Métodos y composiciones para el tratamiento de infecciones persistentes.

Un compuesto que reduce la actividad de un polipéptido de muerte programada (PD-1) para su uso en un métodode tratamiento o prevención de la infección vírica persistente en un sujeto,

donde dicho compuesto es un anticuerpocontra PD-L1 y donde la infección vírica persistente es una infección por el virus de la inmunodeficiencia humana(VIH).

Métodos y composiciones para el tratamiento de infecciones persistentes

Declaración relativa al Patrocinio federal de la investigación La presente invención se realizó con las ayudas del Gobierno de los Estados Unidos de América, en virtud de las subvenciones de los Institutos Nacionales de la Salud (NIH) siguientes: AI39671 y CA84500. El Gobierno posee determinados derechos sobre la invención.

Campo de la invención En general, la presente invención se refiere a métodos y composiciones para el tratamiento de infecciones persistentes.

Antecedentes de la invención A pesar de que el desarrollo de vacunas preventivas ha reducido notablemente el índice de mortalidad por infecciones víricas, el uso de estas vacunas frente a virus que causan infecciones persistente (por ejemplo, el virus de la hepatitis C) ha tenido un éxito limitado. A diferencia de los virus que causan infecciones agudas y autolimitadas, la respuesta inmunitaria que se produce contra los microbios que provocan infecciones persistentes suele ser transitoria e insuficiente para erradicar la infección. Como resultado, el microbio infeccioso permanece en el sujeto infectado durante largos períodos de tiempo, sin causar necesariamente daños constantes en el huésped. Un importante impedimento para la erradicación de microbios que causan infecciones persistentes es la capacidad de estos microbios para eludir el sistema inmunitario del organismo hospedador. Por ejemplo, determinados virus y parásitos regulan a la baja la expresión de moléculas del huésped necesarias para un eficiente reconocimiento de los linfocitos T de las células infectadas. Las infecciones persistentes también provocan una alteración funcional de los linfocitos T CD8+ específicos de antígeno, que son fundamentales para el control y la erradicación de las infecciones víricas. A pesar de que la combinación de vacunas terapéuticas con citoquinas adyuvantes ha sido prometedora, las respuestas inmunitarias resultantes no han erradicado con éxito el patógeno.

Por tanto, se necesitan métodos mejores para tratar, prevenir o aliviar las infecciones persistentes.

Resumen de la invención La presente invención proporciona compuestos para su uso en el tratamiento y la prevención de una infección persistente por VIH. La invención se basa en el descubrimiento de que los linfocitos T CD8+ específicos de antígeno se vuelven funcionalmente tolerantes («se agotan») frente al agente infeccioso tras la introducción del polipéptido de muerte programada 1 (PD-1) . Por consiguiente, al reducir la actividad de PD-L1, la proliferación de linfocitos T CDS+ funcionalmente tolerantes, la producción de citoquinas y la tasa de eliminación de VIH se incrementan de forma que la respuesta inmunitaria específica para el agente infeccioso mejora.

La divulgación proporciona un método para aliviar o prevenir un síntoma de una infección persistente (por ejemplo, una infección vírica, una infección bacteriana, una infección fúngica, una infección micoplásmica y una infección parasitaria) o del cáncer, administrando a un sujeto que lo necesita (por ejemplo, un ser humano) un compuesto que reduce la actividad o la expresión de un miembro de la familia similar a CD28 (por ejemplo, PD-1, CTLA-4, BTLA y un fragmento o variante funcional de los mismos) o ligandos de la familia similar a CD28 (por ejemplo, PD-L1 o PD-L2) . Alternativamente, al sujeto se le administra un linfocito B o un linfocito T específico de antígeno que ha estado en contacto con un compuesto que reduce la expresión o la actividad de un polipéptido PD-1 de la célula. Por ejemplo, el linfocito B o el linfocito T específico de antígeno es específico de un antígeno vírico. El linfocito B o el linfocito T se obtiene de una fuerte autóloga o de otro sujeto de la misma especie o de una especie diferente que el sujeto a tratar.

