Procedimiento de prevención o tratamiento de infección por M. tuberculosis.

Una composición farmacéutica que comprende una proteína de fusión Mtb72f o un fragmento inmunogénico de la misma a partir de una especie de Mycobacterium del complejo de la tuberculosis y un coadyuvante,

para su uso en la prevención o en el retraso de reactivación en un mamífero que tiene una infección de Mycobacterium tuberculosis latente.

Procedimiento de prevención o tratamiento de infección por M. tuberculosis Campo de la invención La presente invención se refiere a procedimientos de prevención o tratamiento de la reactivación de una infección por M. tuberculosis en un mamífero, y a procedimientos para reducir el curso del tiempo de la quimioterapia contra una infección por M. tuberculosis.

Antecedentes de la invención La tuberculosis es una enfermedad infecciosa crónica causada por la infección con M. tuberculosis y otras especies de Mycobacterium. Es una enfermedad mayor en los países en desarrollo, así como un problema creciente en las áreas desarrolladas del mundo, con aproximadamente 8 millones de nuevos casos y 3 millones de muertes cada año. Aunque la infección puede ser asintomática durante un período de tiempo considerable, la enfermedad se manifiesta más comúnmente como una inflamación aguda de los pulmones, dando como resultado fiebre y una tos no productora. Si no se trata, resultan típicamente serias complicaciones y la muerte.

Aunque la tuberculosis se puede controlar en general empleando terapia prolongada con antibióticos, este tratamiento no es suficiente para prevenir la propagación de la enfermedad. Los individuos infectados pueden ser asintomáticos, pero contagiosos, durante algún tiempo. Además, aunque es crítico el cumplimiento con el régimen de tratamiento, es difícil monitorear el comportamiento del paciente. Algunos pacientes no terminan el periodo de tratamiento, lo cual puede conducir a un tratamiento inefectivo y al desarrollo de resistencia a los fármacos. Inclusive cuando se termine un curso completo de tratamiento, la infección con M. tuberculosis no se erradica del individuo infectado, sino que permanece como una infección latente que se puede reactivar.

Con el objeto de controlar la extensión de la tuberculosis, es de primordial importancia una vacunación efectiva y un diagnóstico oportuno preciso de la enfermedad. En la actualidad, la vacunación con bacterias vivas es el procedimiento más eficiente para inducir una inmunidad protectora. La micobacteria más común empleada para este propósito es Bacillus Calmette-Guerin (BCG) , una cepa avirulenta de M. bovis. Sin embargo, la seguridad y eficacia de BCG es una fuente de controversia, y algunos países, tales como los Estados Unidos, no vacunan al público en general con este agente.

El diagnóstico de la tuberculosis se logra comúnmente utilizando una prueba de piel, la cual involucra la exposición intradérmica a la tuberculina PPD (derivado purificado de proteína) . Las respuestas de las células-T específicas del antígeno dan como resultado una induración en el sitio de inyección a las 48-72 horas después de la inyección, lo cual indica la exposición a los antígenos micobacterianos. Sin embargo, la sensibilidad y la especificidad han sido un problema con esta prueba, y los individuos vacunados con BCG no se pueden distinguir de los individuos infectados.

Aunque se ha demostrado que los macrófagos actúan como los efectores principales de la inmunidad a Mycobacterium, las células-T son los inductores predominantes de esta inmunidad. El papel esencial de las células-T en la protección contra la infección por Mycobacterium se ilustra por la presentación frecuente de infección por Mycobacterium en los pacientes de SIDA, debido al agotamiento de las células-T CD4+ asociado con la infección por el virus de inmunodeficiencia humana (VIH) . Se ha demostrado que las células-T CD4+ que reaccionan con Mycobacterium son potentes productores del interferón-γ (IFN-γ) , el cual, a su vez, se ha demostrado que desencadena los efectos anti-micobacterianos de los macrófagos en los ratones. Aunque está menos claro el papel del IFN-γ en los seres humanos, los estudios han demostrado que la 1, 25-dihidroxi-vitamina D3, ya sea sola o en combinación con IFN-γ o con el factor de necrosis tumoral-alfa, activa los macrófagos humanos para inhibir la infección por M. tuberculosis. Adicionalmente, se sabe que el IFN-γ estimula los macrófagos humanos para hacer la 1, 25-dihidroxi-vitamina D3. De una manera similar, se ha demostrado que la interleucina-12 (IL-12) tiene un papel en el estímulo de la resistencia a la infección por M. tuberculosis. Para una revisión de la inmunología de la infección por M. tuberculosis, véase Chan y Kaufmann, Tuberculosis: Pathogenesis, Protection and Control (Bloom, editor, 1994) , Tuberculosis (2ª edición, Rom y Garay, editores, 2003) , y Harrison's Principles of Internal Medicine, Capítulo 150, páginas 953-966 (16ª edición, Braunwald y colaboradores, editores, 2005) .

