Procedimientos para reducir la carga viral en pacientes infectados por el VIH-1.

Un anticuerpo monoclonal que (i) se une a un receptor CCR5 sobre la superficie de células CD4+ de un sujeto y

(ii) inhibe la fusión del VIH-1 a las células CCR5+CD4+ del sujeto para su uso en un tratamiento para reducir la cargaviral del VIH del sujeto

además de un antagonista del receptor CCR5 de no anticuerpo,

en el que la carga viral del VIH-1 del sujeto se reduce al menos el 90% tras la administración del anticuerpo, y en elque la reducción se mantiene durante al menos dos semanas, cuyo anticuerpo va a administrarse a 0,5 mg por kg a5 mg por kg de peso corporal del sujeto, en el que el anticuerpo monoclonal es el anticuerpo humanizado designadoPRO 140 o un anticuerpo que compite con la unión de PRO 140 al receptor CCR5,

en el que PRO 140 comprende (i) dos cadenas ligeras, comprendiendo cada cadena ligera el producto de expresióndel plásmido designado pVK:HuPRO140-VK depositado bajo la designación de depósito de la ATCC PTA-4097, y (ii)dos cadenas pesadas, comprendiendo cada cadena pesada el producto de expresión de tanto el plásmidodesignado pVg4:HuPRO140 HG2-VH depositado bajo la designación de depósito de la ATCC PTA-4098 como elplásmido designado pVg4:HuPRO140 (mut B+D+I)-VH depositado bajo la designación de depósito de la ATCC PTA-4099, y

en el que el antagonista del receptor CCR5 de no anticuerpo es una molécula orgánica pequeña.

Procedimientos para reducir la carga viral en pacientes infectados por el VIH-1

La presente solicitud reivindica el beneficio de la solicitud provisional de EE.UU. nº 60/702.064 presentada el 22 de julio de 2005; la solicitud provisional de EE.UU. nº 60/701.889 presentada el 23 de julio de 2005; la solicitud provisional de EE.UU. nº 60/711.528 presentada el 26 de agosto de 2005; y la solicitud provisional de EE.UU. nº 60/715.619 presentada el 9 de septiembre de 2005.

La presente invención se hizo con la financiación de la subvención del gobierno de los Estados Unidos nº AI046871 y AI066329 del Instituto Nacional de Alergia y Enfermedades Infecciosas. Por consiguiente, el gobierno de los Estados Unidos tiene ciertos derechos en la invención objeto.

En toda la presente solicitud, diversas publicaciones se denominan entre paréntesis por nombre de autor y

fecha, o por una patente o número de publicación de patente. Las citaciones completas para estas publicaciones pueden encontrarse al final de la memoria descriptiva inmediatamente precediendo a las reivindicaciones. Estas publicaciones se citan en la presente solicitud con el fin de describir más completamente el estado de la materia como se conoce para aquellos expertos a este respecto a partir de la fecha de la presente solicitud.

Antecedentes de la invención [0004] La infección de células por el virus de la inmunodeficiencia humana tipo 1 (VIH-1) está mediada por las glucoproteínas de la envuelta (Env) viral gp120 y gp41, que se expresan como complejo oligomérico no covalente sobre la superficie del virus y células viralmente infectadas. La entrada del virus en células diana avanza mediante una cascada de eventos en la superficie celular que incluyen (1) unión de la glucoproteína de la superficie viral gp120 a un receptor de la superficie celular, (2) unión de Env a co-receptores de fusión, y (3) múltiples cambios conformacionales en gp41.

La primera interacción de alta afinidad entre el virión y la superficie celular es la unión de gp120 a CD4 de la superficie celular, que es el receptor primario para el VIH-1 (Dalgleish y col.; 1984; Klatzmann y col., 1984; Maddon y col., 1986; McDougal y col., 1986) . La unión induce cambios conformacionales en gp120, que permiten que interaccione con uno de varios receptores de quimiocinas (Berger, 1997; Bieniasz y col., 1998; Dragic y col., 1997; Littman, 1998) . El receptor de quimiocinas CC 5 (CCR5) es el principal co-receptor para cepas trópicas para macrófagos (R5) , y desempeña una función crucial en la transmisión del VIH-1 (Berger, 1997; Bieniasz y col., 1998;

Dragic y col., 1997; Littman, 1998) . Los virus trópicos para la línea de linfocitos T (X4) usan CXCR4 para entrar en células diana, y normalmente, pero no siempre, emergen tarde en la progresión de la enfermedad o como consecuencia de la propagación del virus en cultivo de tejido. Algunas cepas aisladas del VIH-1 primarias son trópicas duales (R5X4) ya que pueden usar ambos co-receptores, aunque no siempre con la misma eficiencia (Connor y col., 1997; Simmons y col., 1996) . La unión de gp120 a un receptor de quimiocinas desencadena a su vez

cambios conformacionales en la glucoproteína transmembrana viral gp41, que media en la fusión de las membranas virales y celulares.