Por otra parte, la divulgación incluye un método para incrementar la actividad citotóxica de un linfocito T (por ejemplo, un linfocito T anérgico o un linfocito T que presenta una tolerancia mayor a los antígenos) , poniendo en contacto el linfocito T con un compuesto que reduce la actividad o la expresión de un polipéptido PD-1.

En todos los aspectos anteriores, las infecciones víricas persistentes resultan de infecciones como un virus de la hepatitis, un virus de la inmunodeficiencia humana (VIH) , un virus linfotrópico de células T humano (HTLV) , un herpesvirus, un virus de Epstein-Barr o un virus del papiloma humano. Las infecciones víricas persistentes también pueden incluir infecciones causadas por un virus latente. Los cánceres incluyen trastornos linfoproliferativos como el linfoma angioinmunoblástico y el linfoma de Hodgkin nodular de predominio linfocítico. Es conveniente que el compuesto aumente la respuesta inmunitaria específica del antígeno mediante un incremento de la actividad de los linfocitos T citotóxicos (por ejemplo, un incremento de la producción de citoquinas citotóxicas como IFN y, TNFa, o IL-2, un incremento de la proliferación de células T o un incremento de la eliminación vírica) en el sujeto a tratar. Por ejemplo, el compuesto reduce la expresión o actividad de un ligando PD de tipo 1 (PD-L1) o un ligando PD de tipo 2 (PD-L2) o reduce la interacción entre PD-1 y PD-L1 o la interacción entre PD-1 y PD-L2. Algunos ejemplos de compuestos incluyen anticuerpos (como un anticuerpo contra PD-1, un anticuerpo contra PD-L1 y un anticuerpo contra PD-L2) , moléculas de ARNi (por ejemplo, moléculas de ARNi contra PD-1, ARNi contra PD-L1 y ARNi contra PD-L2) , moléculas antisentido (por ejemplo un ARN antisentido contra PD-1, un ARN antisentido contra PD-L1 y un ARN antisentido contra PD-L2) , proteínas dominantes negativas (por ejemplo, una proteína dominante negativa de PD-1, una proteína dominante negativa de PD-L1 y una proteína dominante negativa de PD-L2) y moléculas pequeñas inhibidoras. Los anticuerpos incluyen anticuerpos monoclonales, anticuerpos humanizados, anticuerpos desinmunizados y proteínas de fusión de Ig. Un ejemplo de anticuerpo contra PD-L1 incluye el clon EH12.

Además del compuesto que reduce la actividad o expresión de PD-1, al sujeto a tratar también se le administra una vacuna que puede incluir o no un adyuvante o una dosis de refuerzo principal. Opcionalmente, al sujeto se le administra un segundo compuesto, como un compuesto antivírico (por ejemplo, vidarabina, aciclovir, ganciclovir, valganciclovir, inhibidor de la transcriptasa inversa análogo de los nucleótidos (NRTI) , como AZT (zidovudina) , ddI (didanosina) , ddC (zalcitabina) , d4T (estavudina) o 3TC (lamivudina) , inhibidor de la transcriptasa inverso no análogo de los nucleótidos (NNRTI) , como nevirapina o delavirdina, inhibidor de la proteasa como saquinavir, ritonavir, indinavir o nelfinavir, ribavirina e interferón) , un compuesto antibacteriano, un compuesto antifúngico, un compuesto antiparasitario, un compuesto antiinflamatorio, compuestos antineoplásicos o un analgésico. El segundo compuesto también puede ser un compuesto que reduce la expresión o actividad del antígeno 4 asociado al linfocito T citotóxico (CTLA-4) o del atenuador de los linfocitos B y T (BTLA) . Otros ejemplos de compuestos que se pueden administrar al sujeto son anticuerpos contra CTLA-4, anticuerpos contra BTLA, anticuerpos contra CD28, anticuerpos contra ICOS, anticuerpos contra ICOS-L, anticuerpos contra B7-I, anticuerpos contra B7-2, anticuerpos contra B7-H3, anticuerpos contra B7-H4.

