Selección de células hospedantes que expresan proteína a altos niveles.
(21/03/2012) Una molécula de ADN que comprende una unidad de transcripción multicistrónica que codifica i) un polipéptidomarcador seleccionable capaz de ser seleccionado en una célula hospedante eucariota, y ii) un polipéptido deinterés, teniendo el polipéptido de interés una secuencia de iniciación de la traducción separada de la del polipéptidomarcador seleccionable,
en la que
la secuencia codificante para el polipéptido de interés está en dirección 3' de la secuencia codificante parael marcador seleccionable en dicha unidad de transcripción multicistrónica, y
la secuencia que codifica el polipéptido marcador seleccionable no tiene ninguna secuencia ATG en lahebra codificante tras el codón de inicio del polipéptido marcador seleccionable hasta el codón de inicio delpolipéptido de interés, y en la que la secuencia de inicio de la traducción en la…
MÉTODO PARA MEJORAR LA PRODUCCIÓN DE PROTEÍNAS.
(06/02/2012) Unidad de expresión de proteína que comprende funcionalmente unidos de 5' a 3': i) un promotor, ii) un marco de lectura abierto que codifica para una proteína de interés y iii) una secuencia señal de terminación de la transcripción, caracterizada por que dicha unidad de expresión de proteína comprende además al menos una segunda secuencia señal de terminación de la transcripción ubicada en el sentido de 3' de dicho marco de lectura abierto, en la que dicha segunda secuencia señal de terminación de la transcripción está en orientación opuesta de la primera secuencia señal de terminación de la transcripción, y en la que dicha segunda secuencia señal de terminación de la transcripción se escoge de las secuencias presentadas en la tabla 1
FRAGMENTOS DE ADN QUE AUMENTAN LA EXPRESIÓN, USO DE LOS MISMOS Y PROCEDIMIENTOS PARA ENCONTRARLOS.
(25/01/2012) Una molécula de ADN recombinante que comprende un fragmento de ADN que aumenta la expresión seleccionado del grupo constituido por:
a) SEQ ID NO 3;
b) SEQ ID NO 4;
c) fragmentos de a) o b), en los que dichos fragmento tienen actividad que aumenta la expresión; y
d) secuencias que son al menos un 70% idénticas en secuencia de nucleótidos a a), b) o c), en las que dichas secuencias tienen actividad que aumenta la expresión;
comprendiendo adicionalmente dicha molécula de ADN recombinante un casete de expresión, comprendiendo dicho casete de expresión un promotor heterólogo unido a un ácido nucleico de interés.
SELECCIÓN DE CÉLULAS HOSPEDADORAS QUE EXPRESAN PROTEÍNA A ALTOS NIVELES.
(04/11/2011) Una molécula de ADN que comprende: una unidad de transcripción multicistrónica que comprende al menos una secuencia de codificación que codifica tanto i) un polipéptido de interés, como ii) un polipéptido marcador seleccionable funcional en una célula hospedadora eucariótica, en la que el polipéptido de interés tiene una secuencia de iniciación de la traducción separada de la del polipéptido marcador seleccionable, en la que al menos una secuencia de codificación del polipéptido de interés está en dirección 5' de al menos una secuencia de codificación del polipéptido marcador seleccionable en dicha unidad de transcripción multicistrónica, en la que está presente un sitio de entrada interna del ribosoma (IRES) en dirección 3' a al menos una secuencia de codificación del polipéptido de interés y en dirección 5' a…
MÉTODO PARA LA PRODUCCIÓN SIMULTÁNEA DE MÚLTIPLES PROTEÍNAS; VECTORES Y CÉLULAS PARA SU USO EN EL MISMO.
(30/06/2011) Célula que comprende dos unidades de expresión de proteínas que codifican cada una para al menos una proteína de interés, caracterizada por que: una de dichas unidades de expresión de proteínas comprende al menos una secuencia de antirrepresor de estabilización (STAR) elegida del grupo que consiste en (a) SEQ ID: 7 en la figura 6; (b) una secuencia derivada de SEQ ID: 7 en la figura 6 mediante deleción, modificación y/o inserción de una base; y (c) un fragmento funcional de SEQ ID: 7 en la figura 6; y en la que la otra unidad de expresión de proteínas comprende al menos una secuencia de antirrepresor de estabilización (STAR) elegida del grupo que consiste en: (a) SEQ ID: 1-65 en la figura 6; (b) una secuencia derivada de SEQ ID: 1-65 en la figura 6 mediante deleción, modificación y/o inserción de una base; y (c) un fragmento funcional de SEQ ID: 1-65…
SELECCIÓN DE CÉLULAS HUÉSPED QUE EXPRESAN PROTEÍNA EN ALTOS NIVELES.
