Proteínas de seda.

Un polipéptido de seda recombinante y/o purificado, en el que al menos una porción del polipéptido tiene unaestructura en superhélice y en el que el polipéptido comprende una secuencia seleccionada de:

i) una secuencia de aminoácidos como se proporciona en una cualquiera de las SEC ID N.º: 1, SEC ID N.º: 2, SECID N.º: 22, SEC ID N.º: 23, SEC ID N.º: 40, SEC ID N.º: 41, SEC ID N.º: 56, SEC ID N.º: 57; SEC ID N.º: 3, SEC IDN.º: 4, SEC ID N.º: 24, SEC ID N.º: 25, SEC ID N.º: 42, SEC ID N.º: 43, SEC ID N.º: 58, SEC ID N.º: 59, SEC ID N.º:5, SEC ID N.º: 6, SEC ID N.º: 26, SEC ID N.º: 27, SEC ID N.º: 44, SEC ID N.º: 45, SEC ID N.º: 60, SEC ID N.º: 61,SEC ID N.º: 7, SEC ID N.º: 8, SEC ID N.º: 28, SEC ID N.º: 29, SEC ID N.º: 46, SEC ID N.º: 47, SEC ID N.º: 62, SECID N.º: 63, SEC ID N.º: 72 o SEC ID N.º: 73;

ii) una secuencia de aminoácidos que es al menos un 40 % idéntica a una cualquiera o más de las SEC ID N.º: 1,SEC ID N.º: 2, SEC ID N.º: 22, SEC ID N.º: 23, SEC ID N.º: 40, SEC ID N.º: 41, SEC ID N.º: 56, SEC ID N.º: 57; SECID N.º: 3, SEC ID N.º: 4, SEC ID N.º: 24, SEC ID N.º: 25, SEC ID N.º: 42, SEC ID N.º: 43, SEC ID N.º: 58, SEC IDN.º: 59, SEC ID N.º: 5, SEC ID N.º: 6, SEC ID N.º: 26, SEC ID N.º: 27, SEC ID N.º: 44, SEC ID N.º: 45, SEC ID N.º:60, SEC ID N.º: 61, SEC ID N.º: 7, SEC ID N.º: 8, SEC ID N.º: 28, SEC ID N.º: 29, SEC ID N.º: 46, SEC ID N.º: 47,SEC ID N.º: 62, SEC ID N.º: 63, SEC ID N.º: 72 o SEC ID N.º: 73;

iii) un fragmento biológicamente activo de i) o ii).

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/AU2006/001453.

Solicitante: COMMONWEALTH SCIENTIFIC AND INDUSTRIAL RESEARCH ORGANISATION.

Nacionalidad solicitante: Australia.

Dirección: LIMESTONE AVENUE CAMPBELL, ACT 2612 AUSTRALIA.

Inventor/es: SUTHERLAND,TARA D, HARITOS,VICTORIA S, TRUEMAN,HOLLY, SRISKANTHA,ALAGACONE, WEISMAN,SARAH, CAMPBELL,PETER M.

Fecha de Publicación: 21 de Mayo de 2013.

Clasificación Internacional de Patentes:

