Un procedimiento de evaluación del grado al que las bacterias Bifidobacterium en un alimento o bebida de leche fermentada que contiene bacterias Bifidobacterium llegan a los intestinos cuando el alimento o bebida se administra por vía oral a seres humanos,

que comprende someter el alimento o bebida de leche fermentada a tratamientos sucesivos con un ácido y bilis, y medir la viabilidad bacteriana después de los tratamientos, en el que los tratamientos sucesivos del alimento o bebida de leche fermentada con un ácido y bilis comprenden un tratamiento con el ácido a 37ºC durante 30 minutos y luego con bilis a 37ºC durante 30 minutos

Campo técnico

La presente invención se refiere a un procedimiento conveniente para evaluar el grado al que las bacterias Bifidobacterium en un alimento o bebida de leche fermentada llegan a los intestinos cuando el alimento o bebida se administra por vía oral a seres humanos; y a bacterias Bifidobacterium que tienen una alta viabilidad cuando se evalúan mediante el procedimiento.

Técnica anterior

Se informa que las bacterias Bifidobacterium presentan diversos efectos fisiológicos tales como efectos inhibidores contra bacterias intestinal nocivas, efectos de control de la función intestinal y efectos de inmunoactivación. Se han puesto en el mercado varios productos que contienen bacterias Bifidobacterium, por ejemplo, en forma de productos de leche fermentada o preparaciones que contienen bacterias vivas, y han establecido una firme posición en el mercado. En particular, una fuerte preferencia por alimento y bebida de leche fermentada permite el consumo continuo de bacterias Bifidobacterium y, por tanto, son una forma adecuada de administración.

Las bacterias Bifidobacterium presentan la mayoría de sus efectos fisiológicos mediante la producción de ácido acético o similares como un metabolito después de llegar a los intestinos. Con el fin de producir efectos satisfactorios, deben llegar a los intestinos en la forma viable. El grado al que las bacterias llegan a los intestinos se ha considerado convencionalmente con su relación de recuperación a partir de las heces como un índice. Descrito específicamente, el número de bacterias vivas en las heces refleja el grado al que las bacterias llegan a los intestinos de manera que el grado se ha confirmado recogiendo las heces de los seres humanos a los que se administraron las bacterias y contando el número de bacterias vivas (relación de recogida) en las heces.

Generalmente se considera que las bacterias Bifidobacterium tienen dificultades en llegar a los tractos intestinales debido a la débil tolerancia a un ácido y a la bilis. En otras palabras, cuando se toman por vía oral, existe la posibilidad de que sean destruidas por el jugo gástrico o la bilis antes de llegar a los intestinos.

En los últimos años, la mejora de diversas técnicas de producción permite un aumento en número muy alto de las bacterias que pueden administrarse de manera que si algunas de las bacterias son destruidas, todavía pueden esperarse efectos fisiológicos de las restantes. Tras la producción de alimentos fermentados que contienen bacterias Bifidobacterium se añade una variedad de componentes para mejorar la viabilidad bacteriana durante el almacenamiento, por ejemplo, N-acetil-glucosamina, ácido pantoténico, péptidos y lactulosa. Su acción se considera para aumentar el grado al que las bacterias Bifidobacterium llegan a los intestinos después de su administración.

Con el fin de obtener efectos fisiológicos más fuertes debe producirse un mayor número de bacterias viables para alcanzar los intestinos. Por consiguiente, existe una exigencia de mejora del grado al que las bacterias llegan a los intestinos. Una prueba de administración a seres humanos es inevitable para encontrar el grado, es decir, una relación de recuperación de ellas a partir de las heces. Sin embargo, trabajos engorrosos y a largo plazo necesarios para la prueba han dificultado la implementación de una prueba tal.

J. Dairy Sci. 80 (1997) 1031-1037 describe un modelo dinámico del estómago y el intestino delgado para probar la supervivencia de bacterias de ácido láctico.

Hay algunos informes sobre la producción de una cepa dotada de antemano de tolerancia a jugo gástrico o a la bilis que será de otro modo una barrera contra las bacterias tomadas por vía oral. Por ejemplo, en la solicitud de patente japonesa abierta a consulta por el público nº Hei 9-322762 se describe que el uso de bacterias Bifidobacterium que presentan alta tolerancia a ácidos, sal biliar y a oxígeno permite el cultivo en leche desnatada o similares bajo condiciones anaerobias sin añadir una sustancia promotora del crecimiento. En International Journal of Food Microbiology, 47, 25-32(1999), se describen dos cepas de bacterias Bifidobacterium que tienen alta tolerancia a un ácido y a la bilis.

Considerando la posibilidad de mejorar el grado al que las bacterias llegan a los intestinos tras su administración usando tales bacterias altamente tolerantes, los presentes inventores crearon una cepa tal que tiene alta tolerancia a un ácido y a la bilis, prepararon un alimento o bebida de leche fermentada que contenía jarabe usando la cepa, lo administraron a seres humanos y encontraron una relación de recuperación a partir de las heces. Como resultado se ha revelado que no siempre hay una correlación entre la tolerancia y la relación de recuperación.