(08/04/2011) Molécula de ADN que comprende una secuencia de marco de lectura abierto que codifica para un polipéptido marcador seleccionable que proporciona resistencia frente a zeocina o frente a neomicina, caracterizada porque dicha molécula de ADN en la cadena codificante para el polipéptido marcador seleccionable tiene un codón de iniciación GTG o un codón de iniciación TTG, y porque se ha mutado la secuencia de marco de lectura abierto que codifica para la proteína marcadora seleccionable para sustituir al menos la mitad de sus dinucleótidos de CpG en comparación con la secuencia nativa de marco de lectura a b i e r t o q u e c o d i f i c a p a ra l a p…
SECUENCIAS DE ADN QUE TIENEN ACTIVIDAD ANTI-REPRESORA.
(30/11/2010) Una secuencia de ADN aislada y/o recombinante que tiene actividad anti-represora, seleccionada dicha secuencia del grupo que consiste en: (a) el SEQ ID: 9 de la Figura 20; (b) un fragmento del SEQ ID: 9 de la Figura 20; (c) una secuencia derivada del SEQ ID: 9 de la Figura 20 por inserción, deleción y/o mutación de una o más bases; donde la actividad anti-represora de dicha secuencia confiere a una célula de osteosarcoma U-2 OS humana la capacidad para crecer después de 4-5 semanas de cultivo en presencia de 250 µg/ml de Zeocina y 0,1 ng/ml de doxiciclina, cuando dicha célula comprende una proteína de fusión represora de LexA que contiene el dominio de unión a ADN de LexA y una región codificadora de HP1 o HPC2 bajo el control del sistema regulador de la transcripción Tet-Off, cuando dicha secuencia de ADN aislada y/o recombinante es clonada en una secuencia…
SECUENCIAS DE ADN CON ACTIVIDAD ANTI-REPRESORA.
(17/08/2010) Una secuencia de ADN aislada y/o recombinante que tiene actividad anti-represora, seleccionada dicha secuencia del grupo que consiste en:
(a) el SEQ ID: 17 de la Figura 20;
(b) un fragmento del SEQ ID: 17 de la Figura 20;
(c) una secuencia derivada del SEQ ID: 17 de la Figura 20 por inserción, deleción y/o mutación de una o más bases;
donde la actividad anti-represora de dicha secuencia confiere a una célula de osteosarcoma U-2 OS humana la capacidad para crecer después de 4-5 semanas de cultivo en presencia de 250 µg/ml de Zeocina y 0,1 ng/ml de doxiciclina, cuando dicha célula comprende una proteína de fusión represora de LexA que contiene el dominio de unión a ADN de LexA y una región codificadora de HP1 o HPC2 bajo el control del sistema regulador de la transcripción…
SECUENCIAS DE ADN CON ACTIVIDAD ANTI-REPRESORA.
(17/08/2010) Una secuencia de ADN aislada y/o recombinante que tiene actividad anti-represora, seleccionada dicha secuencia del grupo que consiste en:
(a) el SEQ ID: 45 de la Figura 20;
(b) un fragmento del SEQ ID: 45 de la Figura 20;
(c) una secuencia derivada del SEQ ID: 45
de la Figura 20 por deleción inserción y/o mutación de una o más bases; donde la actividad anti-represora de dicha secuencia confiere a una célula de osteosarcoma U-2 OS humana la capacidad para crecer después de 4-5 semanas de cultivo en presencia de 250 µg/ml de Zeocina y 0,1 ng/ml de doxiciclina, cuando dicha célula comprende una proteína de fusión represora…
SECUENCIAS DE ADN CON ACTIVIDAD ANTI-REPRESORA.