A61K47/42 NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA. › A61 CIENCIAS MEDICAS O VETERINARIAS; HIGIENE. › A61K PREPARACIONES DE USO MEDICO, DENTAL O PARA EL ASEO (dispositivos o métodos especialmente concebidos para conferir a los productos farmacéuticos una forma física o de administración particular A61J 3/00; aspectos químicos o utilización de substancias químicas para, la desodorización del aire, la desinfección o la esterilización, vendas, apósitos, almohadillas absorbentes o de los artículos para su realización A61L; composiciones a base de jabón C11D). › A61K 47/00 Preparaciones medicinales caracterizadas por los ingredientes no activos utilizados, p. ej. portadores o aditivos inertes; Agentes de direccionamiento o agentes modificadores enlazados químicamente al ingrediente activo. › Proteínas; Polipéptidos; Sus productos de degradación; Sus derivados, p. ej. albúmina, gelatina or zeína (oligopéptidos que contienen hasta cinco aminoácidos A61K 47/18; poliaminoácidos A61K 47/34).
C07H21/04 QUIMICA; METALURGIA. › C07 QUIMICA ORGANICA. › C07H AZUCARES; SUS DERIVADOS; NUCLEOSIDOS; NUCLEOTIDOS; ACIDOS NUCLEICOS (derivados de ácidos aldónicos o sacáricos C07C, C07D; ácidos aldónicos, ácidos sacáricos C07C 59/105, C07C 59/285; cianohidrinas C07C 255/16; glicales C07D; compuestos de constitución indeterminada C07G; polisacáridos, sus derivados C08B; ADN o ARN concerniente a la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos o su aislamiento, preparación o purificación C12N 15/00; industria del azúcar C13). › C07H 21/00 Compuestos que contienen al menos dos unidades mononucleótido que tienen cada una grupos fosfato o polifosfato distintos unidos a los radicales sacárido de los grupos nucleósido, p. ej. ácidos nucleicos. › con desoxirribosilo como radical sacárido.
C07K14/435 C07 […] › C07K PEPTIDOS (péptidos que contienen β -anillos lactamas C07D; ipéptidos cíclicos que no tienen en su molécula ningún otro enlace peptídico más que los que forman su ciclo, p. ej. piperazina diones-2,5, C07D; alcaloides del cornezuelo del centeno de tipo péptido cíclico C07D 519/02; proteínas monocelulares, enzimas C12N; procedimientos de obtención de péptidos por ingeniería genética C12N 15/00). › C07K 14/00 Péptidos con más de 20 aminoácidos; Gastrinas; Somatostatinas; Melanotropinas; Sus derivados. › de animales; de humanos.
C07K19/00 C07K […] › Péptidos híbridos (Inmoglobulinas híbridas compuestas solamente de inmoglobulinas C07K 16/46).
C12N15/63 C […] › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Introducción de material genético extraño utilizando vectores; Vectores; Utilización de huéspedes para ello; Regulación de la expresión.

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Fragmento de la descripción:

Proteínas de seda

Campo de la invención La presente invención se refiere a proteínas de seda, así como a ácidos nucleicos que codifican dichas proteínas. La presente invención también se refiere a células recombinantes y/o a organismos que sintetizan proteínas de seda. Las proteínas de seda de la invención se pueden usar para varios propósitos, tal como en la producción de productos de atención personal, plásticos, telas y productos biomédicos.

Antecedentes de la invención Las sedas son secreciones de proteína fibrosa que exhiben una resistencia y dureza excepcionales y como tales,

han sido el objetivo de extensos estudios. Las sedas son producidas por más de 30.000 especies de arañas y por muchos insectos. Muy pocas de estas sedas se han caracterizado, concentrándose la mayor parte de la investigación en la seda del capullo del gusano de seda domesticado Bombyx mori y en la seda de arrastre de la araña tejedora de su tela en espiral Nephila clavipes.

En los lepidópteros y las arañas, los genes de seda de fibroína codifican proteínas que generalmente son grandes con dominios terminales hidrófilos prominentes en cualquier extremo que abarcan una región extensa de bloques hidrófobos e hidrófilos alternos (Bini y cols., 2004) . En general, estas proteínas comprenden diferentes combinaciones de matrices cristalinas de láminas ! asociadas de un modo laxo con láminas !, espirales !, hélices α y regiones amorías (véase una revisión en Craig y Riekel, 2002) .

