Máscara para depositar y extender reactivos sobre un soporte de análisis.

Máscara, conveniente para depositar y extender reactivos sobre un soporte de análisis de muestras biológicas,

que comprende:

- una superficie inferior y una superficie superior por lo menos en parte paralelas entre sí, separadas por unadistancia que constituye el grosor de la máscara,

- una o varias pistas, correspondientes a unas zona(s) delimitada(s), localizadas a nivel de la superficie inferiorde la máscara y que comprenden un elemento sobresaliente (32) que sobresale en la superficie 10 inferior de lamáscara, comprendiendo cada elemento sobresaliente una parte que constituye una pendiente con respectoa un plano horizontal,

- caracterizada porque la máscara comprende, asociada a cada pista, una abertura para la carga y el depósitode reactivos, dicha abertura atravesando la máscara por la totalidad de su grosor desde un orificio superior(36) de carga en la superficie superior de la máscara hasta un orificio inferior (34) de depósito, estando dichoorificio inferior de depósito situado en la pendiente, en la proximidad del punto más bajo de la pendiente de lapista,

siendo la máscara tal que la o las pistas que comprende permiten el mantenimiento por capilaridad, entre la pista yla superficie del soporte de análisis frente a la que se colocará la máscara, de reactivos cargados a nivel de cadaabertura y depositados sobre el soporte de análisis.

Tipo: Patente Europea. Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: E03290302.

Solicitante: SEBIA.

Inventor/es: BELLON, FRANCK.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • G01N27/447 FISICA.G01 METROLOGIA; ENSAYOS.G01N INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION DE SUS PROPIEDADES QUIMICAS O FISICAS (procedimientos de medida, de investigación o de análisis diferentes de los ensayos inmunológicos, en los que intervienen enzimas o microorganismos C12M, C12Q). › G01N 27/00 Investigación o análisis de materiales mediante el empleo de medios eléctricos, electroquímicos o magnéticos (G01N 3/00 - G01N 25/00 tienen prioridad; medida o ensayo de variables eléctricas o magnéticas o de las propiedades eléctricas o magnéticas de los materiales G01R). › utilizando la electroforesis.
  • G01N33/561 G01N […] › G01N 33/00 Investigación o análisis de materiales por métodos específicos no cubiertos por los grupos G01N 1/00 - G01N 31/00. › Inmunoelectroforesis.

PDF original: ES-2397272_T3.pdf

 

Máscara para depositar y extender reactivos sobre un soporte de análisis.

Fragmento de la descripción:

Máscara para depositar y extender reactivos sobre un soporte de análisis.

La invención tiene por objeto una máscara para depositar y extender uno o varios reactivos sobre un soporte de análisis, en particular un soporte de electroforesis, por ejemplo, un gel de agarosa.

La invención se puede utilizar, por ejemplo, en el campo de la detección y de la caracterización de constituyentes presentes en una muestra biológica, en particular un líquido biológico tal como suero, orina, líquido cefalorraquídeo. En particular, esta detección se puede realizar a continuación de la separación de dichos constituyentes a partir de la muestra biológica, por ejemplo mediante la técnica de electroforesis. La detección se puede realizar entonces en particular mediante las técnicas conocidas de inmunofijación que requieren la puesta en contacto y la incubación de reactivos con los constituyentes separados de la muestra, para permitir una reacción de reconocimiento inmunológico de los constituyentes separados de la muestra biológica con los reactivos, en zonas determinadas de un soporte de análisis.

La invención se puede utilizar ventajosamente para análisis de rutina, practicados en particular en el marco de los análisis clínicos.

La invención tiene asimismo por objeto una máscara, destinada a depositar y extender uno o varios reactivos sobre un soporte de análisis, asociada en un dispositivo a unos medios de posicionamiento, que permiten el posicionamiento de la máscara con respecto al soporte de análisis, en la proximidad de dicho soporte, cuando se utiliza la máscara para depositar y extender los reactivos.

Estos medios de posicionamiento también pueden estar asociados a unos medios de guiado, o pueden comprender unos medios de guiado, para el desplazamiento de la máscara cuando está posicionada en la proximidad del soporte de análisis, de modo que se permita la extensión de los reactivos sobre zonas delimitadas del soporte, incluyendo zonas denominadas de incubación de los reactivos con los constituyentes de la muestra.

