Formulación estabilizadora para composiciones de inmunoglobulina G en forma líquida y en forma liofilizada.

Formulación estabilizadora para una composición de inmunoglobulina G policlonal,

caracterizada porque estáconstituida por un azúcar alcohólico, la glicina, con una concentración comprendida entre 7 g/l y 10 g/l y undetergente no iónico con una concentración comprendida entre 20 y 50 ppm, para ser de este modo adecuada parala estabilización de composiciones de inmunoglobulina G policlonal en forma líquida y para la estabilización decomposiciones de inmunoglobulina G policlonal en forma liofilizada.

Formulación estabilizadora para composiciones de inmunoglobulina G en forma líquida y en forma liofilizada La invención se refiere a una formulación estabilizadora, farmacéuticamente aceptable, para la estabilización y la conservación de composiciones de inmunoglobulina G (IgG) bien en forma líquida, o bien en forma liofilizada.

Actualmente, se tratan numerosas patologías, por ejemplo de origen autoinmune, mediante concentrados de IgG, lo que ha generado una situación de escasez en Europa y en los Estados Unidos de América a lo largo de estos últimos años.

Por ello, existe la necesidad cada vez mayor de producir concentrados de IgG, habitualmente acondicionados en pH ácidos e inyectables por vía intravenosa, a partir, por ejemplo de plasma humano. Con el crecimiento de estas necesidades de IgG, la estabilización de estos concentrados de IgG inyectables por vía intravenosa (IgGIV) para su uso terapéutico y para su conservación bien en forma líquida, o bien en forma liofilizada, reviste una importancia fundamental.

Para ello, se sabe que es necesario estabilizar las IgGIV para evitar, en particular, la formación de agregados (oligómeros y polímeros) susceptibles de activar el sistema de complemento con los riesgos asociados de reacciones anafilácticas. Por otra parte, la presencia de dímeros en las IgGIV se ha correlacionado con bajadas de presión arterial in vivo (Bleeker, W. K. y otros, Blood, 95, 2000, págs. 1.856-1.861) . También pueden producirse otras degradaciones fisicoquímicas durante la conservación de las IgG como, entre otras, la oxidación y la hidrólisis.

La estabilización de las formas liofilizadas o líquidas de las IgG precisa, por lo tanto, la adición de compuestos, tradicionalmente seleccionados entre los azúcares y los ácidos aminados, con el fin de obtener no solo unas composiciones de IgG no degradas adecuadas a un uso terapéutico, sino también unas composiciones de IgG que presentan una estabilidad incrementada en almacenamiento.

La estabilización de las formas liofilizadas de composiciones proteínicas y, en particular, de IgG, mediante la adición de estabilizadores específicos, ha sido objeto de muy numerosos estudios. Los que se citan en las publicaciones científicas de M. Pikal, "Freeze-Dr y ing of Proteins, Part 2: Formulation Selection", Biopharm, 3 (9) , págs. 26-30 (1990) y de Arakawa y otros, Pharm. Res., 1991, 8 (3) , págs. 285-291, muestran que la adición de un excipiente en composiciones proteínicas antes de la liofilización aumenta la estabilidad durante la liofilización y/o la estabilidad del producto liofilizado durante su almacenamiento. Entre estos estabilizadores, algunos son conocidos sin embargo como agentes precipitantes de proteínas superiores a aproximadamente 100 kDa. De este modo, el uso de polietilenoglicol (PEG) 3.000-6.000 es inaceptable en la fase de congelación para la liofilización de composiciones proteínicas correspondientes. Osterberg y otros (Pharm. Res., 1997, 14 (7) , págs. 892-898) ha mostrado la eficacia de una mezcla de histidina, de sacarosa, de un tensioactivo no iónico y de cloruro de sodio para la estabilización de las formas liofilizadas del factor VIII recombinante y la adición de PEG no ha mejorado su estabilidad. Por otra parte, Guo y otros (Biomacromol., 2002, 3 (4) , págs. 846-849) precisan que la liofilización de la peroxidasa de rábano en presencia de PEG no permite conservar la estructura original de esta. La presencia de PEG no parece, por lo tanto, deseable.

