Oligonucleótidos antisentido para tratar la alergia y la proliferación de las células neoplásicas.

Utilización de al menos dos oligonucleótidos antisentido que tienen secuencias que comprenden la SEQ IDn.

º 13 y la SEQ ID n.º 14, respectivamente, para la fabricación de un medicamento para el tratamiento y/o laprevención de al menos una de asma, alergia, hipereosinofilia e inflamación general.

Oligonucleótidos antisentido para tratar la alergia y la proliferación de las células neoplásicas Campo de la invención La invención se refiere al uso de oligonucleótidos antisentido dirigidos contra receptores celulares específicos, en monoterapia o en politerapia, para inhibir la inflamación general, incluida la inflamación asociada al asma y la alergia, y la hipereosinofilia. La descripción también se refiere al uso de oligonucleótidos antisentido para inhibir la proliferación de las células neoplásicas, tal como el cáncer.

Antecedentes de la invención Los oligonucleótidos antisentido son una nueva clase de sustancias farmacéuticas. En general, antisentido se refiere

al uso de oligonucleótidos sintéticos pequeños, con los mismos constituyentes que los encontrados en el ADN o el ARN humano. Los oligonucleótidos antisentido se diseñan como una secuencia complementaria de una parte de un gen al cual se dirigen para que sean capaces de adherirse a esta secuencia e inhibir la expresión génica. La expresión del gen se inhibe por la hibridación de un oligonucleótido antisentido a una diana sentido específica de ARN mensajero (ARNm) de acuerdo con el apareamiento de bases de Watson y Crick, en el cual la adenosina y la timidina (uracilo en el ARNm) o la guanosina y la citidina interaccionan a través de puentes de hidrógeno. Estos efectos se pueden explicar mediante dos mecanismos, el primero es que la hibridación empeora la traducción del ARNm deseado, y el segundo es que se induce la ARNasa H o enzimas similares que degradan el ARNm. Una ventaja importante de esta estrategia es que la acción es específica y posiblemente provoque menos efectos secundarios y toxicidad, en especial cuando se aplica en el sitio de acción (tratamiento tópico) . Esta estrategia terapéutica posiblemente se pueda aplicar a cualquier enfermedad en la que se crea que una sobreexpresión de uno o varios genes ocasiona la presencia o persistencia de la enfermedad. Como resultado, se han realizado numerosos estudios sobre la capacidad terapéutica de los oligonucleótidos antisentido a la hora de luchar contra el cáncer y las enfermedades víricas.

Los oligonucleótidos antisentido se pueden utilizar para inhibir la expresión del receptor de la interleucina 6 (IL-6) y,

en consecuencia, los efectos de la interleucina 6, el mediador inflamatorio agudo, sobre las células. Se han realizado pocos estudios para evaluar si los oligonucleótidos antisentido se pueden emplear para inhibir otros receptores que expresan las células que intervienen en la inflamación, que incluyen, pero sin limitarse a ellas, la inflamación asociada al asma y la inflamación asociada a las enfermedades atópicas y la alergia, o en las células cancerígenas.

El asma es una enfermedad que afecta del 5 al 10% de la población y que ha doblado su prevalencia en los últimos 25 años. Este incremento se ha notado especialmente en los lactantes después de una infección vírica de las vías aéreas (bronquiolitis) , en los niños y en el asma inducida por el trabajo. Los problemas respiratorios recurrentes relacionados con el asma a menudo están favorecidos por alérgenos, pero se desconoce aún la causa exacta del asma. Sin embargo, se cree que agentes tales como los virus están implicados en la perpetuación de la inflamación anormal que se encuentra en las vías aéreas de los pacientes con asma y, por lo tanto, en la persistencia de la enfermedad.

Por este motivo, las recomendaciones actuales para el tratamiento de primera línea del asma es una medicación antiinflamatoria potente, tal como las que contienen corticoesteroides y antileucotrienos. Aunque este tratamiento es eficaz en muchos pacientes, algunos pacientes son resistentes a los corticoesteroides. Esta medicación también es un inmunosupresor potente con efectos secundarios a largo plazo y no se ha demostrado que sea eficaz para prevenir la alergia ni el asma. Los antileucotrienos tienen algún efecto en la alergia y el asma, pero no son tan eficaces como los corticoesteroides.

En la aparición y perpetuación de la inflamación de las vías aéreas de los pacientes con asma intervienen varios mediadores inflamatorios. Algunos mediadores atraen las células inflamatorias a las vías aéreas, bien a través de la quimiotaxia de los eosinófilos (las quimiocinas: RANTES, eotaxinas 1, 2, 3, MCP-3, -4 que actúan principalmente en 45 la inflamación asmática a través de un receptor denominado CCR3) , o bien a través de la activación de las células endoteliales (IL-4, IL-13) . Otros mediadores provocan la sensibilización e incrementan la supervivencia de las células inflamatorias en las vías aéreas (IL-3, IL-4, IL-5, GM-CSF) . Así pues, estos mediadores consisten bien en citocinas específicas de los eosinófilos, o bien en citocinas del fenotipo de tipo 2 de los linfocitos T cooperadores (Th2: IL-3, 4, -5, -6, -9, -10, -13 y GM-CSF) , (John A. E. y Lukacs N. W., 2003 Sarcoidosis Vasc Diffuse Lung Dis., 20: 180-189;

Blease et al., 2003, Expert Opin Emerg Drugs 8: 71-81) . Se ha demostrado que mejora el asma y la inflamación respiratoria general cuando hay una disminución de estos mediadores inflamatorios en las vías aéreas.