El dispositivo de la invención puede permitir disponer y extender reactivos en modo manual. También se puede disponer para permitir depositar de manera automatizada estos reactivos y eventualmente su extensión automatizada.

La etapa de carga de los reactivos a nivel de la máscara también se puede realizar, según los modos de realización de la invención, manualmente o de modo automatizado. La máscara según la invención se carga ventajosamente de modo más sencillo que las máscaras disponibles en el estado de la técnica.

La invención tiene asimismo por objeto un procedimiento para depositar y extender reactivos sobre un soporte de análisis.

Un procedimiento de este tipo se utiliza, según un modo de realización particular de la invención, para depositar y extender reactivos, destinados a la realización de una inmunofijación, con vistas a la detección y dado el caso a la cuantificación de constituyentes específicos contenidos en una muestra biológica, separándose previamente dichos constituyentes por electroforesis sobre un soporte tal como un gel de agarosa.

La invención se refiere asimismo a un procedimiento de inmunofijación, que utiliza la máscara mencionada anteriormente.

La invención tiene todavía por objeto un kit que comprende una máscara según la invención.

Un kit según la invención está adaptado ventajosamente para la realización de un procedimiento de inmunofijación por medio de la máscara de la invención.

La invención se refiere asimismo a los medios de posicionamiento y de guiado de la máscara.

Se recuerda que la técnica de inmunofijación que permite en particular el análisis de muestras biológicas con vistas al tipado de las paraproteínas que contienen, es un análisis habitual muy practicado en particular en los laboratorios de análisis clínicos.

Esta técnica, que asocia una electroforesis a la formación de precipitados sobre el gel de electroforesis, se conoce desde hace mucho tiempo. Esta técnica se ha descrito en particular por Alper CA y Johnson AM Vox. Sang. 17:445 (1969) , Cawley LP et al Clin. Chem. 22: 1262 (1976) , Ritchie RF y Smith R Clin. Chem. 22: 497, 1735, 1982 (1976) . Permite la identificación de anomalías en diferentes muestras biológicas, en particular en líquidos biológicos, por ejemplo en suero, orina o líquido cefalorraquídeo.

Esta técnica comprende principalmente las siguientes etapas:

1) la separación de los constituyentes proteicos del suero o del líquido sometido a prueba mediante electroforesis sobre un soporte tal como un gel, por ejemplo sobre gel de agarosa;

2) la reacción inmunológica con anticuerpos específicos de las proteínas separadas;

3) el revelado de los complejos inmunológicos formados.

Las condiciones para la realización de estas etapas se han descrito en la técnica anterior.

La solicitud de patente europea EP 1 335 201 A1 describe, por ejemplo, un sistema que forma un contacto físico entre un gel y una placa, comprendiendo dicha placa unas proyecciones que cortan el gel, o por lo menos crean una depresión en la superficie del gel, con el fin de formar unas cavidades cuya base está constituida por el gel, los lados por las proyecciones, y la parte superior por la parte inferior de la placa.

Los dispositivos utilizados comprenden además la posibilidad de realizar sobre el propio soporte de electroforesis, en particular el propio gel, una pista de control obtenida mediante fijación del conjunto de las proteínas separadas presentes en la muestra, con la ayuda de un fijador de proteínas que incluye por ejemplo un antisuero polivalente.

Las nuevas técnicas semiautomáticas de aplicación a muestras biológicas que se van a analizar, de migración a temperatura controlada y de depósito de los reactivos (que comprenden por ejemplo los antisueros y los fijadores) permiten una miniaturización de los perfiles de inmunofijación a la vez que se conservan sensibilidades y resoluciones satisfactorias. Esta miniaturización permite el análisis de un mayor número de muestras sobre un mismo soporte de electroforesis, en particular sobre un mismo gel.

Así, sobre un gel de electroforesis de dimensiones de 8 x 10 cm, se ha pasado en algunos años de la realización de una a nueve inmunofijaciones (por medio por ejemplo del kit de inmunofijación comercializado con la marca Hydragel 9IF por la empresa SEBIA) . Esto conlleva ganancias de tiempo a nivel del análisis así como reducciones a nivel del consumo de reactivos, lo que desemboca en una disminución del precio del análisis.