MOREIRA ANDRE L Y COLABORADORES: "Mycobacterial antigens exacerbate disease manifestations in Mycobacterium tuberculosis-infected mice" INFECTION AND IMMUNITY, vol. 70, n.º 4, abril 2012 (2002-04) , páginas 2100-2107, ISSN: 0019-9567, y TURNER JOANNE Y COLABORADORES: "Effective preexposure tuberculosis vaccines fail to protect when they are given in an immunotherapeutic mode" INFECTION AND IMMUNITY, vol. 68, nº 3, marzo 2000 (2000-03) , páginas 1706-1709, ISSN: 0019-9567 representan el tratamiento de una infección por M. tuberculosis latente usando la administración de vacunaciones BCG en un intento de prevenir la reactivación, Sigue existiendo una necesidad de estrategias de tratamiento efectivas para prevenir la reactivación de las infecciones por Mycobacterium tuberculosis, de las infecciones tanto activas como latentes. Esta invención satisface esta y otras necesidades.

Descripción de las secuencias enlistadas

Breve descripción de la invención La presente invención proporciona composiciones farmacéuticas que comprenden una proteína de fusión Mtb72f o un fragmento inmunogénico de la misma, a partir de una especie de Mycobacterium del complejo de tuberculosis, por ejemplo, junto con uno o más adyuvantes, incluyendo AS01B y AS02A.

La presente invención se basa, en parte, en el descubrimiento de los inventores de que, la administración de una proteína de fusión Mtb72f ó un fragmento inmunogénico de la misma, por ejemplo, junto con uno o más adyuvantes, o un ácido nucleico que codifique una proteína de fusión Mtb72f ó un fragmento inmunogénico de la misma, puede prevenir o tratar la reactivación de una infección por M. tuberculosis activa o inactiva. En una realización preferida, se administra una proteína de fusión Mtb72f o un ácido nucleico con uno o más agentes quimioterapéuticos efectivos contra una infección por M. tuberculosis.

En un aspecto, las composiciones se emplean en procedimientos para prevenir o tratar la reactivación de tuberculosis en un sujeto, comprendiendo el procedimiento el paso de administrar a un mamífero ya infectado con Mycobacterium tuberculosis, una cantidad inmunológicamente efectiva de una composición farmacéutica que comprenda una proteína de fusión Mtb72f o un fragmento inmunogénico de la misma, a partir de una especie de Mycobacterium del complejo de tuberculosis, y un adyuvante, en donde la proteína de fusión Mtb72f induzca una respuesta inmune contra Mycobacterium tuberculosis, previniendo o tratando de esta manera la reactivación de tuberculosis.

En otro aspecto, las composiciones se emplean en procedimientos para prevenir la reactivación de tuberculosis en un sujeto, comprendiendo el procedimiento el paso de administrar a un mamífero ya infectado con Mycobacterium tuberculosis, una cantidad inmunológicamente efectiva de una composición farmacéutica que comprende un ácido nucleico que codifica una proteína de fusión Mtb72f o un fragmento inmunogénico de la misma, a partir de una especie de Mycobacterium del complejo de tuberculosis, en donde la proteína de fusión Mtb72f expresada induce una respuesta inmune contra Mycobacterium tuberculosis, previniendo o tratando de esta manera la reactivación de tuberculosis.

En otro aspecto, las composiciones se emplean en procedimientos para reducir el tiempo de la quimioterapia contra una infección por M. tuberculosis, comprendiendo el procedimiento administrar a un mamífero ya infectado con Mycobacterium tuberculosis, uno o más agentes quimioterapéuticos efectivos contra una infección... [Seguir leyendo]

1. Una composición farmacéutica que comprende una proteína de fusión Mtb72f o un fragmento inmunogénico de la misma a partir de una especie de Mycobacterium del complejo de la tuberculosis y un coadyuvante, para su uso en la prevención o en el retraso de reactivación en un mamífero que tiene una infección de Mycobacterium tuberculosis latente.

