Inhibidores de la activación del complemento.

Un anticuerpo monoclonal o un fragmento del mismo para el uso in vivo en el diagnóstico de la presencia de Factor D en el cuerpo humano

, en donde dicho anticuerpo o el fragmento se une al mismo epítopo sobre factor D humano que el anticuerpo monoclonal 166-32 producido por el hibridoma depositado en la American Type Culture Collection con el número de Registro HB-12476.

Tipo: Patente Europea. Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: E10182251.

Solicitante: GENENTECH, INC..

Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.

Dirección: 1 DNA WAY SOUTH SAN FRANCISCO, CA 94080-4990 ESTADOS UNIDOS DE AMERICA.

Inventor/es: SUN,WILLIAM,N, FUNG,MICHAEL SEK CHUNG, RY SUN,CECILY.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • SECCION C — QUIMICA; METALURGIA > BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE;... > MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS... > Células no diferenciadas humanas, animales o vegetales,... > C12N5/10 (Células modificadas por introducción de material genético extraño, p. ej. células transformadas por virus)
  • SECCION C — QUIMICA; METALURGIA > BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE;... > MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS... > Técnicas de mutación o de ingeniería genética;... > C12N15/09 (Tecnología del ADN recombinante)
  • SECCION A — NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA > CIENCIAS MEDICAS O VETERINARIAS; HIGIENE > PREPARACIONES DE USO MEDICO, DENTAL O PARA EL ASEO... > A61K45/00 (Preparaciones medicinales que contienen ingredientes activos no previstos en los grupos A61K 31/00 - A61K 41/00)
  • SECCION A — NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA > CIENCIAS MEDICAS O VETERINARIAS; HIGIENE > PREPARACIONES DE USO MEDICO, DENTAL O PARA EL ASEO... > Preparaciones medicinales que contienen antígenos... > A61K39/395 (Anticuerpos (aglutininas A61K 38/36 ); Inmunoglobulinas; Inmunosuero, p. ej. suero antilinfocitario)
  • SECCION A — NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA > CIENCIAS MEDICAS O VETERINARIAS; HIGIENE > ACTIVIDAD TERAPEUTICA ESPECIFICA DE COMPUESTOS QUIMICOS... > A61P43/00 (Medicamentos para usos específicos, no previstos en los grupos A61P 1/00 - A61P 41/00)
  • SECCION C — QUIMICA; METALURGIA > BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE;... > PROCESOS DE FERMENTACION O PROCESOS QUE UTILIZAN... > Preparación de péptidos o de proteínas (proteína... > C12P21/08 (Anticuerpos monoclonales)
  • SECCION C — QUIMICA; METALURGIA > BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE;... > MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS... > Enzimas, p. ej. ligasas (6.; Proenzimas; Composiciones... > C12N9/99 (Inactivación de enzimas por tratamiento químico)
  • SECCION A — NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA > CIENCIAS MEDICAS O VETERINARIAS; HIGIENE > ACTIVIDAD TERAPEUTICA ESPECIFICA DE COMPUESTOS QUIMICOS... > Medicamentos para el tratamiento de problemas inmunológicos... > A61P37/06 (Inmunosupresores, p. ej. medicamentos para el tratamiento del rechazo en injertos)
  • SECCION A — NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA > CIENCIAS MEDICAS O VETERINARIAS; HIGIENE > ACTIVIDAD TERAPEUTICA ESPECIFICA DE COMPUESTOS QUIMICOS... > A61P29/00 (Agentes analgésicos, antipiréticos o antiinflamatorios que no actúan sobre el sistema nervioso central, p. ej. agentes antirreumáticos; Antiinflamatorios no esteroideos (AINEs))
  • SECCION A — NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA > CIENCIAS MEDICAS O VETERINARIAS; HIGIENE > PREPARACIONES DE USO MEDICO, DENTAL O PARA EL ASEO... > A61K38/00 (Preparaciones medicinales que contienen péptidos (péptidos que contienen ciclos beta-lactama A61K 31/00; dipéptidos cíclicos que no tienen en su molécula ningún otro enlace peptídico más que los que forman su ciclo, p. ej. piperazina 2,5-dionas, A61K 31/00; péptidos basados en la ergolina A61K 31/48; que contienen compuestos macromoleculares que tienen unidades aminoácido repartidas estadísticamente A61K 31/74; preparaciones medicinales que contienen antígenos o anticuerpos A61K 39/00; preparaciones medicinales caracterizadas por los ingredientes no activos, p. ej. péptidos como soportes de fármacos, A61K 47/00))
  • SECCION C — QUIMICA; METALURGIA > BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE;... > PROCESOS DE FERMENTACION O PROCESOS QUE UTILIZAN... > Preparación de péptidos o de proteínas (proteína... > C12P21/02 (que tienen una secuencia conocida de varios aminoácidos, p. ej. glutation)
  • SECCION C — QUIMICA; METALURGIA > QUIMICA ORGANICA > PEPTIDOS (péptidos que contienen β -anillos lactamas... > Inmunoglobulinas, p. ej. anticuerpos mono o policlonales > C07K16/40 (contra enzimas)
  • SECCION C — QUIMICA; METALURGIA > BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE;... > SISTEMA DE INDEXACION ASOCIADO A LAS SUBCLASES C12C... > Microorganismos > C12R1/91 (Líneas celulares)