Para depositar los reactivos con vistas a una inmunofijación en tales condiciones, la patente europea EP 0 526 271 B1 describe por ejemplo un dispositivo o máscara, para el reparto de los reactivos, generalmente de antisueros específicos y un fijador, que puede resolver un número determinado de problemas planteados por los dispositivos o máscaras de la técnica anterior y que aporta una mayor seguridad y facilidad de utilización. No por ello es menos cierto que para realizar por ejemplo 9 inmunofijaciones sobre un mismo gel de electroforesis en 3 filas de 3 muestras por medio de la máscara descrita en la patente EP 0 526 271 B1, es necesario, para cada muestra, efectuar el pipeteado de 6 reactivos (fijador, antisuero anti-lgG, antisuero anti-IgA, antisuero anti-IgM, antisuero anti-k y antisuero anti-λ) o sea un total de 54 pipeteados.

Estos pipeteados efectuados manualmente pueden resultar largos y fastidiosos y esto a pesar de la posible utilización de pipetas que permiten la extensión repetitiva.

La presente invención tiene como objetivo en particular mejorar las condiciones para depositar y extender reactivos sobre un soporte de análisis por medio de máscaras, proponiendo una máscara que permite en particular reducir el número de pipeteados de estos reactivos y que permite reducir la cantidad de reactivos utilizada. Los medios propuestos en el marco de la invención se pueden utilizar en cualquier técnica de análisis que requiera el depósito controlada de reactivos sobre un soporte de análisis. A este respecto, se mencionarán las técnicas de inmunofijación siguiendo una separación electroforética, las técnicas de extensión de un sustrato determinado, con el fin de desarrollar un revelado enzimático, por ejemplo para el análisis de la lactodeshidrogenasa (LDH) o de la creatina cinasa (CK) .

La invención tiene por objeto en primer lugar una máscara, conveniente para depositar y extender reactivos sobre un soporte de análisis, cuyo diseño tiene en cuenta una utilización que incluye su desplazamiento, para la realización... [Seguir leyendo]

 


Reivindicaciones:

1. Máscara, conveniente para depositar y extender reactivos sobre un soporte de análisis de muestras biológicas,

que comprende: 5

- una superficie inferior y una superficie superior por lo menos en parte paralelas entre sí, separadas por una distancia que constituye el grosor de la máscara,

- una o varias pistas, correspondientes a unas zona (s) delimitada (s) , localizadas a nivel de la superficie inferior de la máscara y que comprenden un elemento sobresaliente (32) que sobresale en la superficie inferior de la máscara, comprendiendo cada elemento sobresaliente una parte que constituye una pendiente con respecto a un plano horizontal,

-caracterizada porque la máscara comprende, asociada a cada pista, una abertura para la carga y el depósito 15 de reactivos, dicha abertura atravesando la máscara por la totalidad de su grosor desde un orificio superior

(36) de carga en la superficie superior de la máscara hasta un orificio inferior (34) de depósito, estando dicho orificio inferior de depósito situado en la pendiente, en la proximidad del punto más bajo de la pendiente de la pista,

siendo la máscara tal que la o las pistas que comprende permiten el mantenimiento por capilaridad, entre la pista y la superficie del soporte de análisis frente a la que se colocará la máscara, de reactivos cargados a nivel de cada abertura y depositados sobre el soporte de análisis.

2. Máscara según la reivindicación 1, conveniente para extender reactivos sobre un soporte de análisis de muestras 25 biológicas, que comprende:

- una superficie inferior y una superficie superior por lo menos en parte paralelas entre sí, separadas por una distancia que constituye el grosor de la máscara,

- una o varias pistas que comprenden cada una un elemento (32) sobresaliente de forma alargada, que emerge bajo la superficie inferior de la máscara, comprendiendo dicho elemento sobresaliente una parte que constituye una pendiente con respecto a un plano horizontal,

- asociada a cada pista, una abertura para cargar y depositar reactivos, dicha abertura atravesando la máscara

por la totalidad de su grosor desde un orificio superior (36) de carga presente en la superficie superior de la máscara hasta un orificio inferior (34) de depósito, estando situado dicho orificio inferior de depósito en la pendiente, en la proximidad del punto más bajo de la pendiente de la pista,

siendo la máscara tal que la o las pistas que comprende permiten el mantenimiento por capilaridad, entre la pista y la superficie del soporte de análisis frente a la que se colocará la máscara, de reactivos cargados a nivel de cada abertura y depositados sobre el soporte de análisis.

