DISPOSITIVO DE CULTIVO DE CÉLULAS O DE MICROORGANISMOS.

Dispositivo destinado al cultivo de células o de microorganismos que comprende un recinto (100) constituido por una cuba (110) y por una tapa (150),

adaptado para definir en el estado cerrado un volumen estanco bajo presión controlada, y un conjunto (200) concebido para ser dispuesto en el interior del recinto (100) siendo susceptible al mismo tiempo de ser retirado de éste durante la apertura de la tapa (150), comprendiendo el recinto (100) por otra parte unos medios (113, 160, 130, 114) concebidos para asegurar sucesivamente la esterilización de su contenido, la inoculación de un medio de cultivo dispuesto en los platillos (250) y un control de la atmósfera del recinto (100) apropiada para permitir el cultivo de células o de microorganismos, caracterizado porque el conjunto comprende además un bastidor de soporte (210) y una pluralidad de platillos (250) soportados por el bastidor de soporte (210), y porque el dispositivo comprende unos medios (280) concebidos para asegurar la homogeneización del medio de cultivo y/o la inoculación de éste, presentando los medios de homogeneización unos vástagos (282) de los cuales un extremo libre descansa sobre una faldilla (254) de los platillos (250)

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/EP2007/054834.

Solicitante: CENTRE NATIONAL DE LA RECHERCHE SCIENTIFIQUE (CNRS).

Nacionalidad solicitante: Francia.

Dirección: 3, RUE MICHEL-ANGE 75794 PARIS FRANCIA.

Inventor/es: OUAZZANI, JAMAL, LOPES,PHILIPPE, SERGENT,DIDIER, CORTIAL,SYLVIE.

Fecha de Publicación: .

Fecha Solicitud PCT: 18 de Mayo de 2007.

Fecha Concesión Europea: 21 de Julio de 2010.

Clasificación Internacional de Patentes:

  • C12M1/00D

Clasificación PCT:

  • C12M1/00 QUIMICA; METALURGIA.C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA.C12M EQUIPOS PARA ENZIMOLOGIA O MICROBIOLOGIA (instalaciones para la fermentación de estiércoles A01C 3/02; conservación de partes vivas de cuerpos humanos o animales A01N 1/02; aparatos de cervecería C12C; equipos para la fermentación del vino C12G; aparatos para preparar el vinagre C12J 1/10). › Equipos para enzimología o microbiología.

Países PCT: Austria, Bélgica, Suiza, Alemania, Dinamarca, España, Francia, Reino Unido, Grecia, Italia, Liechtensein, Luxemburgo, Países Bajos, Suecia, Mónaco, Portugal, Irlanda, Eslovenia, Finlandia, Rumania, Chipre, Lituania, Letonia, Ex República Yugoslava de Macedonia, Albania.

DISPOSITIVO DE CULTIVO DE CÉLULAS O DE MICROORGANISMOS.

Fragmento de la descripción:

Dispositivo de cultivo de células o de microorganismos.

La presente invención se refiere al campo del cultivo de células. Se aplica en particular al cultivo de microorganismos. Sin embargo, no está limitada a esta aplicación particular y se extiende al cultivo de cualquier tipo celular (células vegetales, células de insectos, incluso de las células animales).

El experto en la materia conoce en particular que la búsqueda y el desarrollo de moléculas de interés, a partir de sustancias naturales, constituyen una apuesta principal en el campo terapéutico.

Esta búsqueda necesita unos equipos que permitan el cultivo de microorganismos.

Con este fin, ya se han propuesto numerosos equipos.

Un ejemplo de equipo conocido se ha descrito en el documento EP-A-1 131 404. Este equipo adolece de ciertos límites. En particular, no permite cultivar en medio líquido, lo cual excluye el cultivo de células de insectos o de células animales.

Sin embargo, ninguno de los equipos conocidos resultan totalmente satisfactorios en la actualidad, en particular que se adapte a diferentes tipos celulares, permitiendo unos cultivos sobre unos soportes de tipo gelosa nutritiva y acumulando las diferentes etapas de un cultivo celular.

En este contexto, la presente invención tiene como objetivo proponer un nuevo equipo que permita mejorar la situación.

