Método para la detección y/o cuantificación directa de al menos un compuesto con un peso molecular de como mínimo 200.
Método para la detección y cuantificación directa de al menos un compuesto con un peso molecular de al menos 200,
en donde el compuesto es una molécula químicamente compleja, en donde dicha molécula químicamente compleja es un inositol polifosfato seleccionado del grupo que contiene de 2 a 6 grupos fosfato, incluidos iones o sales de los mismos, en donde el compuesto o compuestos están dentro de una matriz biológica, en donde dicha matriz biológica es un fluido seleccionado de la lista que consiste en sangre, plasma, suero, orina, saliva, líquido linfático, líquido cefalorraquídeo y mezclas de los mismos, en donde el método comprende al menos las siguientes etapas:
i) preparar al menos una muestra estándar de la molécula químicamente compleja para ser detectada y cuantificada;
ii) introducción de la muestra estándar en la corriente de un sistema disolvente; en donde el sistema disolvente consiste en una solución acuosa de una amina; en donde el pH del disolvente ha sido ajustado, entre 8 y 13;
iii) pasar la muestra y el sistema disolvente a través de al menos una columna en la que la columna es una fase estacionaria de fase inversa, siendo el tamaño de partícula entre 1,5-15 micrones y el tamaño de poro entre 60- 500 Angstroms, mientras mantiene la presión del sistema entre 5 y 1500 atm;
iv) identificar el tiempo de retención y cuantificar la intensidad de la señal de cuándo la molécula químicamente compleja se eluye, mediante un detector de masas;
v) preparar una muestra de la molécula químicamente compleja a partir de una matriz biológica que comprende la molécula químicamente compleja para ser detectar y cuantificar, en donde el proceso para preparar la muestra comprende al menos disolver total o parcialmente la matriz biológica para formar una solución o una suspensión y, si es necesario, tratar la solución o la suspensión para eliminar partículas en suspensión;
vi) repetir los pasos (ii) y (iii) con la muestra preparada en el paso (v); juntos o secuencialmente con el estándar; y
vii) detectar y cuantificar la presencia de la molécula químicamente compleja por comparación del tiempo de retención e intensidad de la señal de la muestra estándar o las muestras estándar, o por comparación del tiempo de retención e intensidad de la señal obtenida de estudios previos o de la literatura,
donde el detector capaz de detectar la elución de la molécula químicamente compleja es un espectrómetro de masas; un espectrómetro de masas en tándem o un cuadrupolo único; trabajando bajo cualquiera de los siguientes modos de operación: supervisión de iones seleccionados (SIM); supervisión de reacción múltiple (MRM); supervisión de la reacción seleccionada (SRM) y SCAN (negativo / positivo); o una combinación de ellos.
Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/EP2012/069878.
Solicitante: LABORATORIS SANIFIT, S.L.
Nacionalidad solicitante: España.
Inventor/es: ISERN AMENGUAL,BERNAT, TUR ESPINOSA,FERNANDO, PERELLÓ BERSTARD,JOAN, MARASCHIELLO DE ZUANI,CIRIACO, LENTHÉRIC,IRÉNE, MENDOZA DE LAS HERAS,PAULA, TUR TUR,EVA, ENCABO ALARCÓN,MÁXIMO, MARTÍN BECERRA,EVA, BENITO AMENGUAL,MARÍA DE MAR.
Fecha de Publicación: .
Clasificación Internacional de Patentes:
- G01N33/50 FISICA. › G01 METROLOGIA; ENSAYOS. › G01N INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION DE SUS PROPIEDADES QUIMICAS O FISICAS (procedimientos de medida, de investigación o de análisis diferentes de los ensayos inmunológicos, en los que intervienen enzimas o microorganismos C12M, C12Q). › G01N 33/00 Investigación o análisis de materiales por métodos específicos no cubiertos por los grupos G01N 1/00 - G01N 31/00. › Análisis químico de material biológico, p. ej. de sangre o de orina; Ensayos mediante métodos en los que interviene la formación de uniones bioespecíficas con grupos coordinadores; Ensayos inmunológicos (procedimientos de medida o ensayos diferentes de los procedimientos inmunológicos en los que intervienen enzimas o microorganismos, composiciones o papeles reactivos a este efecto, procedimientos para preparar estas composiciones, procedimientos de control sensibles a las condiciones del medio en los procedimientos microbiológicos o enzimáticos C12Q).
PDF original: ES-2714402_T3.pdf
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