Dado que las fibras de seda representan algunas de las fibras naturales más fuertes conocidas, han sido objeto de extensas investigaciones en un intento de reproducir su síntesis. No obstante, un problema recurrente con la expresión de los genes de fibroína de lepidópteros y de araña ha sido los bajos índices de expresión en varios sistemas de expresión recombinante debido a la combinación de los motivos nucleotídicos repetidos en el gen de la seda que conducen a acontecimientos de recombinación prejudiciales, el gran tamaño del gen y el pequeño número de codones usados para cada aminoácido en el gen, que conduce a la depleción de los conjuntos de ARNt en las células huésped. La expresión recombinante conduce a dificultades durante la traducción tales como pausas traduccionales como resultado de las preferencias de codones y las demandas de codones y los extensos índices de recombinación que dan lugar al truncamiento de los genes. Secuencias más cortas y menos repetitivas evitarían muchos de los problemas asociados con la expresión de los genes de seda hasta la fecha.

En contraste con los extensos conocimientos que se han acumulado sobre los lepidópteros (en concreto, la seda del capullo de Bombyx mori) y las arañas (en particular, la seda de arrastre de Nephila clavipes) se sabe poco sobre la composición química y la organización molecular de otras sedas de insecto.

A principios de la década de 1960, mediante patrones de difracción en rayos X obtenidos de fibras de seda extraídas de la glándula salival de las larvas de abeja melífera (Rudall, 1962) se demostró que la seda del himenóptero aculeado tenía una estructura en alfa-hélice Además de demostrar que esta seda es helicoidal, los patrones obtenidos eran indicativos de un sistema de bobina enrollada de cadenas en alfa-hélice (Atkins, 1967) . Se han 45 obtenido patrones de difracción de rayos X similares para sedas de capullo de otras especies de Aculeata, incluida la avispa Pseudopompilus humbolti (Rudall, 1962) y el abejorro, Bombus lucorum (Lucas y Rudall, 1967) .

En contraste con la estructura en alfa-hélice descrita en las sedas de aculeados, las sedas caracterizadas de un clado relacionado con los aculeados, icneumónidos (Ichneumonoidea) , tienen estructuras ! paralelas. Los diagramas de rayos X para cuatro ejemplos de esta estructura se han descrito en bracónidos (Braconidae) (Cotesia (=Apenteles) glomerate; Cotesia (=Apenteles) gonopter y gis; Apenteles bignelli) y tres en icneumónidos (Ichneumonidae) (Dusona sp.; Phytodietris sp.; Branchus femoralis) (Lucas y Rudall, 1967) . Además, se ha descrito la secuencia de la seda de un solo bracónido ( (Cotesia glomerate) (base de datos Genbank, número de acceso AB188680; Yamada y cols., 2004) . Esta secuencia proteica parcial consiste en una repetición de 28 X-asparagina 55 altamente conservada (en la que X es alanina o serina) y no se ha predicho que contenga héptadas repetitivas que forman una superhélice. Un análisis extenso de la composición de aminoácidos de las sedas de capullo de los bracónidos ha demostrado que las sedas de la subfamilia Microgastrinae son únicas en su contenido elevado de asparagina y serina (Lucas y cols., 1960; Quicke y cols., 2004) . Las subfamilias relacionadas producen sedas con composiciones de aminoácidos significativamente diferentes, lo que sugiere que las sedas de Microgastrinae han evolucionado específicamente en esta subfamilia (Yamada y cols., 2004) . El ADNc parcial de Cotesia glomerata se aisló usando cebadores para PCR diseñados a partir de la secuencia obtenida de péptidos internos derivados de proteínas de seda de capullo aisladas. La composición de aminoácidos predicha de esta secuencia parcial se asemeja mucho a la composición de aminoácidos de la seda ampliamente lavada de esta especie.

La estructura de muchas de las sedas dentro de otros apócritas no aculeados y dentro del resto de himenópteros (Symphata) son, con mayor frecuencia, láminas ! paralelas, con sedas de tipo colágeno y de poliglicina producidas por los tentredínidos (Lucas y Rudall, 1967) .

