Sistema para derivar un eluyente de cromatografía de líquidos.

Un sistema derivador para cromatografía de líquidos para reducir o eliminar componentes interferentes de lamatriz en un producto biofarmacéutico en un sistema de cromatografía de líquidos-espectrometría de masas,

que comprende: una válvula de inyección de seis puertos;

Un puerto de la válvula de inyección de seis puertos de entrada del eluyente, estando el puerto de entrada deleluyente en conexión mediante un flujo de líquido con una columna de cromatografía de líquidos; y

Un puerto de la válvula de inyección de seis puertos de salida al espectrómetro de masas, estando el puerto desalida al espectrómetro de masas en conexión mediante un flujo de líquido con un espectrómetro de masas;

Un medio para conmutar automáticamente la válvula entre una configuración de flujo a residuos y unaconfiguración de flujo a la fuente, derivando la configuración de flujo a residuos un flujo completo desde elpuerto de entrada del eluyente para que se dirija a residuos, y dirigiendo la configuración de flujo a la fuente elflujo completo desde el puerto de entrada del eluyente para que se dirija al espectrómetro de masas;

El sistema derivador que además comprende un bucle de flujo de calibración entre dos puertos adyacentes dela válvula de inyección de seis puertos, dirigiendo la configuración de flujo a residuos el flujo de un líquido decalibración a través del bucle de flujo de calibración y al espectrómetro de masas, y dirigiendo la configuraciónde flujo a la fuente el flujo del líquido de calibración a residuos y formando un bucle de flujo cerrado que incluyeel bucle de flujo de calibración.

Sistema para derivar un eluyente de cromatografía de líquidos Solicitud relacionada Esta solicitud reivindica el beneficio de la Solicitud Provisional de EE.UU. No. 60/966.116 registrada el 24 de agosto de 2007.

Antecedentes de la invención Los dispositivos filtrantes se usan extensamente para separar partículas y microorganismos o purificar proteínas de productos biofarmacéuticos. Durante la filtración, podrían extraerse materiales de un dispositivo filtrante en un producto y afectar a su eficacia y seguridad. La FDA requiere la evaluación de productos extraíbles del filtro para productos tipo fármacos tanto para seres humanos como animales.

Los compuestos extraíbles del filtro son mezclas complejas que principalmente consisten en bajas concentraciones de oligómeros y aditivos de diversas propiedades físicas y químicas. Puesto que la concentración de otros componentes del producto biofarmacéutico será mayor, la señal analítica de los compuestos extraíbles del filtro puede estar enmascarada y, por lo tanto, hacer su presencia indetectable. Convencionalmente, se usa el Enfoque de la Corriente Modelo (en inglés “Model Stream Approach”) (Stone, T.E.; Goel, V.; Leszczak, J. Farmaceutical Tech. 1994, 116-130) para estudiar los compuestos extraíbles presentes tras la etapa de filtración. Durante este método, el dispositivo filtrante se somete a un disolvente modelo que estimula efectos químicos específicos de una disolución farmacéutica. Bajo este principio, los disolventes modelo se seleccionen para que representen los extremos del entorno (pH alto o bajo, altas concentraciones salinas, o disolventes orgánicos) al cual el dispositivo filtrante puede ser expuesto, pero que no son idénticas al contenido real del producto biofarmacéutico. Puede crearse un "escenario del peor de los casos" en condiciones agresivas en las que se maximiza el contenido de compuestos extraíbles del filtro. Para detectar la presencia de compuestos extraíbles en el disolvente modelo durante el procedimiento de ensayo se emplean técnicas analíticas, tales como la cromatografía de líquidos con detección UV (LCUV) , la cromatografía de gases -espectrometría de masas (GCMS) y la espectrometría de infrarrojos con transformada de Fourier.

La Publicación de Solicitud de Patente de EE.UU. No. 2007/048187 A1 proporciona un método y aparato para optimizar un sistema de cromatografía de líquidos/espectrometría de masas para la elución en gradiente. Se determinan un perfil de temperatura y un perfil de flujo basados en las características de una matriz cuando la matriz eluye desde una columna a una interfase de ionización a presión atmosférica.