La presente divulgación proporciona también un método para identificar un compuesto candidato que modula la actividad o expresión de un polipéptido PD-1 que incluye los pasos siguientes: (a) poner en contacto una célula que expresa un gen PD-1 (por ejemplo, un gen de fusión de PD-1) con un compuesto candidato; (b) medir la expresión o actividad de PD-1 en la célula (por ejemplo, midiendo la expresión de la proteína o el ARNm de PD-1) ; y (c) comparando la expresión o actividad de PD-1 en la célula con esa expresión o actividad en una célula de control que no ha estado en contacto con el compuesto. Un incremento o una disminución de la expresión o actividad de PD-1 indica que el compuesto candidato es útil para modular la actividad o expresión de un polipéptido PD-1.

Alternativamente, el método de detección puede implicar los pasos siguientes: (a) poner en contacto un linfocito T que presenta una sobreexpresión de un gen PD-1 con un compuesto candidato; y (b) determinar la actividad citotóxica del linfocito T; (c) comparando la actividad citotóxica del linfocito T con respecto a la actividad en una célula de control que no ha estado en contacto con el compuesto. Un incremento o una disminución de esta actividad indica que el compuesto candidato es... [Seguir leyendo]

1. Un compuesto que reduce la actividad de un polipéptido de muerte programada (PD-1) para su uso en un método de tratamiento o prevención de la infección vírica persistente en un sujeto, donde dicho compuesto es un anticuerpo contra PD-L1 y donde la infección vírica persistente es una infección por el virus de la inmunodeficiencia humana (VIH) .

2. El uso de un compuesto que reduce la actividad de un polipéptido de muerte programada (PD-1) en la fabricación de un medicamento para aliviar o prevenir un síntoma de infección vírica persistente en un sujeto, donde dicho compuesto es un anticuerpo contra PD-L1 y donde la infección vírica persistente es una infección por el virus de la inmunodeficiencia humana (VIH) .

3.El compuesto para su uso en un método de tratamiento o prevención de una infección vírica persistente conforme a la reivindicación 1 o el uso de la reivindicación 2, donde dicho compuesto incrementa la actividad citotóxica de los linfocitos T en dicho sujeto.

4.El compuesto para su uso en un método de tratamiento o prevención de una infección vírica persistente, de conformidad con la reivindicación 3, o el uso de la reivindicación 3, donde dicha actividad citotóxica de los linfocitos T es la producción de citoquina, la proliferación de los linfocitos T o la eliminación del agente infeccioso.

5.El compuesto para su uso en un método de tratamiento o prevención de una infección vírica persistente de conformidad con la reivindicación 4 o el uso de la reivindicación 4, donde dicha citoquina es IFNy, TNFa, o IL-2.

6.El compuesto para su uso en un método de tratamiento o prevención de una infección vírica persistente conforme a la reivindicación 1 o el uso de la reivindicación 2, donde se administra una vacuna o un segundo compuesto a dicho sujeto.

7.El compuesto para su uso en un método de tratamiento o prevención de una infección vírica persistente de conformidad con la reivindicación 6 o el uso de la reivindicación 6, donde dicha vacuna comprende un adyuvante o una dosis de refuerzo principal.

8.El compuesto para su uso en un método de tratamiento o prevención de una infección vírica persistente de conformidad con la reivindicación 6 o el uso de la reivindicación 6, donde dicho segundo compuesto es un compuesto antivírico, un compuesto antiinflamatorio o un analgésico.

9.El compuesto para su uso en un método de tratamiento o prevención de una infección vírica persistente de conformidad con la reivindicación 6 o el uso de la reivindicación 6, donde dicho segundo compuesto reduce la expresión o actividad del antígeno citotóxico de linfocitos T de tipo 4 (CTLA-4) o el atenuador de linfocitos B o T (BTLA) .

10.El compuesto para su uso en un método de tratamiento o prevención de una infección vírica persistente, de conformidad con la reivindicación 6 o el uso de la reivindicación 6, donde dicho segundo compuesto es un anticuerpo contra CTLA, un anticuerpo contra BTLA, un anticuerpo contra CD28, un anticuerpo contra ICOS, un anticuerpo contra ICOS-L, un anticuerpo contra B7-I, un anticuerpo contra B7-2, un anticuerpo contra B7-H3 o un anticuerpo contra B7-H4.

11.El compuesto para su uso en un método de tratamiento o prevención de una infección vírica persistente de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores o con el uso de cualquier reivindicación anterior, donde dicho sujeto es un ser humano.