PDF original: ES-2488819_T3.pdf

 

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Fragmento de la descripción:

Inhibidores de la activación del complemento Campo de la invención Esta invención se refiere a las realizaciones caracterizadas en las reivindicaciones. Así, se refiere a un anticuerpo monoclonal o un fragmento del mismo para el uso en el diagnóstico de la presencia de Factor D en el cuerpo humano, en donde dicho anticuerpo o el fragmento se une al mismo epítopo sobre factor D humano que el anticuerpo monoclonal 166-32 producido por el hibridoma depositado en la American Type Culture Collection con el número de Registro HB-12476.

La presente invención también proporciona un método para el diagnóstico de la presencia de Factor D en el cuerpo humano, en donde un anticuerpo monoclonal o un fragmento del mismo se une al mismo epítopo sobre factor D humano que el anticuerpo monoclonal 166-32 producido por el hibridoma depositado en la American Type Culture Collection con el número de Registro HB-12476.

Antecedentes de la invención El sistema del complemento desempeña un papel central en el aclaramiento de inmunocomplejos y en la inmunorrespuesta frente a agentes infecciosos, antígenos extraños, células infectadas por virus y células tumorales. Sin embargo, el complemento también participa en la inflamación patológica y en enfermedades autoinmunitarias. Por lo tanto, la inhibición de una activación excesiva o incontrolada de la cascada del complemento podría proporcionar beneficios clínicos a pacientes con esas enfermedades y situaciones.

El sistema del complemento abarca dos rutas de activación diferentes, denominadas la ruta clásica y la ruta alternativa (V.M. Holers, En Clinical Immunology: Principles and Practice, Compilador R.R. Rich, Mosby Press; 1996, 363-391) . La ruta clásica es una cascada dependiente de calcio/magnesio que normalmente se activa por la formación de complejos antígeno-anticuerpo. La ruta alternativa es una cascada dependiente de magnesio que se activa por el depósito y la activación de C3 sobre determinadas superficies susceptibles (p. ej., sobre polisacáridos de la pared celular de levaduras y bacterias, y sobre determinados materiales biopoliméricos) . La activación de la ruta del complemento genera fragmentos biológicamente activos de las proteínas del complemento, p. ej., las anafilatoxinas C3a, C4a y C5a, y los complejos C5b-9 de ataque a la membrana (MAC) , que median en actividades inflamatorias en las que participan la quimiotaxis leucocitaria, activación de macrófagos, neutrófilos, plaquetas, células cebadas y células endoteliales, permeabilidad vascular, citolisis y daño tisular.

El factor D es una serina-proteasa muy específica, esencial para la activación de la ruta alternativa del complemento. Escinde el factor B unido a C3b, generando la enzima C3b/Bb que es el componente activo de las convertasas C3/C5 de la ruta alternativa. El factor D puede ser una diana adecuada para la inhibición, debido a que su concentración plasmática en seres humanos es muy baja (1, 8 μg/ml) y se ha demostrado que es la enzima limitante de la activación de la ruta alternativa del complemento (P.H. Lesavre y H.J. Müller-Eberhard. J. Exp. Med., 1978;

148: 1498-1510; J.E. Volanakis y col., New Eng. J. Med., 1985; 312: 395-401) .

Se ha demostrado que la regulación por disminución de la activación del complemento es efectiva en el tratamiento de varias indicaciones de enfermedades en modelos animales y en estudios ex vivo, p. ej., lupus eritematoso sistémico y glomerulonefritis (Y. Wang y col., Proc. Natl. Acad. Sci.; 1996, 93: 8563-8568) , artritis reumatoide (Y. Wang y col., Proc. Natl. Acad. Sci., 1995; 92: 8955-8959) , circulación extracorpórea cardiopulmonar y hemodiálisis (C.S. Rinder, J. Clin. Invest., 1995; 96: 1564-1572) , rechazo hiperagudo en el trasplante de órganos (T.J. Kroshus y col., Transplantation, 1995; 60: 1194-1202) , infarto de miocardio (J.W. Homeister y col., J. Immunol., 1993; 150: 1055-1064; H.F. Weisman y col., Science, 1990; 249: 146-151) , daño producido por reperfusión (E.A. Amsterdam y col., Am. J. Physiol., 1995; 268: H448-H457) , y síndrome de insuficiencia respiratoria en el adulto (R. Rabinovici y col., J. Immunol., 1992; 149: 1744-1750) . Además, otras situaciones inflamatorias y enfermedades autoinmunitarias/enfermedades producidas por inmunocomplejos, están también estrechamente asociadas con la activación del complemento (V.M. Holers, ibid., B.P. Morgan. Eur. J. Clin. Invest., 1994: 24: 219-228) , e incluyen daño térmico, asma grave, choque anafiláctico, inflamación intestinal, urticaria, angioedema, vasculitis, esclerosis múltiple, miastenia grave, glomerulonefritis membranoproliferativa y síndrome de Sjögren.