3. Máscara según la reivindicación 1 o 2, conveniente para extender reactivos sobre un soporte de análisis de muestras biológicas, que comprende: 45

- una superficie inferior y una superficie superior por lo menos en parte paralelas entre sí, separadas por una distancia que constituye el grosor de la máscara,

- una o varias pistas que comprenden cada una un elemento (32) sobresaliente que emerge bajo la superficie inferior de la máscara, constituido por una protuberancia de forma paralelepipédica truncada, comprendiendo dicho elemento sobresaliente una parte que constituye una pendiente con respecto a un plano horizontal,

- asociada a cada pista, una abertura para cargar y depositar reactivos, dicha abertura atravesando la máscara por la totalidad de su grosor desde un orificio superior (36) de carga presente en la superficie superior de la

máscara hasta un orificio inferior (34) de depósito, estando situado dicho orificio inferior de depósito en la pendiente, en la proximidad del punto más bajo de la pendiente de la pista,

siendo la máscara tal que la o las pistas que comprende permiten el mantenimiento por capilaridad, entre la pista y la superficie del soporte de análisis frente a la que se colocará la máscara, de reactivos cargados a nivel de cada abertura y depositados sobre el soporte de análisis.

4. Máscara según la reivindicación 2 o 3, conveniente para extender reactivos sobre un soporte de análisis de muestras biológicas, caracterizada porque el elemento (32) sobresaliente presenta una superficie superior, que coincide con la parte de la superficie inferior de la máscara de la cual emerge, y una superficie inferior separada de 65 la superficie superior según por lo menos una pendiente con respecto a un plano horizontal.

5. Máscara según la reivindicación 1, caracterizada porque cada elemento (32) sobresaliente comprende una superficie inferior y una superficie superior paralelas entre sí y paralelas a las superficies inferior y superior de la máscara, realizándose la pendiente de la pista mediante la inclinación de la máscara con respecto al soporte de análisis, en posición de utilización.

6. Máscara según la reivindicación 5, caracterizada porque el elemento (32) sobresaliente es de forma alargada, en particular de forma paralelepipédica.

7. Máscara según la reivindicación 4 o 6, caracterizada porque el punto más bajo de la pendiente, situado en la proximidad del orificio inferior (34) de la abertura de cada pista, es el punto más próximo al soporte de análisis frente al cual y en la proximidad del cual es llevado en posición de utilización.

8. Máscara según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 7, caracterizada porque es rígida o está rigidizada.

9. Máscara según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 8, en la que la abertura presenta un volumen tal que es susceptible de constituir un depósito para los reactivos cargados.

10. Máscara según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 9, en la que la abertura de cada pista atraviesa perpendicularmente el grosor de la máscara incluyendo el grosor del elemento (32) sobresaliente, comprendiendo la abertura una parte de forma troncocónica (38) terminada por un orificio inferior (34) de forma cilíndrica.

11. Máscara según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, que comprende varias pistas paralelas entre sí, repartidas por la longitud de la máscara.

12. Máscara según la reivindicación 11, que comprende:

- una primera serie de pistas paralelas entre sí, dispuestas siguiendo una primera alineación,

- una segunda serie de pistas paralelas entre sí y paralelas a las pistas de la primera serie, y que forman un segunda alineación, desplazada con respecto a la primera alineación.

13. Máscara según la reivindicación 11, en la que las pistas se organizan en varios grupos que se suceden por la longitud de la máscara, estando constituido cada grupo por una pista colocada de modo desplazado con respecto a las otras pistas alineadas unas con respecto a otras, siendo las pistas paralelas entre sí.

14. Máscara según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 y 8 a 13, en la que la longitud de la pendiente de cada pista coincide con la longitud de esta pista.

15. Máscara según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4 y 8 a 13, en la que la pista se prolonga más allá de la pendiente.

16. Máscara según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 15, en la que las pistas permiten disponer cada reactivo en una cantidad igual a o comprendida entre 4 y 15 μl en la abertura de la máscara y el mantenimiento por capilaridad de dichos reactivos entre la pista y el soporte de análisis, cuando la máscara es llevada a la proximidad del soporte de análisis.

17. Máscara según la reivindicación 16, que permite disponer cada reactivo en una cantidad igual a o comprendida entre 4 y 15 μl en cada abertura de la máscara y el mantenimiento por capilaridad de dichos reactivos entre las pistas de la máscara y el soporte de análisis, cuando se lleva la máscara a una distancia del soporte de análisis inferior o igual a 2 mm en el punto de la máscara más alejado del soporte de análisis.