La Patente de EE.UU. No. 5.703.360 proporciona un sistema de calibración automatizado para usar en un aparato de separación de líquidos/espectrometría de masas. El sistema de calibración se presuriza neumáticamente para mover forzadamente un líquido de referencia desde el sistema de calibración a una fuente de iones. La fuente de iones está en comunicación fluida con una válvula de conmutación y con un espectrómetro de masas. La válvula de conmutación comunica el efluente de un sistema de separación de líquidos con la fuente cuando la válvula de conmutación está en una primera posición, y comunica los líquidos de referencia del sistema de calibración con la fuente cuando la válvula de conmutación está en una segunda posición.

Compendio de la invención Según la presente invención, se proporciona un desviador para cromatografía de líquidos para reducir o eliminar los componentes interferentes de la matriz en un producto biofarmacéutico en un sistema de cromatografía de líquidosespectrometría de masas, que comprende: una válvula de inyección de seis puertos;

Un puerto de la válvula de inyección de seis puertos de entrada del eluyente, estando el puerto de entrada del eluyente en conexión mediante un flujo de líquido con una columna de cromatografía de líquidos; y

Un puerto de la válvula de inyección de seis puertos de salida al espectrómetro de masas, estando el puerto de salida al espectrómetro de masas en conexión mediante un flujo de líquido con un espectrómetro de masas;

Un medio para conmutar automáticamente la válvula entre una configuración de flujo a residuos y una configuración de flujo a la fuente, derivando la configuración de flujo a residuos un flujo completo desde el puerto de entrada del eluyente para que se dirija a residuos, y dirigiendo la configuración de flujo a la fuente el flujo completo desde el puerto de entrada del eluyente para que se dirija al espectrómetro de masas;

El sistema derivador que además comprende un bucle de flujo de calibración entre dos puertos adyacentes de la válvula de inyección de seis puertos, dirigiendo la configuración de flujo a residuos el flujo de un líquido de calibración a través del bucle de flujo de calibración y al espectrómetro de masas, y dirigiendo la configuración de flujo a la fuente el flujo del líquido de calibración a residuos y formando un bucle de flujo cerrado que incluye el bucle de flujo de calibración.

Así, la válvula de inyección de seis puertos está configurada para que se conmute automáticamente entre una configuración de flujo a residuos y una configuración de flujo a la fuente, derivando la configuración de flujo a residuos un flujo completo desde el puerto de entrada del eluyente para que se dirija a residuos, y dirigiendo la configuración de flujo a la fuente el flujo completo desde el puerto de entrada del eluyente para que se dirija al espectrómetro de masas.

En otras realizaciones relacionadas, el puerto de salida al espectrómetro de masas puede ser un puerto de la válvula de inyección de seis puertos adyacente al puerto de entrada del eluyente, y un puerto a residuos puede ser otro puerto adyacente al puerto de entrada del eluyente. La configuración de flujo a residuos puede dirigir el flujo completo desde el puerto de entrada del eluyente a residuos vía el puerto a residuos, y la configuración de flujo a la fuente puede dirigir el flujo completo desde el puerto de entrada del eluyente al espectrómetro de masas vía el puerto de salida al espectrómetro de masas.

También se describe un método para reducir o eliminar los componentes interferentes de la matriz en un producto biofarmacéutico en un sistema de cromatografía de líquidos-espectrometría de masas. El método comprende derivar a residuos el flujo completo de un eluyente que emerge de la cromatografía de líquidos de una muestra durante un período de tiempo para separar los contaminantes que provoquen interferencia de la matriz en una extensión suficiente para permitir la exactitud deseada en la detección de un compuesto extraíble; y, después del período de tiempo, dirigir el flujo completo del eluyente a un espectrómetro de masas para detectar la presencia del compuesto extraíble.