Las proteínas de seda de abeja melífera se sintetizan en el medio del estadio final y se pueden ver como una mezcla de proteínas de seda despolimerizadas (Silva-Zacarin y cols., 2003) . A medida que el estadio progresa, se elimina el

agua de la glándula y la deshidratación tiene como resultado la polimerización de la proteína de seda para formar tactoides marcados con filamentos de seda insolubles y bien organizados (Silva-Zacarin y cols., 2003) . La deshidratación progresiva conduce a la reorganización posterior de los tactoides (Silva-Zacarin y cols., 2003) y posiblemente, a nuevos enlaces interfilamentosos entre filamentos (Rudall, 1962) . Las imágenes de microscopio electrónico de fibrillas aisladas de la glándula de seda de abeja melífera muestra estructuras de un diámetro de aproximadamente 20–25 angstroms (Flower y Kenchington, 1967) . Este valor es consistente con superhélices de tres, cuatro o cinco hebras.

Lucas y Rudall (1967) determinaron la composición de aminoácidos de las sedas de diversas especies de himenópteros aculeados y encontraron que contenían un contenido elevado de alanina, serina y los residuos ácidos ácido aspártico y ácido glutámico y cantidades reducidas de glicina en comparación con las fibroínas clásicas. Se consideró que el contenido helicoidal de la seda de himenópteros aculeados era una consecuencia de un menor contenido en glicina y de un incremento del contenido en residuos ácidos (Rudall y Kenchington, 1971) .

Se sabe poco sobre la seda de larvas de crisopas (Orden: neurópteros, Neuroptera) . El capullo está compuesto por dos capas, una capa sólida interna y una capa fibrosa externa. Anteriormente se había descrito que el capullo estaba compuesto por una seda de cuticulina (Rudall y Kenchington, 1971) , una descripción que solo está relacionada con la capa interna sólida. LaMunyon (1988) describió una sustancia excretada de los túbulos de malpigio que formaban las fibras externas. Tras el depósito de esta capa, la pared interna sólida se construyó a partir de secreciones de las células epiteliales en el lumen altamente velloso (LaMunyon, 1988) .

También se sabe que las larvas de crisopa producen una sustancia proteinácea adhesiva procedente de los túbulos de malpigio a través de todos los estadios para pegar las larvas a los sustratos, para pegar artículos de camuflaje sobre el dorso de la larva o para atrapar una presa (Speilger, 1962) . En el género Lomamyia (Bethothidae) , las larvas producen la seda y la sustancia adhesiva al mismo tiempo y se ha postulado que estas dos sustancias pueden muy bien ser el mismo producto (Speilger, 1962) . La secreción del adhesivo es muy soluble y también se piensa que está asociado con la defensa contra los depredadores (LaMunyon y Adams, 1987) .

Considerando las propiedades únicas de las sedas producidas por insectos como himenópteros y neurópteros, existe la necesidad de identificar nuevos ácidos nucleicos que codifiquen proteínas de estos organismos.

Sumario de la invención Los autores de la presente invención han identificado numerosas proteínas de seda de insectos. Estas... [Seguir leyendo]

Reivindicaciones:

1. Un polipéptido de seda recombinante y/o purificado, en el que al menos una porción del polipéptido tiene una estructura en superhélice y en el que el polipéptido comprende una secuencia seleccionada de:

ii) una secuencia de aminoácidos que es al menos un 40 % idéntica a una cualquiera o más de las SEC ID N.º: 1, SEC ID N.º: 2, SEC ID N.º: 22, SEC ID N.º: 23, SEC ID N.º: 40, SEC ID N.º: 41, SEC ID N.º: 56, SEC ID N.º: 57; SEC ID N.º: 3, SEC ID N.º: 4, SEC ID N.º: 24, SEC ID N.º: 25, SEC ID N.º: 42, SEC ID N.º: 43, SEC ID N.º: 58, SEC ID N.º: 59, SEC ID N.º: 5, SEC ID N.º: 6, SEC ID N.º: 26, SEC ID N.º: 27, SEC ID N.º: 44, SEC ID N.º: 45, SEC ID N.º: 60, SEC ID N.º: 61, SEC ID N.º: 7, SEC ID N.º: 8, SEC ID N.º: 28, SEC ID N.º: 29, SEC ID N.º: 46, SEC ID N.º: 47, SEC ID N.º: 62, SEC ID N.º: 63, SEC ID N.º: 72 o SEC ID N.º: 73;

iii) un fragmento biológicamente activo de i) o ii) .

