Importina 9 como biomarcador para la esquizofrenia.

El uso in vitro de importina 9, como un biomarcador para la esquizofrenia, o la predisposición a ella.

Importina 9 como biomarcador para la esquizofrenia Campo de la invención La presente invención se refiere a un método para diagnosticar o monitorizar la esquizofrenia o una predisposición a ella.

Antecedentes de la invención La esquizofrenia es una enfermedad neuropsiquiátrica polifacética con una aparición y etiología impulsadas por una compleja interacción de factores genéticos, de desarrollo, nutricionales y ambientales. Afecta al menos al 1% de la población mundial y cuesta cientos de miles de millones de dólares en atención sanitaria e ingresos perdidos.

El diagnóstico actual de la esquizofrenia y otros trastornos psicóticos es subjetivo, debido al amplio espectro de síntomas, su superposición con otros trastornos y la falta de ensayos empíricos específicos de la enfermedad. Una mayor comprensión de las vías moleculares afectadas sería un paso importante hacia la mejora de las pruebas diagnósticas, el desarrollo de nuevos tratamientos pre-sintomáticos y la evaluación de la eficacia de intervenciones preventivas.

El documento WO 2008/090319 describe un método de diagnóstico o monitorización de un trastorno psicótico o la predisposición a él, que comprende medir, en una muestra tomada de un sujeto, el nivel de un biomarcador seleccionado de precursor de clusterina, inhibidor de la inter-α-tripsina, IgM, apolipoproteína A2 y glicoproteína alfa-2-HS. El documento WO 2008/107700 describe el uso de un biomarcador peptídico que es una α-defensina, o uno de sus fragmentos, como un biomarcador para la esquizofrenia o un trastorno depresivo importante, o para la predisposición a ellos.

Sumario de la invención Utilizando una plataforma de proteómica global basada en tecnología nano-LC-MS/MS mono- y bi-dimensional se han identificado biomarcadores proteínicos de enfermedades para la esquizofrenia. Se realizaron dos estudios, utilizando muestras de suero tomadas de pacientes en los que se había detectado por primera vez la esquizofrenia y que no habían recibido tratamiento con fármacos y controles sanos.

De acuerdo con un primer aspecto, la presente invención comprende el uso in vitro de importina 9 como un biomarcador para la esquizofrenia, o para la predisposición a ella. En una realización, la invención comprende adicionalmente el uso de uno o más péptidos adicionales seleccionados de NALP8, proteína S dependiente de la vitamina K, alfa-1-antiquimotripsina, lumican, helicasa, relacionado con haptoglobina, miembro 1B de la familia C similar a ANKRD26, proteína 2B que contiene el dominio AAA de la familia de la ATPasa, proteína C9ºrf93 no caracterizada, globulina de unión a tiroxina, miembro A1 de la familia que contiene el dominio mano EF, semialdehído sintasa alfaaminoadípica mitocondrial, 1-fosfatidilinositol-4, 5-bifosfato fosfodiesterasa gamma-1, carboxipeptidasa 2 citosólica, alfa-1-antiquimotripsina, proteína FLJ36157 no caracterizada, atractina, rootletin, componente 7 del complemento, afamina, proteína similar a la quinesina, poli[ADP-ribosa]polimerasa 1 (PARP1) , región de la cadena C de Ig gamma1, paraoxonasa/arilesterasa 1 sérica, cadena H2 pesada del inhibidor de inter-alfa-tripsina, cadena H4 pesada del inhibidor de inter-alfa-tripsina, apolipoproteína C-III, proteína de zona del embarazo, cofactor 2 de la heparina, subcomponente C1r del complemento, como un biomarcador para la esquizofrenia o para la predisposición a ella.

En una realización, la invención comprende adicionalmente el uso de uno o más péptidos adicionales seleccionados de proteína ligasa E3 de ubiquitina LRSAM1, Ig mu, factor 13 de coagulación, apolipoproteína C1, apolipoproteína D, serina/treonina-proteína quinasa, miembro 6 de la subfamilia B del casete de unión a ATP mitocondrial, proteína ligasa E3 de ubiquitina, haptoglobina, proteína 2 que contiene el dominio AAA de la familia de la ATPasa, cadena beta de espectrina eritrocítica, proteína de la matriz oligomérica del cartílago, proteína C de unión a manosa, integrina beta-3, proteína 2 asociada a microtúbulos, catepsina L2, factor B del complemento, componente 5 del complemento, vitronectina, proteína S, clusterina (ApoJ) , proteína 2 de unión a hialuronano y DNA-topoisomerasa 2-alfa, como un biomarcador para la esquizofrenia o para la predisposición a ella.