Cada etapa de este procedimiento de múltiples etapas puede bloquearse con inhibidores de la proteína viral o celular apropiada, y los inhibidores de gp120, gp41, CD4 y co-receptor se conocen conjuntamente como 45 inhibidores de la entrada. Los inhibidores de la entrada representan al menos 4 clases distintas de agentes basándose en sus dianas moleculares y determinantes de resistencia viral (Olson y Maddon, 2003) . La Tabla 1 enumera inhibidores de la entrada del VIH-1 conocidos por estar en desarrollo clínico o autorizados para uso clínico.

PRO 542 es una proteína de fusión CD4-IgG2 de tercera generación tetravalente que comprende los 50 dominios D1D2 de CD4 genéticamente fusionados con las regiones constantes de la cadena pesada y ligera de IgG2 humana (Allaway y col., 1995; Zhu y col., 2001) . Este agente se une a la glucoproteína de la envuelta del VIH-1 gp120 con afinidad nanomolar y puede inhibir la unión al virus tanto por bloqueo de receptores como por el desprendimiento de gp120 de la superficie del virión, inactivando así irreversiblemente el virus.

Tabla 1. Inhibidores de la entrada del VIH-1

Compuesto Clase molecular Diana Fase de entrada Desarrollador

PRO542 Proteína de fusión CD4-Ig gp120 Unión Progenics

BMS-488043 Molécula pequeña gp120 Unión Bristol-Myers Squibb

TNX-355 Anticuerpo humanizado CD4 Post-Unión Tanox

PRO 140 Anticuerpo humanizado CCR5 Co-receptor Progenics

CCR5mAb004 Anticuerpo humano CCR5 Co-receptor Human Genome Sciences

SCH-D (vicriviroc) Molécula pequeña CCR5 Co-receptor Schering-Plough

Compuesto Clase molecular Diana Fase de entrada Desarrollador

UK-427.857 (maraviroc) Molécula pequeña CCR5 Co-receptor Pfizer

GW873140 Molécula pequeña CCR5 Co-receptor GlaxoSmithKline

TAK-652 Molécula pequeña CCR5 Co-receptor Takeda

AMD070 Molécula pequeña CXCR4 Co-receptor AnorMed

T-20 (enfuvirtida) Péptido gp41 Fusión de gp41 Trimeris/Roche

BMS-488043 es un análogo optimizado de BMS-378806 (véanse las publicaciones internacionales PCT nº WO 01/62255 A1 y WO 03/082289 A1) , que se ha informado de diversas maneras que bloquea la unión de gp120 a CD4 (Lin y col., 2002; 2003) y eventos post-unión (Si y col., 2004) .

TNX-355 es una versión de IgG4 humanizada del anticuerpo monoclonal anti-CD4 (mAb) 5A8 que bloquea los eventos de fusión que producen la post-unión de gp120 a CD4 (Burkly y col., 1992; Moore y col., 1992) .

PRO 140, un mAb anti-CCR5 humanizado, y los antagonistas de CCR5 de molécula pequeña, SCH-D (también se designa ahora SCH 417670 o vicriviroc) , UK-427.857 (también designado maraviroc) y GW873140, se tratan más adelante. El documento WO03/072766 desvela que tanto dosis únicas como múltiples dosis de PRO 140 reducen las cargas virales a niveles indetectables en ratones CD-17 SCID reconstituidos con CMSP humanas normales e infectados por el VIH-1 y que las reducciones oscilaron hasta 1, 8log10. Este documento también desvela el uso de PRO 140 para tratar seres humanos aquejados con el VIH-1.

CCR5mAb004 es un mAb completamente humano, generado usando la tecnología Abgenix XenoMouse®, que reconoce y se une específicamente a CCR5 (Roschke y col., 2004) . Se ha informado que CCR5mAb004 inhibe la entrada dependiente de CCR5 del virus del VIH-1 en células humanas, y recientemente ha entrado en ensayos clínicos de fase 1 (HGS Press Release, 2005) .

El primer antagonista anti-CCR5 de molécula pequeña identificado como que puede inhibir la infección por el VIH-I fue TAK-779 (Baba y col., 1999) . Sin embargo, TAK-779 presentó escasa biodisponibilidad oral (Baba y col., 2005) e irritación en el sitio de inyección local (Iizawa y col., 2003) , y se ha sustituido en el desarrollo clínico por un derivado de TAK-779, TAK-652 (Baba y col., 2005) . TAK-652 es un antagonista de CCR5 biodisponible por vía oral con potente actividad anti-VIH-1 en el intervalo nanomolar in vitro y prometedores perfiles farmacológicos in vivo (Baba y col., 2005) .