2. El polipéptido de acuerdo con la reivindicación 1, que comprende una secuencia de aminoácidos que es al menos un 80 % idéntica a una cualquiera o más de las SEC ID N.º: 1, SEC ID N.º: 2, SEC ID N.º: 22, SEC ID N.º: 23, SEC ID N.º: 40, SEC ID N.º: 41, SEC ID N.º: 56, SEC ID N.º: 57; SEC ID N.º: 3, SEC ID N.º: 4, SEC ID N.º: 24, SEC ID N.º: 25, SEC ID N.º: 42, SEC ID N.º: 43, SEC ID N.º: 58, SEC ID N.º: 59, SEC ID N.º: 5, SEC ID N.º: 6, SEC ID N.º: 26, SEC ID N.º: 27, SEC ID N.º: 44, SEC ID N.º: 45, SEC ID N.º: 60, SEC ID N.º: 61, SEC ID N.º: 7, SEC ID N.º: 8, SEC ID N.º: 28, SEC ID N.º: 29, SEC ID N.º: 46, SEC ID N.º: 47, SEC ID N.º: 62, SEC ID N.º: 63, SEC ID N.º: 72 o SEC ID N.º: 73.

3. El polipéptido de acuerdo con la reivindicación 1, que comprende una secuencia de aminoácidos que es al menos un 90 % idéntica a una cualquiera o más de las SEC ID N.º: 1, SEC ID N.º: 2, SEC ID N.º: 22, SEC ID N.º: 23, SEC ID N.º: 40, SEC ID N.º: 41, SEC ID N.º: 56, SEC ID N.º: 57; SEC ID N.º: 3, SEC ID N.º: 4, SEC ID N.º: 24, SEC ID N.º: 25, SEC ID N.º: 42, SEC ID N.º: 43, SEC ID N.º: 58, SEC ID N.º: 59, SEC ID N.º: 5, SEC ID N.º: 6, SEC ID N.º: 26, SEC ID N.º: 27, SEC ID N.º: 44, SEC ID N.º: 45, SEC ID N.º: 60, SEC ID N.º: 61, SEC ID N.º: 7, SEC ID N.º: 8, SEC ID N.º: 28, SEC ID N.º: 29, SEC ID N.º: 46, SEC ID N.º: 47, SEC ID N.º: 62, SEC ID N.º: 63, SEC ID N.º: 72 o SEC ID N.º: 73.

4. El polipéptido de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, que se condensa con al menos otro polipéptido.

5. Un polinucleótido aislado y/o exógeno que codifica un polipéptido de seda, en el que al menos una porción del polipéptido tiene una estructura en superhélice y en el que el polinucleótido comprende una secuencia seleccionada de:

i) una secuencia de nucleótidos proporcionada en una cualquiera de las SEC ID N.º: 11, SEC ID N.º: 12, SEC ID N.º: 31, SEC ID N.º: 32, SEC ID N.º: 48, SEC ID N.º: 49, SEC ID N.º: 64, SEC ID N.º: 65, SEC ID N.º: 13, SEC ID N.º: 14, SEC ID N.º: 33, SEC ID N.º: 34, SEC ID N.º: 50, SEC ID N.º: 51, SEC ID N.º: 66, SEC ID N.º: 67, SEC ID N.º: 15, SEC ID N.º: 16, SEC ID N.º: 35, SEC ID N.º: 36, SEC ID N.º: 52, SEC ID N.º: 53, SEC ID N.º: 68, SEC ID N.º: 69, SEC ID N.º: 17, SEC ID N.º: 18, SEC ID N.º: 37, SEC ID N.º: 38, SEC ID N.º: 54, SEC ID N.º: 55, SEC ID N.º: 70, SEC ID N.º: 71, SEC ID N.º: 76, SEC ID N.º: 74 o SEC ID N.º: 75;

