Un procedimiento de acuicultura mejorado, el procedimiento que comprende las etapas de:

(a) enriquecimiento de nematodos vivos y en libertad con aditivos alimentarios de acuicultura;

(b) desecación de dichos nematodos vivos y en libertad enriquecidos;

(c) almacenamiento de dichos nematodos vivos y en libertad enriquecidos y desecados;

(d) rehidratación y reactivación de dichos nematodos vivos y en libertad enriquecidos y desecados; y

(e) alimentación con dichos nematodos vivos y en libertad enriquecidos, rehidratados y reactivados de unorganismo crecido en acuicultura, en donde la etapa de enriquecimiento está modificada por la alimentaciónde dichos nematodos con liposomas que contienen aditivos de enriquecimiento.

Procedimiento para el almacenamiento de nematodos enriquecidos.

CAMPO Y ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN

La presente invención está relacionada con la acuicultura y, más en particular, con un procedimiento para el almacenamiento "común" de nematodos enriquecidos utilizados para la alimentación de organismos de acuicultura tales como larvas de peces y camarones.

Un obstáculo importante para el crecimiento con éxito de peces marinos con potencial comercial es la cría en las fases de desarrollo tempranas o larvas. Durante este periodo, la mortalidad puede variar entre el 60 – 100 % aproximadamente, con frecuencia debido a una nutrición insuficiente o mala. Por ejemplo, los criaderos dependen de la provisión de alimento vivo o zooplancton a las larvas, tales como rotíferos (Brachionus plicatilis u otras especies de Brachianus) y Artemia (especie de Artemia) . Este zooplancton no representa la dieta natural pero es relativamente fácil hacerlos crecer en grandes cantidades y son aceptados sin muchos problemas por las larvas. Por otra parte, el cultivo de este zooplancton requiere una inversión considerable en infraestructuras (tanques, agua y bombas de aire, tratamiento de aguas) así como de energía y mano de obra. Además, el alimento vivo no se puede almacenar o es deficiente en ácidos grasos poliinsaturados de cadena larga específicos (PUFA) , tales como el ácido docosahexaenoico (DHA) y el ácido eicosapentaenoico (EPA) que son necesarios en la dieta para el crecimiento rápido de las larvas que pueden presentar una tasa de crecimiento relativo (RGR) diario del 25 – 50 % (Koven, W., Tandler, A., Kissil, G.Wm., Sklan, D. 1992. The Importance of n-3 highly unsaturated fatty acids for growth in larval Sparus aurata and their effect on survival, lipid composition and size distribution. Aquaculture 104; 91 – 104) . Esto también es cierto con el ácido araquidónico (ArA) del que recientemente se ha reconocido que desempeña un papel central en el incremento de la resistencia al estrés (Koven, W., Barr, Y., Lutzky, S., Ben-Atia. I., Weiss, R., Harel, M., Behrens, P., Tandler, A. 2001. The effect of arachidonic acid (20 : 4n-6) on growth, survival and resistance to handling stress in gilthead seabream (Sparus aurata) larvae. Aquaculture 193, 107 – 122) . En consecuencia, los rotíferos y la Artemia se deben enriquecer con estos PUPA, alimentándolos con preparaciones comerciales de DHA y EPA, antes de ofrecérselos a las larvas de los peces.

Los sistemas de cultivo de alimento vivo con frecuencia están lastrados por un suministro inconsistente de zooplancton que presenta un contenido nutricional variable y son susceptibles de crisis poblacionales repentinas. Así, por ejemplo, una interrupción del suministro y/o una inconsistencia en la calidad alimentaria de la alimentación proporcionada a las larvas puede reducir gravemente su velocidad de crecimiento, incrementando el tiempo de residencia en el criadero o dando como resultado la transferencia de larvas más pequeñas y menos robustas al vivero, que produce un crecimiento y una supervivencia reducidos. Además, una mala alimentación puede causar estrés, lo que provoca una menor resistencia a enfermedades. En los últimos años, principalmente debido a la sobrexplotación, ha habido una rápida reducción en la disponibilidad mundial de quistes de Artemia, lo que ha producido una fluctuación de precios y una menor calidad de los quistes, agravando los problemas a la hora de proporcionar este plancton.

Una clara ventaja en la utilización de nematodos como alimento es que los nematodos se pueden almacenar en estado durmiente-desecado, después de su enriquecimiento. Se pueden encapsular y reactivarse en una fase posterior para alimentar a las larvas. Este " preparado común” proporciona un suministro de alimento fiable y nutricionalmente consistente a las larvas que se puede proporcionar con una menor inversión que otras especies de alimento vivo convencional.

Los ácidos grasos esenciales para las larvas marinas tales como el ácido docosahexaenoico (22 : 6n-3) , el ácido eicosapentaenoico (20 : 5n-3) y el ácido araquidónico (20 : 4n-6) se pueden suministrar a los nematodos mediante diversas emulsiones oleosas. Estudios previos han demostrado que los nematodos filtran fácilmente las micelas de las emulsiones oleosas. Estudios recientes han demostrado que la utilización de liposomas para alimentar a nematodos es un enfoque prometedor para ampliar el rango de aditivos alimentarios que se podrían utilizar para su enriquecimiento. Los liposomas son vesículas lipídicas pequeñas (0, 025 µm – 1 µm) que consisten en un volumen acuoso rodeado por una membrana fosfolipídica bilamelar. Es relativamente sencillo incorporar vitaminas, minerales, proteínas, y aminoácidos solubles en agua en el volumen acuoso y/o en los nutrientes solubles en lípidos, tales como lípidos, vitaminas y pigmentos, a la membrana fosfolipídica del liposoma (Koven, W., Barr, Y., Hadas, E., Ben-Atia, I., Chen, Y., Weiss, R., Tandler, A. 1999. The potential of liposomes as a nutrient supplement in first-feeding marine fish larvae. Aquaculture Nutrition 5, 251 – 256) .

