Método para la producción en masa de factor VII/VIIa.

Un método para la producción en masa de factor de coagulación VII humano,

que comprende:

a) construir un vector de expresión que tiene i) un promotor de dihidrofolato reductasa que carece de una o más secuencias de repetición CCGCC de la región rica en GC del mismo y un gen de dihidrofolato reductasa (DHFR) operativamente unido al mismo y ii) un promotor de citomegalovirus (CMV) y un gen del factor de coagulación VII humano operativamente unido al mismo;

b) transfectar el vector de expresión del paso a) en una línea de células animales;

c) cultivar la línea de células animales transfectada del paso b) en presencia de un inhibidor de dihidrofolato reductasa para seleccionar células que expresan el factor de coagulación VII humano con alta eficacia; y

d) añadir butirato de sodio a las células animales seleccionadas del paso c), en donde la línea de células animales seleccionada carece de gen de dihidrofolato reductasa y es HMF708 (No. de registro KCTC 11779BP), en donde el butirato de sodio del paso d) varía en concentración desde 0,1 a 3,0 mM.

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/KR2011/008040.

Solicitante: Hanmi Science Co., Ltd. .

Nacionalidad solicitante: República de Corea.

Dirección: 550, Dongtangiheung-ro, Dongtan-myeon Hwaseong-si, Gyeonggi-do 445-813 REPUBLICA DE COREA.

Inventor/es: KWON, SE CHANG, KIM, CHANG HWAN, HONG,SUNG KAP, LEE,BYUNG SUN, HONG,SUNG HWAN.

Fecha de Publicación: 20 de Julio de 2016.

Clasificación Internacional de Patentes:

C07K14/745 QUIMICA; METALURGIA. › C07 QUIMICA ORGANICA. › C07K PEPTIDOS (péptidos que contienen β -anillos lactamas C07D; ipéptidos cíclicos que no tienen en su molécula ningún otro enlace peptídico más que los que forman su ciclo, p. ej. piperazina diones-2,5, C07D; alcaloides del cornezuelo del centeno de tipo péptido cíclico C07D 519/02; proteínas monocelulares, enzimas C12N; procedimientos de obtención de péptidos por ingeniería genética C12N 15/00). › C07K 14/00 Péptidos con más de 20 aminoácidos; Gastrinas; Somatostatinas; Melanotropinas; Sus derivados. › Factores de coagulación sanguínea o de fibrinolisis.
C12N15/12 C […] › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Genes que codifican proteínas animales.
C12N15/85 C12N 15/00 […] › para células animales.

PDF original: ES-2597966_T3.pdf

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