Por consiguiente, un objeto de la presente invención es construir un sistema de evaluación conveniente y preciso que refleje el grado al que las bacterias Bifidobacterium en un alimento o bebida de leche fermentada llegan a los intestinos. Otro objeto de la presente invención es crear una cepa superior en el grado con respecto a las bacterias Bifidobacterium convencionales y proporcionar un alimento o bebida de leche fermentada que contenga bacterias Bifidobacterium usando las bacterias.

Divulgación de la invención

Los presentes inventores llevaron a cabo una investigación sobre una relación de recuperación de bacterias Bifidobacterium a partir de las heces de personas a las que se les habían administrado alimento o bebida de leche fermentada que contenía bacterias Bifidobacterium. Como resultado se ha encontrado que en un alimento o bebida de leche fermentada, particularmente un alimento o bebida de leche fermentada que contiene jarabe, una relación de recuperación es relativamente alta justo después de la preparación, pero muestra una drástica reducción después de aproximadamente una semana desde la preparación. Si se tiene en consideración la distribución del alimento y bebida de leche fermentada, debe mantenerse una relación de recuperación suficientemente alta incluso después del almacenamiento durante un periodo tal. Los presentes inventores ha llevado a cabo otra investigación usando un alimento o bebida de leche fermentada que contiene bacterias Bifidobacterium y jarabe almacenado durante aproximadamente una semana. Como resultado se ha encontrado que el grado al que las bacterias Bifidobacterium en un alimento o bebida de leche fermentada llegan a los intestinos cuando el alimento o bebida es administrado por vía oral puede evaluarse convenientemente y con exactitud midiendo la viabilidad bacteriana después de tratamientos sucesivos con un ácido y bilis. También se ha descubierto que cuando se administra una leche fermentada o alimento que contiene una cepa que presenta al menos viabilidad bacteriana predeterminada, con la viabilidad bacteriana después de tratamientos sucesivos con un ácido y bilis como índice, el grado al que las bacterias llegan a los intestinos es excelente incluso aproximadamente una semana después de la preparación del alimento o bebida, que conduce a completarse la invención.

Por tanto, en un aspecto de la presente invención se proporciona un procedimiento para evaluar el grado al que las bacterias Bifidobacterium en un alimento o bebida de leche fermentada que contiene bacterias Bifidobacterium llegan a los intestinos cuando el alimento o bebida fermentado se administra por vía oral a seres humanos que comprende tratar sucesivamente el alimento o bebida de leche fermentada con un ácido y luego bilis como se define en la reivindicación 1; y medir la viabilidad bacteriana después de estos tratamientos.

En otro aspecto de la presente invención también se proporcionan bacterias Bifidobacterium como se define en la reivindicación 3 que presentan al menos el 20% de viabilidad bacteriana como se mide por el procedimiento de evaluación anteriormente descrito; y un alimento o bebida de leche fermentada que contiene bacterias Bifidobacterium que comprende las bacterias anteriormente descritas.

Mejor modo para llevar a cabo la invención

Cualquier alimento o bebida de leche fermentada que contenga bacterias Bifidobacterium puede usarse para la evaluación en la presente invención. Ejemplos incluyen alimento y bebida de leche fermentada que pueden obtenerse cada uno añadiendo un jarabe a una leche fermentada preparada cultivando bacterias Bifidobacterium en un medio nutritivo tal como medio GAM (producto de Nissui Pharmaceutical) y luego cultivando las bacterias resultantes como una semilla en un medio... [Seguir leyendo]

1. Un procedimiento de evaluación del grado al que las bacterias Bifidobacterium en un alimento o bebida de leche fermentada que contiene bacterias Bifidobacterium llegan a los intestinos cuando el alimento o bebida se administra por vía oral a seres humanos, que comprende someter el alimento o bebida de leche fermentada a tratamientos sucesivos con un ácido y bilis, y medir la viabilidad bacteriana después de los tratamientos, en el que los tratamientos sucesivos del alimento o bebida de leche fermentada con un ácido y bilis comprenden un tratamiento con el ácido a 37ºC durante 30 minutos y luego con bilis a 37ºC durante 30 minutos.

10 2. El procedimiento de la reivindicación 1, en el que el alimento o bebida de leche fermentada contiene un jarabe.

3. Bacterias Bifidobacterium que son la cepa YIT 4125 de Bifidobacterium breve depositada como FERM BP-7813 o la cepa YIT 4126 de Bifidobacterium breve depositada como FERM BP-7814.

15 4. Un alimento o bebida de leche fermentada que contiene bacterias Bifidobacterium que comprende bacterias Bifidobacterium según la reivindicación 3.

5. El alimento o bebida de leche fermentada de la reivindicación 4 que comprende además un jarabe.