(17/08/2010) Una secuencia de ADN aislada y/o recombinante que tiene actividad anti-represora, seleccionada dicha secuencia del grupo que consiste en:
(a) el SEQ ID: 44 de la Figura 20;
(b) un fragmento del SEQ ID: 44 de la Figura 20;
(c) una secuencia derivada del SEQ ID: 44 de la Figura 20 por inserción, deleción y/o mutación de una o más bases;
donde la actividad anti-represora de dicha secuencia confiere a una célula de osteosarcoma U-2 OS humana la capacidad para crecer después de 4-5 semanas de cultivo en presencia de 250 µg/ml de Zeocina y 0,1 ng/ml de doxiciclina, cuando dicha célula comprende una proteína de fusión represora de LexA que contiene el dominio…
SECUENCIA NOVEDOSA PARA MEJORAR LA EXPRESION DE ACIDO NUCLEICO.
Sección de la CIP Química y metalurgia
(16/04/2008). Ver ilustración. Solicitante/s: CHROMAGENICS B.V.. Clasificación: C12Q1/68.
Una molécula de ácido nucleico recombinante, que comprende una secuencia de ácido nucleico tiene una actividad anti-represora seleccionada del grupo que consiste de: a) SEQ. ID. NO. 66, b) fragmentos de SEQ. ID. NO. 66 en donde el fragmento tiene actividad anti-represora, c) secuencias que son al menos 70% idénticas en secuencia de nucleótidos al a) o b) en donde dichas secuencias tienen actividad anti-represora; y d) el complemento de uno cualesquiera de a) hasta c); dicha molécula de ácido nucleico recombinante comprende además un casete de expresión, dicho casete de expresión comprende un promotor heterólogo ligado a un ácido nucleico de interés, y en donde dicho ácido nucleico de interés codifica preferiblemente todo o parte de una proteína de interés.
PROCEDIMIENTO DE DETECCION DE UNA SECUENCIA DE ADN, PROCEDIMIENTO DE PREPARACION DE UNA CONSTRUCCION DE ADN Y USO DE LOS MISMOS.
(01/03/2008) Un procedimiento de detección, y opcionalmente selección, de una secuencia de ADN, en la que la secuencia de ADN que se va a detectar posee una cualidad que potencia la expresión estable, comprendiendo el procedimiento las etapas de: 1) clonar en un vector fragmentos de ADN con un tamaño de < 5000 pares de bases en una localización entre i) una secuencia de ADN reconocida por un complejo de proteínas represoras, estando el complejo de proteínas represoras involucrado en la inducción de la cromatina que reprime la transcripción genética, y ii) un gen informador que comprende un promotor, que da como resultado una variedad de vectores que comprenden un fragmento, en el que la distancia entre la secuencia de ADN reconocida por un complejo de proteínas represoras y el gen informador es inferior a 5000 pares de bases;…
SECUENCIAS DE ADN CON UNA ACTIVIDAD ANTI-REPRESORA.
(16/11/2007) Una secuencia de ADN aislada y/o recombinante que tiene actividad anti-represora, seleccionada dicha secuencia del grupo que consiste en: #(a) el SEQ ID: 7 de la Figura 20; #(b) un fragmento del SEQ ID: 7 de la Figura 20; (c) un homólogo o derivado funcional del SEQ ID: 7 de la Figura 20; donde la actividad anti-represora de dicha secuencia confiere a una célula de osteosarcoma U-2 OS humana la capacidad para crecer después de 4-5 semanas de cultivo en presencia de 250 mig/ml de Zeocina y 0, 1 ng/ml de doxiciclina, cuando dicha célula comprende una proteína de fusión represora de LexA que contiene el dominio de unión a ADN de LexA y una región codificadora de HP1 o HPC2 bajo el control del sistema…
SECUENCIAS DE ADN QUE COMPRENDEN CUALIDADES MODULADORAS DE LA TRANSCRIPCION GENETICA Y METODOS DE DETECCION Y UTILIZACION DE ESTAS SECUENCIAS DE ADN.
(16/05/2007) Un método para seleccionar una secuencia de ADN capaz al menos en parte de contrarrestar la formación de cromatina represora de la transcripción génica, que comprende proporcionar un sistema de transcripción que comprende células huésped con una variedad de vectores que comprenden fragmentos, comprendiendo dichos vectores fragmentos de ADN genómico humano, comprendiendo dichos vectores adicionalmente i) un elemento con una cualidad represora de la transcripción génica que da como resultado la cromatina represora de la transcripción génica, y ii) un promotor que dirige la transcripción de un gen de resistencia a la zeocina, la transcripción de cuyo gen de resistencia…