2. La composición farmacéutica de la reivindicación 1, en la que el mamífero está infectado con una cepa resistente a múltiples fármacos de M. tuberculosis.

3. La composición farmacéutica de bien la reivindicación 1 o bien la reivindicación 2, en la que el mamífero se inmunizó previamente con Bacillus Calmette-Guerin (BCG) .

4. La composición farmacéutica de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en la que la proteína de fusión Mtb72f es de Mycobacterium tuberculosis.

5. La composición farmacéutica de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en la que la proteína de fusión Mtb72f es un polipéptido que comprende residuos 8-729 de la SEQ ID N.º: 2.

6. La composición farmacéutica de la reivindicación 5, en la que la proteína de fusión Mtb72f es un polipéptido constituido por residuos 1 y 8-729 de la SEQ ID N.º: 2 opcionalmente con una marca His insertada tras el residuo Met inicial.

7. La composición farmacéutica de la reivindicación 5, en la que la proteína de fusión Mtb72f es el polipéptido de la SEQ ID N.º: 2.

8. La composición farmacéutica de la reivindicación 5, en la que la proteína de fusión Mtb72f es el polipéptido de la SEQ ID N.º: 6.

9. La composición farmacéutica de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, en la que la proteína de fusión Mtb72f es un polipéptido que comprende residuos 4-725 de la SEQ ID N.º: 4.

10. La composición farmacéutica de la reivindicación 9, en la que la proteína de fusión Mtb72f es un polipéptido que consiste en residuos 1 y 4-725 de la SEQ ID N.º: 4 opcionalmente con una marca His insertada tras el residuo Met inicial.

11. La composición farmacéutica de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10, en la que el mamífero es un ser humano.

12. La composición farmacéutica de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11, en la que el coadyuvante está seleccionado del grupo que consiste e.

3. MPL y QS21 en una formulación de liposomas .

3. MPL y QS21 en una emulsión de agua en aceite.

13. La composición farmacéutica de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12, para su uso en conjunción con uno o más agentes quimioterapéuticos efectivos para tratar una infección de M. tuberculosis.

14. La composición farmacéutica de la reivindicación 13, en la que los uno o más agentes quimioterapéuticos están seleccionados de isocianida y rifampicina.

15. La composición farmacéutica de la reivindicación 13, en la que al mamífero se le administran primero los uno o más agentes quimioterapéuticos durante un periodo de tiempo y después se le administra la composición.

16. La composición farmacéutica de la reivindicación 13, en la que al mamífero se le administra primero la composición y después se le administran los uno o más agentes quimioterapéuticos durante un periodo de tiempo.

17. La composición farmacéutica de la reivindicación 13, en la que la administración de los uno o más agentes quimioterapéuticos y la composición se inician al mismo tiempo.

18. Una composición farmacéutica que comprende un ácido nucleico que codifica una proteína de fusión Mtb72f o un fragmento inmunogénico de la misma a partir de una especie de Mycobacterium del complejo de la tuberculosis para su uso en la prevención o retraso de reactivación en un mamífero que tiene una infección de Mycobacterium tuberculosis latente.

19. La composición farmacéutica de la reivindicación 18, en la que el ácido nucleico es SEC ID N.º: 1.

20. La composición farmacéutica de la reivindicación 18, en la que el ácido nucleico comprende nucleótidos 632222 de la SEQ ID N.º: 1.

21. La composición farmacéutica de la reivindicación 18, en la que el ácido nucleico comprende nucleótidos 102175 de la SEQ ID N.º: 1.

22. La composición farmacéutica de la reivindicación 18, en la que el ácido nucleico comprende un nucleótido que codifica un polipéptido que comprende residuos 4-725 de la SEQ ID N.º: 4.

23. La composición farmacéutica de una cualquiera de las reivindicaciones 18 a 22, en la que el ácido nucleico se proporciona en un vector de adenovirus.

24. La composición farmacéutica de una cualquiera de las reivindicaciones 18 a 22, en la que el ácido nucleico se proporciona en un vector de célula huésped de Mycobacterium o Bacillus mutante.