Un estudio reciente ha demostrado que los liposomas se podrían utilizar para enriquecer nauplios de Artemia con el aminoácido libre metionina (Tonheim, S.K., Koven, B, Rinnestad, I. 2000. Enrichment of Artemia with free methionine. Aquaculture 190, 223 – 235) . Este zooplancton generalmente es deficiente en este aminoácido y su enriquecimiento puede contribuir a una síntesis de proteínas más eficiente. Este enfoque se ha expandido recientemente para incluir el enriquecimiento de nematodos con este y otros aminoácidos libres así como ácidos grasos libres, que estimulan las hormonas digestivas en las larvas, tales como la colecistoquinina (CCK) . La CCK es un factor importante en la liberación de enzimas pancreáticas que da como resultado una mejor digestión y asimilación de los nutrientes de la dieta. Además, los liposomas suministrados a nematodos que contienen inmunoestimulantes, vacunas y otros agentes farmacéuticos pueden estimular la resistencia a las enfermedades y al estrés en las larvas, lo que provoca una mejora en la calidad del pez en fase de larva y juvenil.

La patente de EE.UU. Nº 5.183.950 de Popiel y col., enseña un procedimiento para el almacenamiento comercial y transporte de nematodos entomopatógenos (parásitos para los insectos) . Se refiere a procedimientos para desecar, envasar, almacenar, y transportar nematodos parásitos para insectos tanto en grandes como en pequeñas cantidades mientras se mantiene su viabilidad y patogenicidad contra los insectos. El procedimiento de Popiel no menciona el enriquecimiento de los nematodos antes de su almacenamiento.

La patente de EE.UU. Nº 5.042.427 de Bedding describe un procedimiento de almacenamiento y transporte de nematodos enteropatógenos utilizando arcilla para secar los nematodos, que se reactivan cuando se dispersan en agua. El procedimiento de Bedding no menciona el enriquecimiento de los nematodos antes de su almacenamiento.

Solomon y col., también enseña la desecación de nematodos (Solomon A., Papema I., Glazer I. 1999 Desiccation survival of the entomopathogenic nematode Steinemema feltiae: induction of anhydrobiosis Nematology 1 (1) , 61 – 68) así como Perr y (Perr y R. 1999 Desiccation survival of parasitic nematodes. Parasitology 119, S19 – S30) . Aquí nuevamente no se hace mención al enriquecimiento de los nematodos antes de su desecación.

La patente WWO Nº 95/18527 de la Agricultural Genetics Company LTD enseña el enriquecimiento de nematodos con diversos aditivos tales como diferentes aceites y pigmentos para su utilización como alimento vivo para larvas. Este procedimiento ilustra las ventajas de la alimentación de las larvas con nematodos enriquecidos, pero no se hace mención al almacenamiento a largo plazo de los nematodos.

El nematodo vivo y en libertad Caenorhabditis elegans (C. elegans) se ha utilizado como organismo genético modelo y ha sido objeto de un extenso análisis molecular y genético (Jorgensen EM., y Mango SE. 2002 The art and design of genetic screens: Caenorhabditis elegans. Nature Reviews Genetics 3: 356 – 369; The C. elegans Sequencing Consortium. 1998 Genome sequence of the nematode C. elegans: a platform for investigating biology. Science 282: 2012 – 2018; Riddle D.L., Blumenthal, T., Meyer, BJ., y Priess, JR. C. elegant II. Cold Spring Harbor Laborator y Press, Nueva York, 1997) . Sin embargo no se hace ninguna mención de enriquecimiento,... [Seguir leyendo]

1. Un procedimiento de acuicultura mejorado, el procedimiento que comprende las etapas de:

(a) enriquecimiento de nematodos vivos y en libertad con aditivos alimentarios de acuicultura;

(b) desecación de dichos nematodos vivos y en libertad enriquecidos;

(c) almacenamiento de dichos nematodos vivos y en libertad enriquecidos y desecados;

(d) rehidratación y reactivación de dichos nematodos vivos y en libertad enriquecidos y desecados; y

(e) alimentación con dichos nematodos vivos y en libertad enriquecidos, rehidratados y reactivados de un organismo crecido en acuicultura, en donde la etapa de enriquecimiento está modificada por la alimentación de dichos nematodos con liposomas que contienen aditivos de enriquecimiento.

2. El procedimiento de la reivindicación 1, en donde dicha etapa de enriquecimiento de los nematodos incluye la manipulación genética del nematodo.

3. Un procedimiento de acuicultura mejorado, el procedimiento que comprende las etapas de:

(a) desecación de nematodos vivos y en libertad;

(b) almacenamiento de dichos nematodos vivos y en libertad desecados;

(c) rehidratación y reactivación de dichos nematodos vivos y en libertad desecados;

(d) enriquecimiento de dichos nematodos vivos y en libertad rehidratados y reactivados con aditivos alimentarios; y

(e) alimentación con dichos nematodos vivos y en libertad enriquecidos, rehidratados y reactivados de un organismo crecido en acuicultura, en donde la etapa de enriquecimiento está modificada por la alimentación de dichos nematodos con liposomas que contienen aditivos de enriquecimiento.

4. El procedimiento de la reivindicación 3, en donde dicha etapa de enriquecimiento de los nematodos incluye la manipulación genética del nematodo.