Nuevo uso de la proteína factor antisecretor.

Uso de una proteína factor antisecretor (SEQ ID NO: 2); o uno de sus oligo- o poli-péptidos o derivados,

quecomprende una secuencia de aminoácidos de Fórmula I:

X1-V-C-X2-X3-K-X4-R-X5 (Fórmula I)

en donde

X1 es I, los aminoácidos nº 1-35 de la SEQ ID NO: 2, o está ausente

X2 es H, R o K

X3 es S o L

X4 es T o A

X5 es los aminoácidos nº 43-46, 43-51, 43-80 o 43-163 de la SEQ ID NO: 2, o está ausente,o una de sus sales farmacéuticamente aceptables, en la fabricación de un medicamento para el tratamiento y/oprevención de pérdida de tejido neural en un estado que está asociado a, o caracterizado por, una pérdidapatológica of células en el sistema nervioso periférico, el sistema nervioso autónomo y/o el sistema nervioso central.

Nuevo uso de la proteína factor antisecretor Campo de la invención La presente invención se refiere al uso de péptidos, polipéptidos y proteínas, que comprenden ciertos elementos de una proteína denominada factor antisecretor (FA) en la fabricación de un medicamento para tratar y/o prevenir la pérdida de tejidos neurales en un estado que se caracteriza por, o que está asociado a, una pérdida patológica de células en el sistema nervioso periférico (SNP) , el sistema nervioso autónomo (SNA) y/o el sistema nervioso central (SNC) o por la hiperprodución o tasa de degradación anómala de las proteínas expresadas en las células, tal como la degeneración patológica o pérdida del control de la reparación, recuperación y/o regeneración de células y/o tejidos diferenciados, incluyendo células madre o células progenitoras o estados médicos caracterizados por, o asociados a, dichos estados incluyendo daño en el cerebro y otras partes del sistema nervioso por trauma, asfixia, toxinas, hipoxia, isquemia, infecciones o lesiones degenerativas o metabólicas, que dan como resultado estructuras y funciones defectuosas, dificultadas o de otro modo anómalas. Se refiere especialmente al nuevo uso una proteína denominada factor antisecretor o uno de sus oligo-o poli-péptidos o derivados, al nuevo uso de un alimento que induce una proteína factor antisecretor (Ref. 15) y al nuevo uso de yema de huevo con un alto contenido de la proteína factor antisecretor.

Además la presente invención se refiere a un método in vitro para la propagación, inducción, reducción y/o mantenimiento de la génesis de una célula madre aislada.

Fundamento de la invención Las lesiones degenerativas o metabólicas, por traumas, asfixia, hipoxia, isquemia, tóxicos o agentes infecciosos, del sistema nervioso central (SNC) , el sistema nervioso periférico (SNP) o el sistema nervioso autónomo (SNA) frecuentemente dan como resultado daños en diferentes tipos de células. Ejemplos de un estado degenerativo del SNC son las enfermedades de Parkinson y Alzheimer, cualquiera de las cuales causa frecuentemente la pérdida de poblaciones especificas de células. La primera de ellas está en particular asociada con la pérdida específica de neuronas dopaminérgicas en la substancia nigra. Similarmente, la esclerosis múltiple está asociada a la pérdida afección estructural y funcional de axones, así como a la pérdida de mielina y oligodendrocitos. Otra ilustración de un trastorno degenerativo causado por una pérdida de neuronas es la enfermedad de Alzheimer. Adicionalmente, hay muchos casos en los cuales las lesiones o enfermedades de los SNC, SNP y SNA están asociadas a daños de oligodendroglías, astroglías, células satélites, células de Schwann, microglicitos, células vasculares y neuronas En general, el reemplazamiento de neuronas y neurogliocitos diferenciadas después de su degeneración o daño no es una característica del cerebro humano adulto. Por tanto, la pérdida neuronal se considera por lo general permanente. Sin embargo, debe insistirse en que la recuperación en enfermedades, tumores cerebrales y neurotraumas es debido principalmente a la reparación y reconstrucción de las células supervivientes. Sin embargo, la neurogénesis postnatal persiste bien en la edad adulta en todas las especies de mamíferos, incluyendo los seres humanos, en la zona sub-ventricular (SVZ) en los ventrículos laterales del cerebro, así como en la zona sub-granular (SGZ) en la circunvolución dentada del hipocampo (Ref. 2, 3, 4) . Adicionalmente, hay una formación menos extensa de células progenitoras neurales en la médula espinal y en el SNA. Ha de insistirse en que las células vasculares, los microgliocitos y los macrófagos, así como las células del tejido conjuntivo pueden ser reconstruidas y reformadas en las lesiones y enfermedades de los tejidos nerviosos.