De acuerdo con un aspecto adicional, la presente invención es un método para diagnosticar o monitorizar la esquizofrenia, o la predisposición a ella, que comprende detectar y/o cuantificar, en una muestra de un sujeto de ensayo, uno o más de los biomarcadores peptídicos enumerados anteriormente.

De acuerdo con un aspecto adicional, la presente invención es un método de monitorización de la eficacia de una terapia en un sujeto que tiene, se sospecha que tiene o está predispuesto, a esquizofrenia, que comprende detectar y/o cuantificar, en una muestra de dicho sujeto, uno o más de los biomarcadores peptídicos enumerados anteriormente.

Un aspecto adicional de la invención proporciona ligandos, tales como compuestos de origen natural o sintetizados químicamente, capaces de unirse específicamente al biomarcador peptídico. Un ligando de acuerdo con la invención

puede comprender un péptido, un anticuerpo o uno de sus fragmentos, o un aptámero u oligonucleótido, capaz de unirse específicamente al biomarcador peptídico. El anticuerpo puede ser un anticuerpo monoclonal, o uno de sus fragmentos, capaz de unirse específicamente al biomarcador peptídico. Un ligando de acuerdo con la invención se puede marcar con un marcador detectable, tal como un marcador luminiscente, fluorescente o radiactivo; alternativa o adicionalmente un ligando de acuerdo con la invención se puede marcar con una etiqueta de afinidad, por ejemplo, una etiqueta de biotina, avidina, estreptavidina o His (por ejemplo, hexa-His) .

Un biosensor según la invención puede comprender el biomarcador peptídico o uno de sus compuestos miméticos estructurales/conformacionales capaces de unirse específicamente a un anticuerpo contra el biomarcador peptídico. También se proporciona una matriz que comprende un ligando o compuesto mimético como se describe en la presente memoria.

La invención proporciona también el uso de uno o más ligandos como se describen en la presente memoria, que pueden ser de origen natural o sintetizados químicamente, y son adecuadamente un péptido, un anticuerpo o uno de sus fragmentos, un aptámero u oligonucleótido, o el uso de un biosensor de la invención, o una matriz de la invención, o un kit de la invención para detectar y/o cuantificar el péptido. En estos usos, la detección y/o cuantificación se pueden realizar en una muestra biológica, tal como del grupo que consiste en líquido cefalorraquídeo (LCR) , sangre completa, suero sanguíneo, plasma, orina, saliva u otro fluido corporal, aliento, por ejemplo, aliento condensado o uno de sus extractos o purificaciones o diluciones.

Se proporcionan kits de diagnóstico o de monitorización para realizar los métodos de la invención. Dichos kits comprenden adecuadamente un ligando de acuerdo con la invención, para la detección y/o cuantificación del biomarcador peptídico y/o un biosensor y/o una matriz como se describen en la presente memoria, opcionalmente junto con instrucciones para el uso del kit.

Un aspecto adicional de la invención es el uso de un kit para monitorizar o diagnosticar la esquizofrenia, en el que dicho kit comprende un biosensor que detecta y/o cuantifica el biomarcador como se describe en la presente memoria, en el que dicho biosensor comprende un ligando capaz de unirse específicamente al biomarcador como se describe en la presente memoria.

Los biomarcadores para la esquizofrenia u otros trastornos psicóticos son dianas esenciales para el descubrimiento de nuevas dianas y moléculas de fármacos que retardan o detienen la progresión del trastorno. Puesto que el nivel del biomarcador peptídico es indicativo del trastorno y de la respuesta al fármaco, el biomarcador es útil para la identificación de nuevos compuestos terapéuticos en ensayos in vitro y/o in vivo. Los biomarcadores de la invención se pueden emplear en métodos para el cribado de compuestos que modulen la actividad del péptido.

Por lo tanto, en un aspecto adicional de la invención, se proporciona el uso de un ligando, tal como se ha descrito, que puede ser un péptido, un anticuerpo o uno de sus fragmentos, o un aptámero u oligonucleótido de acuerdo con la invención; o el uso de un biosensor de acuerdo con la invención o una matriz de acuerdo con la invención; o un kit de acuerdo con la invención, para identificar una sustancia capaz de promover y/o suprimir la generación del biomarcador.