Hay disponibles en el mercado composiciones de IgGIV liofilizadas, por ejemplo bajo los nombres comerciales Polygam™ (American Red Cross) , Gammar IV™ (Armour Pharmaceutical Company) y Venoglobulin™I (Alpha) que contienen como estabilizadores glucosa al 2 %, sacarosa al 5 % y D-manitol al 2 % respectivamente.

La patente US 5 945 098 describe unas composiciones de IgG estables en almacenamiento que comprende, a título de estabilizadores, uno o varios ácidos aminados, como la glicina, un detergente no iónico, polietileno glicol (PEG) (necesariamente presente en todas estas composiciones) y eventualmente otros compuestos, como la polivinilpirrolidona (PVP) , azúcares y sales.

La solicitud EP 0 196 761 describe unos compuestos que solo se pueden utilizar como estabilizadores durante la pasteurización de soluciones de IgG. Entre estos, un estabilizador principal es un azúcar (monosacárido, disacárido o azúcar alcohólico) , al que se añade un estabilizador secundario que puede ser al menos un ácido aminado neutro, una sal neutra de ácido inorgánico, una sal de ácido carboxílico y un tensioactivo.

La solicitud de patente internacional WO 97/04801 describe el efecto estabilizador de formulaciones de anticuerpos monoclonales liofilizados (de tipo inmunoglobulina G y E) que comprende unos excipientes específicos. Entre estos excipientes, la combinación glicina/manitol no se escoge por falta de eficacia frente a otras combinaciones como sacarosa/glicina y sacarosa/manitol.

No obstante, se constata que algunos estabilizadores adecuados para las formas liofilizadas de las IgGIV pueden resultar totalmente ineficaces para las composiciones de IgGIV líquidas.

Así pues, las composiciones de IgGIV líquidas, disponibles comercialmente, comprenden unos estabilizadores específicos diferentes de los que se utilizan para la forma liofilizada correspondiente. A título de ejemplo, las composiciones líquidas de IgGIV que contienen como estabilizadores maltosa al 10 %, glicina entre 0, 16 y 0, 24 M y

D-sorbitol al 5 % se conocen respectivamente bajo los nombres comerciales Gamimune N™, Gamimune N™ 10% (Miles Inc.) y Venoglobulin™ (Alpha) .

La diferente naturaleza de los compuestos utilizados para la estabilización de las composiciones de IgG en forma líquida y en forma liofilizada ha llevado a algunos autores a buscar estabilizadores o mezclas de estabilizadores idénticos que permitan conservar las composiciones de IgG en las dos formas a la vez. A este respecto, estudios recientes han tratado sobre la estabilización de composiciones de IgGIV, Vigam-S y Vigam Liquid (nombres de comerciales de National Blood Authority, Inglaterra) líquidas y tras la liofilización (Vigam-S) que comprenden una mezcla idéntica de estabilizadores, esto es la albúmina y la sacarosa (K. Chidwick y otros, Vox Sanguinis, 77, págs. 204-209, 1999) . Sin embargo, la solución Vigam Liquid se acondiciona en un pH ácido (pH 5) lo que presenta el inconveniente de transformar, por hidrólisis, la sacarosa en azúcares reductores (fructosa y glucosa) que se condensan con los residuos aminados de la lisina de las IgG y de la albúmina para dar una base de Schiff inestable que desarrolla unos productos de Maillard (empardecimiento de la solución) . Es evidente que el empleo de excipientes que evolucionan a lo largo de la conservación de las IgG no resulta satisfactorio, ya que no es posible el control de la reacción, una vez iniciada esta.

Por otra parte, algunos de los estabilizadores mencionados con anterioridad, como la maltosa o la sacarosa, no se pueden utilizar sin riesgo en aquellos sujetos que presentan insuficiencia renal y/o que padecen diabetes.