Niemann et al., Journal of Immunology 132 (2) (1984) , 809-815 y Pascal et al., Journal of Immunological Methods 127 (1990) , 263-269 divulgan anticuerpos monoclonales anti-factor D que, sin embargo, reconocen un epítopo que es diferente del epítopo del anticuerpo de la presente invención. Por otra parte, ambos documentos no hacen mención a la consecuencia potencial como herramienta de diagnóstico si el factor D está bloqueado.

Compendio de la invención La invención proporciona un anticuerpo monoclonal o un fragmento del mismo para el uso en el diagnóstico de la presencia de Factor D en el cuerpo humano, en donde dicho anticuerpo o el fragmento se une al mismo epítopo sobre factor D humano que el anticuerpo monoclonal 166-32 producido por el hibridoma depositado en la American Type Culture Collection con el número de Registro HB-12476.

Se generó el anticuerpo monoclonal que se unió al factor D y que bloqueó su capacidad para activar el complemento, y se designó 166-32. El hibridoma que produce este anticuerpo se depositó en la American Type Culture Collection, 10801 University Blvd., Manassas, VA 20110-2209, con el Número de Registro HB-12476008]

Descripción de los dibujos La Fig. 1 muestra la unión de anticuerpos monoclonales (Mab) (del inglés, “Monoclonal antibodies”) anti-Factor D al factor D humano purificado, en un ensayo ELISA. La línea marcada con círculos rellenos representa el MAb 166-11. La línea marcada con triángulos rellenos representa el MAb 166-32. La línea marcada con rombos rellenos representa el MAb 166-188. La línea marcada con cuadrados rellenos representa el MAb 166-222. El eje Y representa la reactividad de los MAb con el factor D, expresada en forma de la densidad óptica (OD) a 450 nm y el eje X representa la concentración de los mAb.

La Fig. 2 muestra la inhibición de la hemolisis por la ruta alternativa (AP) (del inglés, “Alternative Pathway”) de glóbulos rojos (RBC) (del inglés, “Red Blood Cells”) de conejo no sensibilizado, por acción del MAb 166-32 en presencia de suero humano al 10%. La línea marcada con cuadrados rellenos representa el MAb 166-32. La línea marcada con círculos rellenos representa el MAb G3-519 irrelevante de control, emparejado por isotipo, que es específico para la glicoproteína gp120 de la envoltura del HIV. El eje Y representa el % de inhibición de la hemolisis, según se describe más adelante en el texto. El eje X representa la concentración de los mAb.

La Fig. 3 muestra la inhibición de la hemolisis por la ruta alternativa (AP) de glóbulos rojos (RBC) de conejo no sensibilizado, por acción del MAb 166-32 en presencia de suero humano al 90%. La línea marcada con cuadrados rellenos representa el MAb 166-32. La línea marcada con círculos rellenos representa el MAb G3-519 irrelevante de control, emparejado por isotipo, que es específico de la glicoproteína gp120 de la envoltura del HIV. El eje Y representa el % de inhibición de la hemolisis, según se describe más adelante en el texto. El eje X representa la concentración de los MAb.

La Fig. 4 muestra que el MAb 166-32... [Seguir leyendo]

 


Reivindicaciones:

1. Un anticuerpo monoclonal o un fragmento del mismo para el uso in vivo en el diagnóstico de la presencia de Factor D en el cuerpo humano, en donde dicho anticuerpo o el fragmento se une al mismo epítopo sobre factor D humano que el anticuerpo monoclona.

16. 32 producido por el hibridoma depositado en la American Type Culture Collection con el número de Registro HB-12476.

2. Un método para el diagnóstico de la presencia de Factor D en el cuerpo humano, en donde un anticuerpo monoclonal o un fragmento del mismo se une al mismo epítopo sobre factor D humano que el anticuerpo monoclona.

16. 32 producido por el hibridoma depositado en la American Type Culture Collection con el número de Registro HB-12476.

3. El anticuerpo según la reivindicación 1 o el método según la reivindicación 2, en el que el Factor D está presente en un espécimen tisular.

4. El anticuerpo según la reivindicación 1 o el método según la reivindicación 2, en el que el Factor D está presente en una muestra de fluido corporal.

5. El anticuerpo según la reivindicación 1 o el método según la reivindicación 2, en el que la muestra de fluido 15 corporal es suero, plasma, orina o fluido cefalorraquídeo.

6. El anticuerpo según la reivindicación 1 o el método según la reivindicación 2, en el que se cuantifica la presencia de Factor D.

7. El anticuerpo según la reivindicación 1 o el método según la reivindicación 2, en el que la presencia de Factor D está por debajo del nivel normal.

8. El anticuerpo según la reivindicación 1 o el método según la reivindicación 2, en el que la presencia de Factor D está por encima del nivel normal.