También se proporciona un método... [Seguir leyendo]

1. El uso in vitro de importina 9, como un biomarcador para la esquizofrenia, o la predisposición a ella.

2. El uso in vitro de acuerdo con la reivindicación 1, que comprende adicionalmente el uso de uno o más péptidos adicionales seleccionados de NALP8, proteína S dependiente de la vitamina K, alfa-1-antiquimotripsina, lumican, helicasa, relacionado con haptoglobina, miembro 1B de la familia C similar a ANKRD26, proteína 2B que contiene el dominio AAA de la familia de ATPasa, proteína C9ºrf93 no caracterizada, globulina de unión a tiroxina, miembro A1 de la familia que contiene el dominio mano EF, semialdehído sintasa alfa-aminoadípica mitocondrial, 1fosfatidilinositol-4, 5-bifosfato fosfodiesterasa gamma-1, carboxipeptidasa 2 citosólica, proteína FLJ36157 no caracterizada, atractina, rootletin, componente 7 del complemento, afamina, proteína similar a la quinesina, poli[ADP-ribosa] polimerasa 1 (PARP1) , región de la cadena C de Ig gamma-1, paraoxonasa/arilesterasa 1 sérica, cadena H2 pesada del inhibidor de inter-alfa-tripsina, cadena H4 pesada del inhibidor de inter-alfa-tripsina, apolipoproteína C-III, proteína de zona del embarazo, cofactor 2 de la heparina y subcomponente C1r del complemento, como un biomarcador para la esquizofrenia o para la predisposición a ella.

3. El uso in vitro de acuerdo con la reivindicación 1 o la reivindicación 2, que comprende además el uso de uno o más péptidos adicionales seleccionados de proteína ligasa E3 de ubiquitina LRSAM1, IgMu, factor 13 de coagulación, apolipoproteína C1, apolipoproteína D, serina/treonina-proteína quinasa, miembro 6 de la subfamilia B del casete de unión a ATP mitocondrial, proteína ligasa E3 de ubiquitina, haptoglobina, proteína 2 que contiene el dominio AAA de la familia de ATPasa, cadena beta de espectrina eritrocítica, proteína de la matriz oligomérica del cartílago, proteína C de unión a manosa, integrina beta-3, proteína 2 asociada a microtúbulos, catepsina L2, factor B del complemento, componente 5 del complemento, vitronectina; proteína S, clusterina (ApoJ) , proteína 2 de unión a hialuronano y DNA-topoisomerasa 2-alfa, como un biomarcador para la esquizofrenia o para la predisposición a ella.

4. Un método para diagnosticar o monitorizar la esquizofrenia, o la predisposición a ella, que comprende detectar y/o cuantificar, en una muestra de un sujeto de ensayo, el biomarcador citado en la reivindicación 1.

5. Un método de acuerdo con la reivindicación 4, que comprende además detectar y/o cuantificar, en una muestra de un sujeto de ensayo, uno o más de los biomarcadores peptídicos adicionales de la lista de la reivindicación 2 o la reivindicación 3.

6. Un método de monitorizar la eficacia de una terapia en un sujeto que tiene, que se sospecha que tiene, o que está predispuesto a la esquizofrenia, que comprende detectar y/o cuantificar, en una muestra de dicho sujeto, el biomarcador citado en la reivindicación 1.

7. Un método de acuerdo con la reivindicación 6, que comprende además detectar y/o cuantificar, en una muestra de dicho sujeto, uno o más de los biomarcadores peptídicos adicionales de las listas de la reivindicación 2 o la reivindicación 3.

8. Un método de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 4 a 7, que se lleva a cabo sobre muestras tomadas en dos o más ocasiones de un sujeto de ensayo.

9. Un método de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 4 a 8, que comprende además comparar el nivel del biomarcador presente en muestras tomadas en dos o más ocasiones.

10. Un método de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 4 a 9, que comprende comparar la cantidad del biomarcador en dicha muestra de ensayo con la cantidad presente en una o más muestras tomadas de dicho sujeto antes del comienzo de la terapia y/o una o más muestras tomadas de dicho sujeto en una fase anterior de la terapia.

11. Un método de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 4 a 10, que comprende además detectar un cambio en la cantidad del biomarcador en muestras tomadas en dos o más ocasiones.

12. Un método de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 4 a 11, que comprende comparar la cantidad del biomarcador presente en dicha muestra de ensayo con uno o más controles.

13. Un método de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 4 a 12, en el que las muestras se toman antes y/o durante y/o después de la terapia para la esquizofrenia.

14. Un método de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 4 a 13, en el que la muestra biológica es líquido cefalorraquídeo, sangre completa, suero sanguíneo, plasma, orina, saliva, u otro líquido corporal, o aliento, aliento condensado, o uno de sus extractos o una de sus purificaciones o diluciones.

15. El uso de un kit para monitorizar o diagnosticar la esquizofrenia, en el que dicho kit comprende un biosensor que detecta y/o cuantifica el biomarcador citado en la reivindicación 1, en el que dicho biosensor comprende un ligando capaz de unirse específicamente al biomarcador citado en la reivindicación 1.