En el cerebro existe una población de células omnipotentes, denominadas células progenitoras, al igual que en otros tejidos del cuerpo de mamíferos adultos, incluyendo los seres humanos. Las células progenitoras neuronales son células madre y residen en la zona sub-ventricular (ZSV) en los ventrículos laterales del cerebro y en la zona subgranular (ZSG) de la circunvolución dentada del hipocampo, en donde dichas células proliferan continuamente, y migran a las estructuras cerebrales adyacentes, y finalmente se degeneran o sobreviven y se diferencian. Las neuronas de los recién nacidos preferentemente de, por ejemplo, la SGZ migran a la capa de células granulares del hipocampo y finalmente expresan marcadores de neuronas diferenciadas y tienen características morfológicas correspondientes a células granulares diferenciadas, establecen procesos axonales en la vía de la fibra musgosa y forman conexiones sinápticas con sus dianas en el hipocampo (Ref. 5) . Debe insistirse en que una proporción considerable de tales células recientemente formadas pueden degenerarse si no son estimuladas adecuadamente, mientras que otras adquieren características de neurogliocitos (Ref. 3, 4, 5) .

La neurogénesis en la circunvolución dentada es por sí misma especialmente intrigante puesto que el hipocampo está íntimamente asociado con el aprendizaje espacial y la memoria (Ref. 6) . La neurogénesis en la SVZ es vía la corriente migratoria rostral que suministra al lóbulo olfativo nuevas células nerviosas, pero, por ejemplo, en ictus y neurotraumas las células progenitoras neuronales primitivas migrantes pueden desviarse al sitio lesionado o enfermo, si se encuentra situado en una proximidad razonable a las células precursoras migrantes.

La proliferación de células progenitoras en la SVZ y en la SGZ está influenciada, por ejemplo, por la administración de factores de crecimiento, interleuquinas, antagonistas del receptor del N-metil-d-aspartato (NMDA) o por la extirpación de las glándulas suprarrenales, que más tarde da como resultado niveles reducidos de hormonas corticosteroides o la ausencia de dichas hormonas (Ref. 7, 8) . Adicionalmente, la exposición a un ambiente enriquecido va acompañada por un mayor número de células granulares recientemente formadas supervivientes, así como por un aumento del número total de neuronas supervivientes, por ejemplo, en la circunvolución dentada (Ref. 9) . La formación de nuevas células nerviosas disminuye con la edad (Ref. 3) .

Es beneficioso disminuir la reacción inflamatoria en un tejido nervioso después de una lesión o enfermedad y da como resultado un aumento del número de neuronas, formación mejorada y prolongada de sinapsis y astrocitosis reducida, simultáneamente con menos efectos dificultantes en los vasos sanguíneos y estructuras asociadas y por tanto en la circulación. Una inflamación débil a moderada es beneficiosa con respecto a la reparación y a los eventos de restauración, así como a la neurogénesis, mientras que una inflamación fuerte es perjudicial y puede dar como resultado una pérdida acentuada de células y tejidos, que de otro modo podrían haberse recuperado.

La proteína factor antisecretor (FA) es una proteína natural del organismo. El conocimiento usual del factor antisecretor está resumido por Lange & Lönnroth (Ref. 1.) . Su estructura y algunos efectos ejercidos por el FA en el cuerpo de animales, incluyendo el hombre, están descritos en la solicitud de patente Nº WO97/08202 (Ref. 10) . La proteína FA humana es una proteína de 41 kD, cuando está aislada de la glándula pituitaria, comprendiendo 382 aminoácidos.