La alergia es una hipersensibilidad a un alérgeno que ocasiona una respuesta inmunitaria indeseable. La alergia es una enfermedad muy prevalente, por ejemplo, la rinitis atópica y la conjuntivitis afectan en torno al 30% de la población. La alergia se caracteriza por la producción anómala de la IgE y la inflamación contra un alérgeno. En 55 presencia de IgE y del alérgeno, las células efectoras, tales como los mastocitos, se desgranulan y liberan los mediadores inflamatorios que conducen al reclutamiento de las mismas células inflamatorias que se encuentran en el asma. En la rinitis alérgica (a saber, rinitis alérgica polínica o «fiebre del heno») , en la conjuntivitis alérgica, en la poliposis nasal, en la sinusitis crónica y en el eccema, tal como la dermatitis atópica, uno encuentra el mismo exceso de mediadores inflamatorios, tal como los presentes en el asma. La IL-4 y la IL-13 se necesitan para producir la IgE 5 e inducir las células con un fenotipo Th2 (Barnes P. J., 2003, Cytokine Growth Factor Rev. 14: 511-522; Schuh et al., 2003, Cytokine Growth Factor Rev. 2003, 14: 503-510) . Enfermedades atópicas es un nombre genérico para las enfermedades alérgicas que se desarrollan por la exposición a alérgenos, en especial en los individuos con una propensión genética a que los alérgenos lo sensibilicen con facilidad. Los individuos que tienen estos factores de predisposición desarrollan con facilidad una respuesta inmunitaria anómala contra antígenos alimentarios y

alérgenos inhalados. Algunos ejemplos específicos de enfermedades alérgicas son el asma bronquial, la dermatitis atópica, la urticaria, la rinitis alérgica, la conjuntivitis alérgica y la enterogastritis alérgica.

Una neoplasia es el crecimiento anormal de tejido que es incontrolable y progresivo. Una neoplasia maligna a menudo se caracteriza como un cáncer. El cáncer es la segunda causa por importancia de muerte en los humanos y es una terminología general para más de 100 enfermedades que se caracterizan por la proliferación anormal de las 15 células inmortalizadas. Uno de los mecanismos que interviene en la persistencia y el incremento de estas células es mediante la liberación de factores de crecimiento que actúan a través de receptores y que conducen a la proliferación celular. Entre estos factores de crecimiento se ha demostrado que el GM-CSF es un factor de crecimiento importante para varias células tumorales. El receptor de quimiocinas CCR3 se caracterizó recientemente en los linfocitos B malignos recuperados de pacientes con leucemia linfocítica crónica (LLC) y con tricoleucemia 20 (HCL, por su nombre en inglés) (Trentin et al., 2004, Blood, 104, 502-508) . De hecho, la transactivación del receptor del factor de crecimiento epidérmico (EGFR, por su nombre en inglés) a través de CCR3, el receptor de quimiocinas, se encontró que era una vía decisiva que desencadenaba la activación de la cinasa de MAP y la producción de citocinas en las células epiteliales de los bronquios (Adachi et al., 2004, Biochem. Biophys, Res. Commun. 320, 292396) . La inhibición de la proliferación de las células cancerosas mediante el bloqueo de los receptores de los factores de crecimiento y/o de las quimiocinas puede ser importante para el tratamiento de determinados cánceres.

Los eosinófilos son un tipo de glóbulos blancos. Son leucocitos granulares con un núcleo que normalmente tiene dos lóbulos conectados por una hebra delgada de cromatina y cuyo citoplasma contiene gránulos redondos gruesos de tamaño uniforme y que se tiñen... [Seguir leyendo]

1. Utilización de al menos dos oligonucleótidos antisentido que tienen secuencias que comprenden la SEQ ID n.º 13 y la SEQ ID n.º 14, respectivamente, para la fabricación de un medicamento para el tratamiento y/o la prevención de al menos una de asma, alergia, hipereosinofilia e inflamación general.

2. Utilización de acuerdo con la reivindicación 1, en donde el medicamento se utiliza para tratar y/o prevenir el asma.

3. Utilización de acuerdo con la reivindicación 1, en donde el medicamento se utiliza para tratar y/o prevenir la alergia.

4. Utilización de acuerdo con la reivindicación 1, en donde el medicamento se utiliza para tratar y/o prevenir la10 hipereosinofilia.

5. Utilización de acuerdo con la reivindicación 1, en donde el medicamento se utiliza para tratar y/o prevenir la inflamación general.

6. Composición farmacéutica que comprende al menos dos oligonucleótidos antisentido que tienen las

secuencias que comprenden la SEQ ID n.º 13 y la SEQ ID n.º 14, respectivamente, y un vehículo 15 farmacéuticamente aceptable.

7. Composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 6, en donde la composición farmacéutica es tópica.

8. Composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 6 o 7, en donde la composición farmacéutica es para ser usada en el tratamiento y/o la prevención del asma.

9. Composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 6 o 7, en donde la composición farmacéutica es para ser usada en el tratamiento y/o la prevención de la alergia.

10. Composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 6 o 7, en donde la composición farmacéutica es para ser usada en el tratamiento y/o la prevención de la hipereosinofilia.

11. Composición farmacéutica de acuerdo con la reivindicación 6 o 7, en donde la composición farmacéutica es 25 para ser usada en el tratamiento y/o la prevención de la inflamación general.

12. Composición farmacéutica de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 6 a 11, en donde los al menos dos oligonucleótidos consisten en las SEQ ID n.º 13 y 14, respectivamente.

13. Utilización de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 5, en donde los al menos dos oligonucleótidos consisten en las SEQ ID n.º 13 y 14, respectivamente.

E292 4522922 T

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