18. Máscara según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 17, que permite disponer cada reactivo en una cantidad igual a o comprendida entre 4 y 15 μl en cada abertura de la máscara y el mantenimiento por capilaridad de dichos reactivos entre las pistas de la máscara y el soporte de análisis, cuando se lleva la máscara a una distancia del soporte de análisis igual a o comprendida entre 0, 1 y 0, 5 mm en el punto de la máscara más próximo al soporte de análisis.

19. Máscara según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 18, en la que las pistas están separadas unas de otras por una separación superior o igual a 1, 5 mm.

20. Máscara según la reivindicación 19, en la que la separación entre las pistas es de 2, 5 mm.

21. Máscara según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 20, en la que las dimensiones de las pistas y su separación son tales que los reactivos que mantienen por capilaridad entre la máscara y el soporte de análisis no interaccionan durante el depósito o la extensión sobre dicho soporte de análisis.

22. Máscara según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 21, en la que la anchura de las pistas es de 2, 5 mm.

23. Máscara según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 22, en la que cada pista presenta una longitud

comprendida entre 6 y 7 mm. 5

24. Máscara según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 23, en la que la pista destinada al fijador está desplazada con respecto a la primera pista vecina en una distancia de 5 a 7 mm.

25. Máscara según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 24, en la que la pendiente de cada pista forma un ángulo 10 comprendido entre 1º y 10º con un plano horizontal.

26. Máscara según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 25, en la que cada pista presenta las siguientes dimensiones:

- longitud: de 3 a 15 mm

- anchura: de 1 a 10 mm

- inclinación de la pendiente con respecto a un plano horizontal: de 1 a 10º.

27. Máscara según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 26, en la que cada pista presenta las siguientes 20 dimensiones:

- longitud: 7 mm

- anchura: 2, 5 mm

-ángulo de la pendiente con respecto a un plano horizontal: 5º. 25

28. Máscara según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 27, en la que el orificio superior de la abertura forma un ángulo de 50º.

29. Máscara según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 28, en la que el grosor de la máscara está comprendido 30 entre 1 y 10 mm.

30. Máscara según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 29, que comprende 6, 12 o 18 pistas.

31. Máscara según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 30, realizada a partir de un material apropiado para ser 35 moldeado, y que permite realizar una superficie lisa.

32. Máscara según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 31, asociada a unos medios de posicionamiento destinados a mantener la máscara en la proximidad de la superficie del soporte de análisis a los alrededores del que se llevará la máscara para depositar y extender reactivos sobre el soporte de análisis.

33. Dispositivo para depositar y extender uno o varios reactivos sobre un soporte de análisis de muestras biológicas que comprende:

a) una máscara (10) según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 32, 45

b) unos medios (12, 14, 16) de colocación y de guiado de la máscara, que permiten la colocación de la máscara de tal modo que la máscara se mantiene en la proximidad de la superficie del soporte de análisis y que permiten el guiado de la máscara por barrido de la superficie del soporte de análisis, en un plano horizontal paralelo a la superficie de dicho soporte o inclinado con respecto a la superficie de dicho soporte, para 50 permitir depositar y extender los reactivos sobre cada una de las zonas determinadas del soporte de análisis que se ponen frente a las pistas de la máscara.

34. Dispositivo según la reivindicación 33, en el que los medios de posicionamiento y de guiado de la máscara (10)

permiten establecer una distancia entre el soporte de análisis y el punto de la pista de la máscara más próximo a 55 dicho soporte comprendida entre 0, 1 mm y 0, 5 mm.

35. Dispositivo según cualquiera de las reivindicaciones 33 a 34, en el que los medios de posicionamiento y de guiado permiten el desplazamiento automatizado de la máscara (10) a lo largo del soporte de análisis.