El sitio activo respecto a los efectos anti-inflamatorios y anti-secretores de los FA está aparentemente localizado en la proteína en una región próxima a las partes N-terminales del FA, localizada en los nº 1-163, o más preferiblemente 36-52 o 36-44, o sus modificaciones.

Estudios recientes realizados por los autores de la presente invención, han descrito que los FA son en cierto modo homólogos a la proteína S5a, también denominada Rpn 10, que constituye una subunidad de un constituyente que prevalece en todas las células, el proteosoma 26 S, más específicamente en el cap (sitio del DNA molde donde empieza la transcripción) 19 S/PA 700. Los proteasomas tienen una multitud de funciones relacionadas con la degradación de proteínas excedentes, así como de proteínas de vida corta, no deseadas, desnaturalizadas, anómalamente plegadas y de otro modo anómalas. Además, el FA/S5a/Rpn10 está implicado en la distribución y transporte de constituyentes celulares, más evidentemente proteínas.

Davidson y Hickey (Ref. 11, 12) explican en dos artículos publicados en 2004 en revistas científicas internacionales, que han generado... [Seguir leyendo]

1. Uso de una proteína factor antisecretor (SEQ ID NO: 2) ; o uno de sus oligo-o poli-péptidos o derivados, que comprende una secuencia de aminoácidos de Fórmula I:

X1-V-C-X2-X3-K-X4-R-X5 (Fórmula I)

en donde X1 es I, los aminoácidos nº 1-35 de la SEQ ID NO: 2, o está ausente X2 es H, R o K X3 es S o L X4 es T o A X5 es los aminoácidos n.

4. 46.

4. 51.

4. 80 .

4. 163 de la SEQ ID NO: 2, o está ausente, o una de sus sales farmacéuticamente aceptables, en la fabricación de un medicamento para el tratamiento y/o prevención de pérdida de tejido neural en un estado que está asociado a, o caracterizado por, una pérdida patológica of células en el sistema nervioso periférico, el sistema nervioso autónomo y/o el sistema nervioso central.

2. Uso de acuerdo con la reivindicación 1, en donde el estado se selecciona del grupo que consiste en esclerosis múltiple, asfixia, lesión por hipoxia, lesión por isquemia, lesión traumática, enfermedad de Parkinson, enfermedad de Alzheimer, ictus y trastornos desmielinizante.

3. Uso de acuerdo con la reivindicación 1, en donde la causa del estado se selecciona del grupo que consiste en daño al sistema nervioso central, un defecto en el sistema nervioso central, un trastorno traumático, maligno, auto-inmunitario o degenerativo, daño causado por conmoción, contusión, daño axonal causado por trauma en la cabeza, daño axonal causado por enfermedad de vasos pequeños en el SNC, y daño en la médula espinal después de una enfermedad.

4. Uso de acuerdo con la reivindicación 1, 2 o 3, en donde la Fórmula I tiene la secuencia elegida de una de:

a) los aminoácidos número.

3. 42 de la SEQ ID NO: 2, b) los aminoácidos número.

3. 46 de la SEQ ID NO: 2, c) los aminoácidos número.

3. 51 de la SEQ ID NO: 2, d) los aminoácidos número.

3. 80 de la SEQ ID NO: 2, e) los aminoácidos números 1-80 de la SEQ ID NO: 2, o f) los aminoácidos números 1-163 de la SEQ ID NO: 2, o una de sus sales farmacéuticamente aceptables.

5. Uso de un alimento que induce una proteína factor antisecretor en la fabricación de un alimento o alimento médico para el tratamiento y/o la prevención de pérdida de tejido neural en un estado que está asociado a, o caracterizado por, una pérdida patológica de células en el sistema nervioso periférico, el sistema nervioso autónomo y/o el sistema nervioso central.