Este objetivo se alcanza según la presente invención gracias a un dispositivo destinado al cultivo de células o de microorganismos, caracterizado porque comprende un recinto constituido por una cuba y por una tapa, adaptado para definir en el estado cerrado un volumen estanco bajo presión controlada y un conjunto concebido para ser dispuesto en el interior del recinto siendo al mismo tiempo susceptible de ser retirado de éste durante la apertura de la tapa, comprendiendo dicho conjunto un bastidor de soporte y una pluralidad de platillos soportados por el bastidor de soporte, comprendiendo el recinto por otra parte unos medios concebidos para asegurar sucesivamente la esterilización de su contenido, la inoculación de un medio de cultivo dispuesto en los platillos y un control de la atmósfera del recinto apropiada para permitir el cultivo de células o de microorganismos.

Como se expondrá a continuación con mayor detalle, la estructura así propuesta según la presente invención permite realizar todas las etapas esenciales para el cultivo de los microorganismos en el mismo seno del recinto. Así, la presente invención permite evitar cualquier contaminación antes y durante el cultivo.

Según otra característica ventajosa de la invención, la presente invención comprende asimismo unos medios concebidos para asegurar un tratamiento después del cultivo, preferentemente un tratamiento térmico apropiado para secar el medio de cultivo así como los micro-organismos cultivados.

Según ora característica ventajosa de la presente invención, la interfaz definida entre la cuba y la tapa del recinto es una interfaz que comprende una junta anular de estanqueidad.

Según otra característica ventajosa de la presente invención, el bastidor de soporte está unido a la tapa del recinto.

Según otra característica ventajosa de la presente invención, el recinto está concebido para controlar un flujo de gas inyectado en la cuba, en particular un flujo de vapor, de aire, de oxígeno, o de cualquier otro gas que asegure de manera óptima el cultivo, sin riesgo de arrastre de microorganismos.

Otras características, objetivos y ventajas de la presente invención se pondrán más claramente de manifiesto a partir de la descripción detallada siguiente y haciendo referencia a los dibujos adjuntos dados a título de ejemplos no limitativos y en los que:

- la figura 1 representa una vista esquemática externa de un dispositivo de acuerdo con la presente invención,

- la figura 2 ilustra la extracción del conjunto constituido por un bastidor de soporte y por platillos fuera de la cuba durante la apertura de la tapa,

- las figuras 3, 4 y 5 ilustran tres etapas de desmontaje de dicho conjunto con el fin de acceder a los platillos,

- la figura 6 representa una vista lateral de una pala utilizada para homogeneizar el medio soportado por un platillo, o para extender un precultivo sobre éste,

- la figura 7 representa esquemáticamente unos medios previstos sobre la cuba para asegurar la inoculación de los platillos,

- la figura 8 representa una vista esquemática, parcialmente en sección vertical, del dispositivo de acuerdo con la presente invención, y

- la figura 9 representa una vista esquemática en sección horizontal del mismo dispositivo.

Tal como se ha mencionado anteriormente, el dispositivo según la presente invención se compone esencialmente de un recinto 100 y de un conjunto extraíble 200.

El recinto 100 está compuesto por una cuba 110 y por una tapa 150.

El conjunto 200 está compuesto por un bastidor de soporte 210 y por platillos 250.

El recinto 100 presenta una simetría general de revolución alrededor de un eje vertical O-O.

La cuba 110 está constituida por una pared 112 cilíndrica de revolución alrededor del eje O-O, cerrado en su base por una calota 114 cóncava hacia el exterior, típicamente de forma sustancialmente semiesférica.

Preferentemente, en casi la totalidad de su altura, la pared cilíndrica 112 está recubierta en el exterior por una cámara anular 113 que forma una doble envolvente. Dicha cámara permite, cuando esta alimentada con un fluido a temperatura controlada, controlar de manera homogénea la temperatura del volumen interno del recinto.

Este control en temperatura puede ser utilizado, evidentemente adaptando y haciendo evolucionar la temperatura del fluido que alimenta la cámara 113, el conjunto de las etapas realizadas, a saber, esterilización, inoculación, cultivo, incluso la etapa ulterior, en particular de secado.