Con el fin de resolver los anteriores inconvenientes, la solicitante se ha comprometido a desarrollar una formulación estabilizadora única, farmacéuticamente aceptable, que cumple con el objetivo de garantizar la estabilización de las dos formas de conservación consideradas de las IgG a la vez y conservar, e incluso mejorar, la eficacia terapéutica de estas IgG.

Esta formulación estabilizadora presenta, en particular, la ventaja de precisar la aplicación de una única formulación lo que facilita el control de las materias primas y conlleva una reducción de los costes de fabricación asociados a la simplificación de los esquemas de producción.

Para ello, partiendo del hecho de que se utilizan azúcares y ácidos aminados como estabilizadores, la solicitante ha mostrado, sobre la base de ensayos preliminares, que algunos de estos aportaban a las composiciones de IgG líquidas unas propiedades protectoras frente a las desnaturalizaciones térmica y por agitación provocadas, pero con unos resultados variables según la naturaleza del azúcar y del ácido aminado seleccionados, y que, además, los efectos estabilizadores de una mezcla, por ejemplo de dos componentes, no se podrían inferir del efecto estabilizador que se obtiene con cada componente considerado de forma individual. Además, entre los azúcares probados, algunos de estos no eran estables en pH ácidos que corresponden al medio de acondicionamiento óptimo de las composiciones de IgG líquidas.

Por otra parte, los estabilizadores escogidos tras... [Seguir leyendo]

1. Formulación estabilizadora para una composición de inmunoglobulina G policlonal, caracterizada porque está constituida por un azúcar alcohólico, la glicina, con una concentración comprendida entre 7 g/l y 10 g/l y un detergente no iónico con una concentración comprendida entre 20 y 50 ppm, para ser de este modo adecuada para la estabilización de composiciones de inmunoglobulina G policlonal en forma líquida y para la estabilización de composiciones de inmunoglobulina G policlonal en forma liofilizada.

2. Formulación de acuerdo con la reivindicación 1, caracterizada porque el azúcar alcohólico es el manitol.

3. Formulación de acuerdo con la reivindicación 2, caracterizada porque la concentración de manitol está comprendida entre 30 g/l y 50 g/l.

4. Composición de inmunoglobulina G policlonal en forma líquida que comprende, como estabilizador, la formulación estabilizadora de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3.

5. Composición de inmunoglobulina G policlonal en forma liofilizada, obtenida mediante la liofilización de una composición de inmunoglobulina G policlonal y de la formulación estabilizadora de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3.

6. Composición de inmunoglobulina G policlonal de acuerdo con la reivindicación 4, caracterizada porque presenta una tasa de polímeros inferior al 0, 3 % tras un almacenamiento de 6 meses a temperatura ambiente.

7. Composición de inmunoglobulina G policlonal de acuerdo con la reivindicación 5, caracterizada porque presenta una tasa de polímeros inferior al 0, 3 % tras un almacenamiento de 12 meses a temperatura ambiente o de 6 meses a 40 ºC.

8. Composición de inmunoglobulina G policlonal de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 4 a 7, caracterizada porque presenta una tasa de dímeros inferior al 7 % tras un almacenamiento durante un periodo de 24 meses a 4 ºC.

9. Uso de una formulación estabilizadora de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, como estabilizador de composiciones de inmunoglobulina G policlonal en forma líquida directamente obtenidas por el 25 fraccionamiento de plasma humano.

10. Uso de una formulación estabilizadora de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, para la estabilización de composiciones de inmunoglobulina G policlonal en forma liofilizada.

11. Uso de una formulación estabilizadora de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, para la

estabilización de composiciones de inmunoglobulina G policlonal en forma líquida obtenidas mediante la 30 reconstitución en un medio acuoso adecuado de composiciones de inmunoglobulina G policlonal en forma liofilizada.