AMD070 es un inhibidor de CXCR4 de segunda generación; el inhibidor de CXCR4 de primera generación AMD3100 no demostró una ventana de seguridad favorable para terapia contra el VIH-1 (Schols y col., 2002) .

Finalmente, T-20 se autorizó para terapia de rescate de infección por el VIH-1 siguiendo perfiles antivirales y seguridades favorables en cada uno de los dos estudios de fase 3 fundamentales (Lalezari y col., 2003; Lazzarin y col., 2003) .

CCR5 como diana para terapia anti-VIH-1

Como primero se demostró en 1986, el VIH-1 se une a células diana mediante el receptor de CD4, pero requiere factores de células huésped adicionales para mediar en la entrada (Maddon y col., 1986) . Durante la siguiente década se propusieron varios co-receptores candidatos, pero ninguno medió reproduciblemente en la entrada viral cuando se coexpresó con CD4 en células de otro modo no permisivas. Sin embargo, en 1996, se mostró que ciertos receptores de quimiocina, principalmente CCR5 y CXCR4, servían de co-receptores de fusión necesarios para el VIH-1.

Cocchi y col. (1995) proporcionaron el primer enlace entre el VIH-1 y quimiocinas, que son pequeñas proteínas solubles homólogas (-8 kDa) . Las quimiocinas median en el reclutamiento y la activación de células inmunitarias. Se clasifican como quimiocinas CC, CXC, CX3C y XC basándose en el número y... [Seguir leyendo]

1. Un anticuerpo monoclonal que (i) se une a un receptor CCR5 sobre la superficie de células CD4+ de un sujeto y

(ii) inhibe la fusión del VIH-1 a las células CCR5+CD4+ del sujeto para su uso en un tratamiento para reducir la carga viral del VIH del sujeto además de un antagonista del receptor CCR5 de no anticuerpo, en el que la carga viral del VIH-1 del sujeto se reduce al menos el 90% tras la administración del anticuerpo, y en el que la reducción se mantiene durante al menos dos semanas, cuyo anticuerpo va a administrarse a 0, 5 mg por kg a 5 mg por kg de peso corporal del sujeto, en el que el anticuerpo monoclonal es el anticuerpo humanizado designado PRO 140 o un anticuerpo que compite con la unión de PRO 140 al receptor CCR5, en el que PRO 140 comprende (i) dos cadenas ligeras, comprendiendo cada cadena ligera el producto de expresión del plásmido designado pVK:HuPRO140-VK depositado bajo la designación de depósito de la ATCC PTA-4097, y (ii) dos cadenas pesadas, comprendiendo cada cadena pesada el producto de expresión de tanto el plásmido designado pVg4:HuPRO140 HG2-VH depositado bajo la designación de depósito de la ATCC PTA-4098 como el

plásmido designado pVg4:HuPRO140 (mut B+D+I) -VH depositado bajo la designación de depósito de la ATCC PTA4099, y en el que el antagonista del receptor CCR5 de no anticuerpo es una molécula orgánica pequeña.

2. El anticuerpo para su uso según la reivindicación 1, en el que el anticuerpo monoclonal y el antagonista del 20 receptor CCR5 de no anticuerpo van a administrarse simultáneamente.

3. El anticuerpo para su uso según la reivindicación 1, en el que el anticuerpo monoclonal es el anticuerpo humanizado designado PRO 140 y la cadena pesada de PRO 140 comprende el producto de expresión del plásmido designado pVg4:HuPRO140 HG2-VH depositado bajo la designación de depósito de la ATCC PTA-4098.

4. El anticuerpo para su uso según la reivindicación 1, en el que el anticuerpo monoclonal es el anticuerpo humanizado designado PRO 140 y en el que la cadena pesada de PRO 140 comprende el producto de expresión del plásmido designado pVg4:HuPRO 140 (mut B+D+I) -VH depositado bajo la designación de depósito de la ATCC PTA-4099.

5. El anticuerpo para su uso según la reivindicación 1, en el que el anticuerpo va a administrarse a un intervalo predefinido, y el intervalo predefinido es al menos una vez a la semana, cada dos a cuatro semanas, cada dos semanas, cada cuatro semanas, o al menos una vez al mes.

6. El anticuerpo para su uso según la reivindicación 1 ó 3, en el que el anticuerpo va a administrarse mediante infusión intravenosa o inyección subcutánea.

7. El anticuerpo para su uso según la reivindicación 1, en el que el antagonista del receptor CCR5 de no anticuerpo es SCH-D (1-