36. Procedimiento para depositar y extender uno o varios reactivos sobre un soporte de análisis, que comprende muestras biológicas, que comprende las etapas siguientes:

- cargar el o los reactivos sobre la máscara (10) de modo que se permita depositar el o los reactivos sobre el

soporte de análisis y su mantenimiento por capilaridad entre dicho soporte y la pendiente de la o de las pistas 65 de dicha máscara;

- colocar una máscara (10) según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 32 o un dispositivo según cualquiera de las reivindicaciones 33 a 35, en la proximidad del soporte de análisis, de modo que se permita depositar el

o los reactivos sobre el soporte de análisis y su mantenimiento por capilaridad entre dicho soporte y la pendiente de la o de las pistas de dicha máscara; 5

- desplazar la máscara de modo que se realice un barrido de la superficie del soporte de análisis para permitir la extensión del o de los reactivos sobre el soporte de análisis a nivel de zonas de incubación, correspondientes a zonas delimitadas de dicho soporte, extendiéndose el o los reactivos en cantidad suficiente para permitir su interacción con los constituyentes de las muestras biológicas presentes sobre

dicho soporte de análisis.

37. Procedimiento según la reivindicación 36, en el que el desplazamiento de la máscara permite depositar una cantidad de cada reactivo comprendida entre 4 μl y 10 μl por pista sobre las zonas delimitadas del soporte de análisis.

38. Procedimiento según cualquiera de las reivindicaciones 36 o 37, en el que la carga de la máscara por medio del

o de los reactivos se efectúa fuera de la zona de la superficie del soporte de análisis que comprende los constituyentes de las muestras biológicas.

39. Procedimiento según la reivindicación 36, en el que la carga de la máscara por medio del o de los reactivos, se efectúa antes de la etapa de colocación de la máscara en la proximidad del soporte de análisis y porque los reactivos se depositan sobre el soporte de análisis como resultado de un impulso resultante de una presión de aire ejercida a nivel de la máscara, de una unión mecánica entre los reactivos y el soporte de análisis, de una proyección de los reactivos sobre el soporte, o de un breve contacto entre la máscara y el soporte de análisis, a nivel del punto más bajo de la pendiente de la pista.

40. Procedimiento según la reivindicación 39, en el que la carga de la máscara (10) por medio del o de los reactivos es automatizada.

41. Procedimiento según cualquiera de las reivindicaciones 36 a 40, en el que la etapa de desplazamiento de la máscara (10) es automatizada.

42. Procedimiento según cualquiera de las reivindicaciones 36 a 41, en el que el soporte de análisis es un soporte de electroforesis sobre el cual se han separado por migración electroforética los constituyentes de una o varias 35 muestras biológicas.

43. Procedimiento según la reivindicación 42, en el que el o los reactivos están destinados a permitir una reacción de inmunofijación de los constituyentes de las muestras biológicas separados por electroforesis.

44. Procedimiento según la reivindicación 43, en el que uno de los reactivos es un fijador que permite fijar todos los constituyentes separados de las muestras biológicas por electroforesis.

45. Procedimiento según una de las reivindicaciones 43 o 44, en el que la reacción de inmunofijación incluye una etapa de revelado de los constituyentes de las muestras biológicas inmunofijadas. 45

46. Procedimiento según la reivindicación 36, en el que el fijador se carga a nivel de la o de las pistas apropiadas de la máscara, después se deposita y se extiende sobre la o las zonas determinadas del soporte de electroforesis tras la extensión controlada del o de los reactivos sobre el soporte de análisis a nivel de zonas delimitadas de dicho soporte, extendiéndose el fijador y los reactivos en una cantidad suficiente para permitir su reacción con los 50 constituyentes de las muestras biológicas presentes sobre dicho soporte de análisis.

47. Procedimiento según cualquiera de las reivindicaciones 36 a 46, en el que la cantidad de reactivo cargada sobre cada pista de la máscara es igual a o está comprendida entre 4 y 15 μl/pista.

48. Procedimiento según cualquiera de las reivindicaciones 36 a 47, en el que la máscara destinada a disponer y extender los reactivos es tal que la cantidad de reactivo cargada a nivel de cada una de sus pistas está en exceso con respecto a la cantidad de este reactivo extendida sobre la zona de incubación del soporte de electroforesis durante un desplazamiento de la máscara de la posición anódica a la posición catódica del soporte de electroforesis correspondiente al cátodo.

49. Kit, que comprende

- por lo menos una máscara según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 32,

-por lo menos un soporte de análisis. 65

50. Kit según la reivindicación 49, que comprende además

-reactivos para la inmunofijación de los constituyentes de las muestras separados por electroforesis,

-un fijador para la fijación para cada muestra del conjunto de los constituyentes separados por electroforesis.

51. Máscara según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 32 o kit según cualquiera de las reivindicaciones 49 o 50, en el que los reactivos se cargan en la máscara y están en forma liofilizada.


 

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