6. Uso de una yema de huevo con al menos 1000 unidades FIL /ml de proteína factor antisecretor, en la fabricación de un medicamento, un alimento o un alimento médico para el tratamiento y/o prevención de pérdida de tejido neural en un estado que está asociado a, o caracterizado por, una pérdida patológica de células en el sistema nervioso periférico, el sistema nervioso autónomo y/o el sistema nervioso central.

7. Uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-6, en donde el estado se caracteriza por presentar una degeneración patológica, pérdida de capacidad y/o pérdida de control de regeneración y/o pérdida de control de regeneración de una célula diferenciada y/o tejido, una célula madre embrionaria, una célula madre adulta, una célula progenitora y/o una célula derivada de una célula madre o una célula madre progenitora.

8. Uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-7, en donde el estado está asociado a, caracterizado por una pérdida patológica de células madre neurales o células progenitoras neurales.

9. Uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-8, en donde el estado está asociado a, o caracterizado por una pérdida patológica de oligodendroglías, astroglías, células de Schwann y/o células neuronales y/o poblaciones celulares.

10. Uso de acuerdo con la reivindicación 9, en donde el estado está asociado a, o caracterizado por una pérdida patológica de células neuronales no colinérgicas, células neuronales colinérgicas y/o neurogliocitos, y/o poblaciones celulares.

11. Uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-10, en donde el estado es causado por daño en el sistema nervioso central o un defecto en el sistema nervioso central.

12. Uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-11, en donde el estado es causado por un trastorno traumático, auto-inmunitario o degenerativo.

13. Uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-12, en donde dicho estado se caracteriza por

pérdida de memoria.

14. Uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-4 y 7-13, en donde el medicamento se formula para infusión intravenosa, inyección intramuscular y/o inyección subcutánea.

15. Uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-4 y 7-13, en donde el medicamento se formula de modo que la sustancia activa pase a los ventrículos y/o otras cavidades del cerebro de un paciente cuando se administre a dicho paciente.

16. Uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1-4 y 7-13, en donde el medicamento se formula que la sustancia activa pase al líquido cefalorraquídeo de un paciente cuando se administre a dicho paciente.

17. Un método in vitro para la propagación, inducción, reducción y/o el mantenimiento de la génesis de una célula madre aislada y/o la progenie de cualquier capa germinal, caracterizado por tratar la célula aislada con una proteína factor antisecretor (SEQ ID NO: 2) ; o uno de sus oligo-o poli-péptidos, o derivados que comprende una secuencia de aminoácidd Fórmula I:

X1-V-C-X2-X3-K-X4-R-X5 (Fórmula I)

en donde X1 es I, los aminoácidos nº 1-35 de la SEQ ID NO: 2, o está ausente X2 es H, R o K X3 es S o L X4 es T o A X5 es los aminoácidos n.

4. 46.

4. 51.

4. 80 .

4. 163 de la SEQ ID NO:2, o está ausente, o una de sus sales farmacéuticamente aceptables.

18. Un método in vitro de acuerdo con la reivindicación 17, en donde la Fórmula I tiene una secuencia elegida de una de:

a) los aminoácidos número.

3. 42 de la SEQ ID NO: 2, b) los aminoácidos número.

3. 46 de la SEQ ID NO: 2, c) los aminoácidos número.

3. 51 de la SEQ ID NO: 2, d) los aminoácidos número.

3. 80 de la SEQ ID NO: 2, e) los aminoácidos números 1-80 de la SEQ ID NO: 2, o f) los aminoácidos números 1-163 de la SEQ ID NO: 2, o una de sus sales farmacéuticamente aceptables.

19. Un método in vitro de acuerdo con la reivindicación 17 o 18, en donde dicha célula aislada se elige del grupo que comprende células epiteliales, fibroblastos, células osteogénicas, macrófagos y microgliocitos, células vasculares, células óseas, condrocitos, células del miocardio, células sanguíneas, neuronas, oligodendrocitos, células astrogliales, células progenitoras, células madre y/o células derivadas de células progenitoras o células madre.