Más precisamente, tal como se observa en las figuras adjuntas, preferentemente la cámara anular 113 no cubre la totalidad de la periferia de la cuba 112. La cámara anular 113 presenta una sección recta horizontal en C que cubre aproximadamente 310 a 320º alrededor de la pared 112.

A nivel del espacio libre definido entre los dos extremos periféricos de la cámara anular 113, es decir, el espacio en el que la pared 112 es directamente accesible, esta última está provista preferentemente de una ventanilla 120 y de medios 130 concebidos para asegurar la inoculación de un medio de cultivo soportado por los platillos 250. La ventanilla 120 presenta así preferentemente una forma oblonga cuya dimensión mayor se extiende verticalmente sobre toda la altura de la pared 112 situada enfrente de los platillos 250.

Los medios 130 pueden ser el objeto de diferentes variaciones. Están formados preferentemente con tapones 132 en material elastomérico o equivalente susceptibles de ser atravesados por unas agujas adaptadas, unidas a su vez en el exterior del recinto a una fuente de inoculación, para asegurar una inoculación controlada con microorganismos de un medio de cultivo soportado por los platillos 250. Para ello, el extremo de dichas agujas situadas en el interior del recinto debe estar situado por encima de los platillos 250, y preferentemente en una zona controlada con precisión. Estas agujas o unas agujas de longitudes diferentes permiten asimismo la adición de cualquier disolución en los platillos así como la extracción estéril mediante aspiración de la totalidad o parte del contenido del platillo.

Dicho control puede ser realizado por un lado visualmente, gracias a la ventanilla 120. En efecto, tal como se puede observar en las figuras 1 y 2, la ventanilla 120 es adyacente a estos medios 130. Por otro lado, este control se puede realizar con el cuidado de controlar con precisión la longitud de las agujas introducidas en el recinto, por ejemplo controlando la posición de una referencia sobre las agujas con relación al tapón 130.

Tal como se aprecia en la figura 7, preferentemente cada medio 130 comprende un bloque elastomérico 132 generalmente cilíndrico de revolución alrededor de un eje 134 globalmente radial con respecto al eje O-O pero ligeramente inclinado en la horizontal, hacia abajo con relación al eje O-O- Los bloques elastoméricos 132 se colocan...

 


Reivindicaciones:

1. Dispositivo destinado al cultivo de células o de microorganismos que comprende un recinto (100) constituido por una cuba (110) y por una tapa (150), adaptado para definir en el estado cerrado un volumen estanco bajo presión controlada, y un conjunto (200) concebido para ser dispuesto en el interior del recinto (100) siendo susceptible al mismo tiempo de ser retirado de éste durante la apertura de la tapa (150), comprendiendo el recinto (100) por otra parte unos medios (113, 160, 130, 114) concebidos para asegurar sucesivamente la esterilización de su contenido, la inoculación de un medio de cultivo dispuesto en los platillos (250) y un control de la atmósfera del recinto (100) apropiada para permitir el cultivo de células o de microorganismos, caracterizado porque el conjunto comprende además un bastidor de soporte (210) y una pluralidad de platillos (250) soportados por el bastidor de soporte (210), y porque el dispositivo comprende unos medios (280) concebidos para asegurar la homogeneización del medio de cultivo y/o la inoculación de éste, presentando los medios de homogeneización unos vástagos (282) de los cuales un extremo libre descansa sobre una faldilla (254) de los platillos (250).

2. Dispositivo según la reivindicación 1, caracterizado porque comprende asimismo unos medios (113) concebidos para asegurar un tratamiento después del cultivo, preferentemente un tratamiento térmico apropiado para secar el medio de cultivo así como las células o los microorganismos cultivados.

3. Dispositivo según una de las reivindicaciones 1 ó 2, caracterizado porque la interfaz definida entre la cuba (110) y la tapa (150) del recinto (100) es una interfaz que comprende una junta anular de estanqueidad.

4. Dispositivo según una de las reivindicaciones 1 a 3, caracterizado porque el bastidor de soporte (210) está unido a la tapa (150) del recinto (100), preferentemente mediante unos medios de unión amovibles.

