FORMULACIÓN LÍQUIDA DE FSH.

La presente invención se refiere a una composición farmacéutica líquida que comprende un polipéptido de hormona estimulante del folículo, y cloruro de benzalconio y alcohol bencílico como conservantes. La composición comprende además, opcionalmente, uno o más de otros excipientes farmacéuticamente aceptables. En una realización, la composición contiene metionina como antioxidante. La composición muestra una buena estabilidad durante el almacenamiento y es especialmente útil para la profilaxis y el tratamiento de trastornos e indicaciones médicas en donde los preparados de hormona estimulante del folículo son considerados remedios útiles. La hormona estimulante del folículo (siglas inglesas FSH) es producida por las células gonadotrópicas de la pituitaria anterior y se libera a la circulación. La FSH actúa junto con la hormona luteinizante (siglas inglesas LH) en el control de la maduración de los ovocitos en las mujeres y de la espermatogénesis en los varones. Tanto la FSH como la LH pertenecen a una familia de glicoproteínas heterodiméricas que se componen de dos cadenas y ß que no están unidas covalentemente y que están codificadas por genes distintos. Tanto la cadena como la cadena ß están glicosiladas. La subunidad consta de 92 restos de aminoácidos, mientras que la subunidad ß consta de 111 restos de aminoácido, y cada una de ellas tiene dos sitios potenciales de glicosilación unidos a asparagina. La FSH humana se utiliza para el tratamiento de mujeres con anovulación, para la estimulación del desarrollo multifolicular (superovulación) y en la preparación para una concepción asistida tal como la IVF, ICSI, GIFT o CIFT. Además, la FSH humana se utiliza para estimular la maduración de los folículos en mujeres con baja o nula producción de FSH y para la estimulación de la espermatogénesis en varones con hipogonadismo hipogonadotrópico congénito o adquirido. Hasta la década de 1980, una fuente primaria de la FSH humana era la FSH derivada de orina, aislada de la orina de mujeres en edad fértil. En la década de 1990 se introdujo una forma más purificada de FSH derivada de orina, de alta pureza, y finalmente se desarrolló y se ha utilizado ampliamente desde el año 1998 una FSH recombinante. Con la llegada de la tecnología del ADN recombinante, se hizo posible producir FSH humana en cultivos celulares transfectados con las secuencias de ácido nucleico que codifican la cadena y la cadena ß. Las secuencias de ADN que codifican las cadenas y ß y los métodos para producir FSH recombinante han sido divulgadas, por ejemplo, en los documentos WO 88/10270, WO 86/04589 y EP 0 735 139. Existen en la actualidad dos productos comerciales de FSH humana recombinante en el mercado de Alemania, GONAL-f ® y Puregon ® , producidas ambas por expresión de las secuencias de ADN que codifican las cadenas y ß humanas de tipo natural en células ováricas de hámster chino (siglas inglesas CHO). En general, las proteínas tienen una vida media muy corta, y experimentan desnaturalización, por ejemplo agregación de monómeros, disociación de dímeros, y adsorción sobre superficies de recipientes, al ser expuestas a factores diversos tales como temperaturas desfavorables para la expresión de la actividad de la proteína, el agua, la interfase con el aire, presión elevada, tensión física y mecánica, disolventes orgánicos y contaminación microbiana. En consecuencia, las proteínas desnaturalizadas pierden propiedades fisicoquímicas intrínsecas y efectos fisiológicamente activos. La desnaturalización de las proteínas es irreversible y, por lo tanto las proteínas, cuando se han desnaturalizado, difícilmente pueden recuperar las propiedades nativas que poseían en su estado inicial. En particular, las proteínas que tienen una estructura heterodimérica que consta de dos subunidades diferentes y se administran en una cantidad traza, inferior a algunos cientos de microgramos cada vez, tal como ocurre con la FSH humana, presentan problemas relacionados con la pérdida relativamente elevada de proteína, que incluye la pérdida de proteína a causa de la disociación de dímeros en disoluciones acuosas y a la adsorción de las proteínas en la superficie interna de recipientes. Las proteínas disociadas pierden su actividad fisiológica propia, y los monómeros disociados son fácilmente susceptibles a la agregación. Además, las proteínas absorbidas sobre la superficie interna de recipientes son también fácilmente vulnerables a la agregación a través del proceso de desnaturalización. Si se administran a un organismo humano, las proteínas así desnaturalizadas pueden desencadenar la formación de anticuerpos contra proteínas que existen de manera natural en el organismo. Algunos productos farmacéuticos proteicos han superado los problemas de estabilidad a través de la liofilización (secado por congelación). Aunque estos preparados liofilizados son lo suficientemente estables para garantizar períodos de validez durante el almacenamiento suficientes, tienen el inconveniente de que es necesario reconstituirlos antes de su administración. Por lo tanto, el paciente necesariamente tiene que reconstituir la glicoproteína seca en un disolvente (por ejemplo, agua para inyección) antes del uso, lo cual constituye un inconveniente y una molestia para el paciente. Además, hay que proporcionar el disolvente junto con los preparados liofilizados de la FSH. Para un paciente que necesite inyecciones de FSH a intervalos regulares, por ejemplo un paciente que esté recibiendo una dosis diaria de FSH recombinante humana para inducir la ovulación, sería importante que la formulación de gonadotropina fuese fácil de manejar, dosificar e inyectar. La reconstitución de un 2   preparado liofilizado de gonadotropina requiere prudencia y cuidado, y debería evitarse siempre que sea posible. El uso de las