diferentes de los ensayos inmunológicos, en los que intervienen enzimas o microorganismos C12M, C12Q). › G01N 33/00 Investigación o análisis de materiales por métodos específicos no cubiertos por los grupos G01N 1/00 - G01N 31/00. › con un soporte insoluble para la inmovilización de compuestos inmunoquímicos.
G01N33/569 G01N 33/00 […] › para microorganismos, p. ej. protozoarios, bacterias, virus.

Países PCT: Austria, Bélgica, Suiza, Alemania, Dinamarca, España, Francia, Reino Unido, Grecia, Italia, Liechtensein, Luxemburgo, Países Bajos, Portugal, Irlanda, Oficina Europea de Patentes.

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