Métodos para cambiar el perfil isoeléctrico de un producto proteico y sus usos.
Un método para cambiar el perfil isoeléctrico de un producto de proteína recombinante que tiene siete subpoblaciones de proteínas con un punto isoeléctrico entre aproximadamente 5,
45 y aproximadamente 6,55, en donde el producto de proteína recombinante es eculizumab y el método comprende:
(a) el cultivo semicontinuo de células de mamífero que comprenden un ácido nucleico que codifica una proteína recombinante en un biorreactor de producción en condiciones suficientes para producir el producto durante un primer período de tiempo que consiste en una fase de crecimiento o una fase de crecimiento y una fase estacionaria de las células de mamífero o que comprende una fase de crecimiento de las células de mamífero y termina en un punto temporal crítico;
(b) incubar el producto en condiciones suficientes para cambiar el perfil isoeléctrico del producto hacia un perfil más ácido durante un segundo período de tiempo que consiste en al menos 6 horas de una fase de declive de las células de mamífero, en donde el perfil más ácido comprende un aumento en la cantidad de la cuarta subpoblación de proteínas más ácidas de las siete subpoblaciones de proteínas, y una disminución en la cantidad de la primera y segunda subpoblaciones de proteínas más básicas de las siete subpoblaciones de proteínas, en donde las condiciones suficientes para cambiar el perfil isoeléctrico del producto hacia un perfil más ácido comprenden (i) incubar en una concentración de oxígeno disuelto (dO2) de entre aproximadamente el 20 % a aproximadamente el 45 %; (ii) incubar en un medio que tiene un pH de entre aproximadamente 7,0 y aproximadamente 7,3; y/o (iii) incubar a una temperatura de entre aproximadamente 30 ºC y aproximadamente 37,5 ºC.
Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/US2015/055276.
Solicitante: ALEXION PHARMACEUTICALS, INC..
Inventor/es: MALANSON,HUNTER F, JALURIA,PRATIK, ALFORD,RACHAEL.
Fecha de Publicación: .
Clasificación Internacional de Patentes:
- C12N15/09 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Tecnología del ADN recombinante.
- C12N5/00 C12N […] › Células no diferenciadas humanas, animales o vegetales, p. ej. líneas celulares; Tejidos; Su cultivo o conservación; Medios de cultivo para este fin (reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00).
PDF original: ES-2743903_T3.pdf
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