gonadotropinas se vería facilitado si estas glicoproteínas pudiesen ser producidas y distribuidas como una disolución estable hasta llegar al paciente, quien pudiese inyectar el medicamento directamente, sin reconstitución. Además, el proceso de liofilización es una operación de proceso larga y costosa, y resultaría ventajoso el que se pudiera evitar este paso durante la preparación de una formulación de gonadotropina. Por consiguiente, existe la necesidad de un preparado inyectable listo para usar, que tenga una estabilidad suficiente para garantizar una vida útil razonable. Como medida alternativa para hacer frente a estas limitaciones, se puede mejorar la estabilidad de la proteína añadiendo un estabilizante a la proteína en estado disuelto. Como ejemplos de estabilizantes de proteína útiles, se conocen tensioactivos, proteínas tales como albúminas, polisacáridos, aminoácidos, polímeros, sales y similares. Sin embargo, se debe seleccionar y utilizar el estabilizante más adecuado teniendo en cuenta las propiedades fisicoquímicas únicas de las proteínas individuales. Además, el uso combinado de estabilizantes diferentes puede conllevar efectos secundarios adversos, en lugar de los efectos esperados, a causa de acciones competitivas y reacciones adversas entre los estabilizantes individuales. Además, la estabilización satisfactoria de las proteínas presentes en la disolución requiere una cuidadosa atención y muchos esfuerzos, ya que los estabilizantes individuales presentan un intervalo específico de concentración que resulta favorable para la estabilización de las proteínas correspondientes. Se ha formulado la FSH tanto en formatos líquidos de dosis única como formatos multi-dosis, en viales, carpulas o ampollas. Los formatos de dosis única deben permanecer estables y potentes durante el almacenamiento antes de su uso. Los formatos multi-dosis no sólo deben permanecer estables y potentes durante el almacenamiento antes de su uso, sino que también deben permanecer estables, potentes y relativamente libres de bacterias a lo largo del período de administración del régimen de dosis múltiple, después de haber desprecintado la ampolla. Por esta razón, los formatos multi-dosis contienen a menudo un agente bacteriostático. GONAL-f ® , un preparado líquido de FSH recombinante humana listo para usar, está disponible como disolución inyectable administrada desde una pluma para inyección. La disolución contiene m-cresol como conservante (ROTE LISTE 2007, nº 50 004). Puregon ® también está disponible como preparado inyectable listo para usar que contiene alcohol bencílico como conservante (ROTE LISTE 2007, nº 50 010). También se han descrito en la bibliografía de patentes preparados líquidos de FSH que contienen un conservante. La solicitud de patente internacional WO-A1-00/04913 describe FSH y formulaciones de variantes de FSH que comprenden un conservante seleccionado de fenol, m-cresol, p-cresol, o-cresol, clorocresol, alcohol... [Seguir leyendo]

1.- Una composición farmacéutica líquida que comprende hormona estimulante del folículo (FSH) o una variante de la misma, y cloruro de benzalconio y alcohol bencílico, a la vez, como conservantes. 2.- Composición farmacéutica líquida según con la reivindicación 1, en donde está presente cloruro de benzalconio en una concentración de 0,005 - 0,03 mg/ml y está presente alcohol bencílico en una concentración de 5,0 a 12,0 mg/ml. 3.- Composición farmacéutica líquida según la reivindicación 1 ó 2, en donde está presente FSH o una variante de la misma en una concentración de 10 a 200 µg/ml. 4.- Composición farmacéutica líquida según cualquiera de las reivindicaciones precedentes, que comprende además metionina como un antioxidante. 5.- Composición farmacéutica líquida según cualquiera de las reivindicaciones precedentes, que comprende además un tensioactivo. 6.- Composición farmacéutica líquida según la reivindicación 5, en donde el tensioactivo es un éster alquílico de polioxietilen-sorbitán. 7.- Composición farmacéutica líquida según cualquiera de las reivindicaciones precedentes, que comprende además un agente modificador de la tonicidad. 8.- Composición farmacéutica líquida según la reivindicación 7, en donde el agente modificador de la tonicidad es azúcar-alcohol o azúcar. 9.- Composición farmacéutica líquida según cualquiera de las reivindicaciones precedentes, que tiene un pH en el intervalo de 6,5 a 7,5. 10.- Composición farmacéutica líquida según cualquiera de las reivindicaciones precedentes, que comprende además un agente de tampón fisiológicamente aceptable. 11.- Composición farmacéutica líquida según cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en donde la composición contiene FSH o una variante de la misma como agente activo, polisorbato 20 y/o polisorbato 80 como tensioactivo, manitol como modificador de la tonicidad, fosfato como tampón, metionina como agente estabilizante y alcohol bencílico y cloruro de benzalconio como conservantes, sin más excipientes. 12.- Un recipiente farmacéutico que contiene una composición farmacéutica líquida según cualquiera de las reivindicaciones precedentes. 13.- Método para preparar una composición farmacéutica líquida según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11, en donde se formula FSH o una variante de la misma como agente activo en un preparado acuoso que comprende cloruro de benzalconio y alcohol bencílico, a la vez, como conservantes y otros excipientes farmacéuticos. 14.- Método para fabricar una composición farmacéutica empaquetada que comprende disponer una disolución que comprende FSH o una variante de la misma, y cloruro de benzalconio y alcohol bencílico en un vial, ampolla, carpula o cartucho. 15.- Uso de una composición farmacéutica líquida según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 11 para uso en administración multi-dosis.