ii) una secuencia de nucleótidos que codifican un polipéptido de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4;

iii) una secuencia de nucleótidos que es al menos un 40 % idéntica a cualquiera o más de las SEC ID N.º: 11, SEC ID N.º: 12, SEC ID N.º: 31, SEC ID N.º: 32, SEC ID N.º: 48, SEC ID N.º: 49, SEC ID N.º: 64, SEC ID N.º: 65, SEC ID N.º: 13, SEC ID N.º: 14, SEC ID N.º: 33, SEC ID N.º: 34, SEC ID N.º: 50, SEC ID N.º: 51, SEC ID N.º: 66, SEC ID N.º: 67, SEC ID N.º: 15, SEC ID N.º: 16, SEC ID N.º: 35, SEC ID N.º: 36, SEC ID N.º: 52, SEC ID N.º: 53, SEC ID N.º: 68, SEC ID N.º: 69, SEC ID N.º: 17, SEC ID N.º: 18, SEC ID N.º: 37, SEC ID N.º: 38, SEC ID N.º: 54, SEC ID N.º: 55, SEC ID N.º: 70, SEC ID N.º: 71, SEC ID N.º: 76, SEC ID N.º: 74 o SEC ID N.º: 75;

iv) una secuencia que hibrida con una cualquiera de i) a iii) en condiciones rigurosas.

6. El polinucleótido de la reivindicación 5, que comprende una secuencia de nucleótidos que es al menos un 80 % idéntica a cualquiera o más de las SEC ID N.º: 11, SEC ID N.º: 12, SEC ID N.º: 31, SEC ID N.º: 32, SEC ID N.º: 48, SEC ID N.º: 49, SEC ID N.º: 64, SEC ID N.º: 65, SEC ID N.º: 13, SEC ID N.º: 14, SEC ID N.º: 33, SEC ID N.º: 34,

SEC ID N.º: 50, SEC ID N.º: 51, SEC ID N.º: 66, SEC ID N.º: 67, SEC ID N.º: 15, SEC ID N.º: 16, SEC ID N.º: 35, SEC ID N.º: 36, SEC ID N.º: 52, SEC ID N.º: 53, SEC ID N.º: 68, SEC ID N.º: 69, SEC ID N.º: 17, SEC ID N.º: 18, SEC ID N.º: 37, SEC ID N.º: 38, SEC ID N.º: 54, SEC ID N.º: 55, SEC ID N.º: 70, SEC ID N.º: 71, SEC ID N.º: 76, SEC ID N.º: 74 o SEC ID N.º: 75.

7. El polinucleótido de la reivindicación 5, que comprende una secuencia de nucleótidos que es al menos un 90 % idéntica a cualquiera o más de las SEC ID N.º: 11, SEC ID N.º: 12, SEC ID N.º: 31, SEC ID N.º: 32, SEC ID N.º: 48, SEC ID N.º: 49, SEC ID N.º: 64, SEC ID N.º: 65, SEC ID N.º: 13, SEC ID N.º: 14, SEC ID N.º: 33, SEC ID N.º: 34, SEC ID N.º: 50, SEC ID N.º: 51, SEC ID N.º: 66, SEC ID N.º: 67, SEC ID N.º: 15, SEC ID N.º: 16, SEC ID N.º: 35, SEC ID N.º: 36, SEC ID N.º: 52, SEC ID N.º: 53, SEC ID N.º: 68, SEC ID N.º: 69, SEC ID N.º: 17, SEC ID N.º: 18, SEC ID N.º: 37, SEC ID N.º: 38, SEC ID N.º: 54, SEC ID N.º: 55, SEC ID N.º: 70, SEC ID N.º: 71, SEC ID N.º: 76, SEC ID N.º: 74 o SEC ID N.º: 75.