5. Dispositivo según una de las reivindicaciones 1 a 4, caracterizado porque el recinto (100) está concebido para controlar un flujo de gas inyectado en la cuba, en particular un flujo de oxígeno, de manera que este flujo asegura de manera óptima el cultivo, sin flujo adicional susceptible de arrastrar unas células o unos microorganismos.

6. Dispositivo según una de las reivindicaciones 1 a 5, caracterizado porque la cuba (110) comprende una doble envolvente (113) que define una cámara que permite, cuando está alimentada con un fluido a temperatura controlada, controlar de manera homogénea la temperatura del volumen interno del recinto (100).

7. Dispositivo según una de las reivindicaciones 1 a 6, caracterizado porque el recinto (100) comprende una ventanilla (120) que se extiende sobre toda la altura del conjunto (200) que comprende unos platillos (250).

8. Dispositivo según una de las reivindicaciones 1 a 7, caracterizado porque el recinto (100) comprende unos medios (130) que permiten la introducción de agujas que aseguran la inoculación de un medio de cultivo o la extracción de la totalidad o parte del contenido de los platillos.

9. Dispositivo según la reivindicación 8, caracterizado porque los medios (130) que permiten la introducción de agujas están formados por tapones (132) en material elastomérico.

10. Dispositivo según la reivindicación 9, caracterizado porque los tapones (132) en material elastomérico están montados amovibles.

11. Dispositivo según una de las reivindicaciones 1 a 10, caracterizado porque el recinto (100) comprende un número de medios (130) que permiten la introducción de agujas que aseguran la inoculación de un medio de cultivo, igual al número de platillos (250) soportados por el bastidor de soporte.

12. Dispositivo según una de las reivindicaciones 1 a 11, caracterizado porque el recinto (100) presenta un orificio de vaciado (115) en su base.

13. Dispositivo según una de las reivindicaciones 1 a 12, caracterizado porque el recinto (100) comprende por lo menos una entrada (160) que permite inyectar un fluido o un gas apropiado.

14. Dispositivo según una de las reivindicaciones 1 a 13, caracterizado porque el recinto (100) comprende unas sondas dedicadas al control de todos los parámetros en el interior de la cuba, y por lo menos una sonda de temperatura (118), adaptada para medir la temperatura interna del recinto.

15. Dispositivo según una de las reivindicaciones 1 a 14, caracterizado porque el recinto (100) comprende unos medios de medición de la temperatura adaptados para ser dispuestos en el seno del medio de cultivo soportado por los platillos (250).

16. Dispositivo según una de las reivindicaciones 1 a 15, caracterizado porque el recinto (100) comprende unos medios de medición de temperatura del tipo de transmisión sin cable.

17. Dispositivo según una de las reivindicaciones 1 a 16, caracterizado porque comprende unos medios de iluminación del volumen interno del recinto (100).

18. Dispositivo según una de las reivindicaciones 1 a 17, caracterizado porque la tapa (150) del recinto (100) comprende unos medios de iluminación y de observación del interior de la cuba.

19. Dispositivo según una de las reivindicaciones 1 a 18, caracterizado porque comprende unos medios de iluminación a nivel de una ventanilla (120).

20. Dispositivo según una de las reivindicaciones 1 a 19, caracterizado porque el bastidor de soporte (210) está compuesto por varias columnas verticales (220), unidas entre sí mediante unos juegos de travesaños o de barras horizontales (222) que sirven de soporte a los platillos (250).

21. Dispositivo según la reivindicación 1, caracterizado porque los medios (280) concebidos para asegurar la homogeneización del medio de cultivo y/o la inoculación de éste comprenden unas palas o rastrillos (280) susceptibles de ser arrastrados en rotación.

22. Dispositivo según una de las reivindicaciones 1 a 21, caracterizado porque los platillos (250) presentan en su centro un orificio (255) coronado por una faldilla cilíndrica (256) que permite el paso de un vástago (290) concebido para el arrastre de los medios de homogeneización.

23. Dispositivo según una de las reivindicaciones 1 a 21, caracterizado porque cada platillo (250) presenta una garganta radial.


 

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