El método puede comprender dirigir el flujo de un líquido de calibración al espectrómetro de masas durante el período de tiempo; y puede comprender dirigir el flujo del líquido de calibración a residuos después del período de tiempo. Derivar el eluyente a residuos durante el período de tiempo y dirigir el eluyente al espectrómetro de masas después del período de tiempo puede realizarse usando una válvula de inyección de seis puertos. El método puede comprender dirigir el flujo completo del eluyente a un puerto de la válvula de inyección de seis puertos que es adyacente tanto a (i) un puerto desde el cual el líquido fluye directamente a un espectrómetro de masas; como a (ii) un puerto desde el cual el líquido fluye directamente a residuos. Dirigir el flujo del líquido de calibración al espectrómetro de masas durante el período de tiempo y dirigir el flujo del líquido de calibración a residuos después del período de tiempo puede realizarse usando una válvula de inyección de seis puertos. El método puede comprender dirigir el flujo del líquido de calibración al espectrómetro de masas durante el período de tiempo por medio de un bucle de flujo entre dos puertos adyacentes de la válvula de inyección de seis puertos.

Breve descripción de los dibujos Lo precedente será evidente a partir de la siguiente descripción más particular de realizaciones ejemplo de la invención, que se ilustran en los dibujos acompañantes en los cuales los mismos caracteres de referencia se refieren a las mismas partes en todas las diferentes vistas. Los dibujos no están necesariamente a escala, poniéndose el énfasis en su lugar en realizaciones ilustrativas de la presente invención.

La FIG. 1A es un diagrama esquemático de un patrón de flujo de líquidos cuando se usa una válvula de inyección convencional... [Seguir leyendo]

1. Un sistema derivador para cromatografía de líquidos para reducir o eliminar componentes interferentes de la matriz en un producto biofarmacéutico en un sistema de cromatografía de líquidos-espectrometría de masas, que comprende: una válvula de inyección de seis puertos;

Un puerto de la válvula de inyección de seis puertos de entrada del eluyente, estando el puerto de entrada del eluyente en conexión mediante un flujo de líquido con una columna de cromatografía de líquidos; y

Un puerto de la válvula de inyección de seis puertos de salida al espectrómetro de masas, estando el puerto de salida al espectrómetro de masas en conexión mediante un flujo de líquido con un espectrómetro de masas;

Un medio para conmutar automáticamente la válvula entre una configuración de flujo a residuos y una configuración de flujo a la fuente, derivando la configuración de flujo a residuos un flujo completo desde el puerto de entrada del eluyente para que se dirija a residuos, y dirigiendo la configuración de flujo a la fuente el flujo completo desde el puerto de entrada del eluyente para que se dirija al espectrómetro de masas;

El sistema derivador que además comprende un bucle de flujo de calibración entre dos puertos adyacentes de la válvula de inyección de seis puertos, dirigiendo la configuración de flujo a residuos el flujo de un líquido de calibración a través del bucle de flujo de calibración y al espectrómetro de masas, y dirigiendo la configuración de flujo a la fuente el flujo del líquido de calibración a residuos y formando un bucle de flujo cerrado que incluye el bucle de flujo de calibración.

2. Un sistema derivador para cromatografía de líquidos según la reivindicación 1, donde el puerto de salida al

espectrómetro de masas es un puerto de la válvula de inyección de seis puertos adyacente al puerto de 20 entrada del eluyente.

3. Un sistema derivador para cromatografía de líquidos según la reivindicación 2, donde un puerto a residuos es un puerto adicional adyacente al puerto de entrada del eluyente.

4. Un sistema derivador para cromatografía de líquidos según la reivindicación 3, donde la configuración de flujo a residuos dirige el flujo completo desde el puerto de entrada del eluyente a residuos vía el puerto a residuos.

5. Un sistema derivador para cromatografía de líquidos según la reivindicación 1, donde la configuración de flujo a la fuente dirige el flujo completo desde el puerto de entrada del eluyente al espectrómetro de masas vía el puerto de salida al espectrómetro de masas.