8. Un vector que comprende al menos un polinucleótido de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 5 a 7.

9. Una célula huésped que comprende al menos un polinucleótido exógeno de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 5 a 7 y/o al menos un vector de la reivindicación 8.

10. Un procedimiento para preparar un polipéptido de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, comprendiendo el procedimiento cultivar una célula huésped de acuerdo con la reivindicación 9 en condiciones que permitan la expresión del polinucleótido que codifica el polipéptido y recuperar el polipéptido expresado.

11. Un procedimiento para preparar un polipéptido de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, comprendiendo el procedimiento expresar en un sistema de expresión acelular un vector de la reivindicación 8 que comprende un polinucleótido que codifica el polipéptido en condiciones que permitan la expresión del polinucleótido que codifica el polipéptido y recuperar el polipéptido expresado.

12. Una planta transgénica que comprende un polinucleótido exógeno, en el que el polinucleótido codifica al menos un polipéptido de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones a 1 a 4.

13. Un anticuerpo que se une específicamente a un polipéptido de seda recombinante y/o purificado en el que al menos una porción del polipéptido tiene una estructura en superhélice y en el que el polipéptido consiste en una secuencia seleccionada de una secuencia de aminoácidos como se proporciona en una cualquiera de las SEC ID N.º: 1, SEC ID N.º: 2, SEC ID N.º: 22, SEC ID N.º: 23, SEC ID N.º: 40, SEC ID N.º: 41, SEC ID N.º: 56, SEC ID N.º: 57, SEC ID N.º: 3, SEC ID N.º: 4, SEC ID N.º: 24, SEC ID N.º: 25, SEC ID N.º: 42, SEC ID N.º: 43, SEC ID N.º: 58, SEC ID N.º: 59, SEC ID N.º: 5, SEC ID N.º: 6, SEC ID N.º: 26, SEC ID N.º: 27, SEC ID N.º: 44, SEC ID N.º: 45, SEC ID N.º: 60, SEC ID N.º: 61, SEC ID N.º: 7, SEC ID N.º: 8, SEC ID N.º: 28, SEC ID N.º: 29, SEC ID N.º: 46, SEC ID N.º: 47, SEC ID N.º: 62, SEC ID N.º: 63, SEC ID N.º: 72 o SEC ID N.º: 73.

14. Una fibra de seda que comprende al menos un polipéptido de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones a 1 a 4, en la que la fibra de seda no comprende una proteína de jalea real producida por un insecto.

15. Un copolímero que comprende al menos dos polipéptidos purificados y/o recombinantes de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones a 1 a 4, en el que el copolímero no comprende una proteína de jalea real producida por un insecto.

16. Un producto que comprende al menos un polipéptido purificado y/o recombinante de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones a 1 a 4, la fibra de seda de la reivindicación 14 y/o el copolímero de la reivindicación 15, en el que el producto no comprende una proteína de jalea real producida por un insecto.

17. Una composición que comprende al menos un polipéptido purificado y/o recombinante de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones a 1 a 4, la fibra de seda de la reivindicación 14 y/o el copolímero de la reivindicación 15 y uno o más vehículos aceptables.

18. La composición de la reivindicación 17, que además comprende un fármaco.

19. Una composición que comprende al menos un polinucleótido aislado y/o exógeno de una cualquiera de las reivindicaciones 5 a 7 y uno o más vehículos aceptables.

20. Uso de al menos un polipéptido de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones a 1 a 4, la fibra de seda de la reivindicación 14 y/o el copolímero de la reivindicación 15 y un fármaco, para la fabricación de un medicamento para tratar o prevenir una enfermedad.

21. Un kit que comprende al menos un polipéptido de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, el polinucleótido de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 5 a 7, el vector de la reivindicación 8, la fibra de

seda de la reivindicación 14 y/o el copolímero de la reivindicación 15.

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