COMPLEJO ELECTROACTIVO, SONDA ELECTROACTIVA Y PROCEDIMIENTO DE PREPARACIÓN.
Complejo electroactivo, constituido por un polímero homopolímero o copolímero electroactivo de por lo menos dos monómeros,
un anti-ligando y un ligando que ha interactuado específicamente con dicho anti-ligando, caracterizado porque comprende además por lo menos un grupo electro-donante, y porque presenta una de las tres estructuras siguientes: - el grupo electro-donante está unido de manera covalente por un lado al polímero electroactivo y, por otro lado al anti-ligando que interactúa específicamente con el ligando o al ligando que interactúa específicamente con el anti-ligando, - el grupo electro-donante está unido de manera covalente al anti-ligando que interactúa específicamente con el ligando, estando el anti-ligando unido a su vez de manera covalente al polímero electroactivo, - el grupo electro-donante está unido de manera covalente al ligando que interactúa específicamente con el antiligando, estando el anti-ligando unido de manera covalente al polímero electroactivo, estando excluidos los complejos electroactivos para los cuales dicho polímero electroactivo es un polipirrol unido de manera covalente, por medio de un grupo (CH2)mCONH(CH2)m '' en el que m y m'' son idénticos o diferentes y son un número entero comprendido entre 1 y 3, a un grupo electro-donante que consiste en un ferroceno, una quinona, un ferroceno o una quinona activado(a) por un éster seleccionado de entre el grupo constituido por COONhidroxiftalamida, COON-hidroxísuccinimida y COO-pentafluorofenol, estando dicho grupo electro-donante unido a su vez de manera covalente a un anti-ligando que interactúa específicamente con un ligando
Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/FR2001/001241.
Solicitante: BIO MERIEUX.
Nacionalidad solicitante: Francia.
Dirección: CHEMIN DE L'ORME 69280 MARCY L'ETOILE FRANCIA.
Inventor/es: GARNIER, FRANCIS.
Fecha de Publicación: .
Fecha Solicitud PCT: 23 de Abril de 2001.
Fecha Concesión Europea: 18 de Agosto de 2010.
Clasificación Internacional de Patentes:
- C08G61/12D
- C08G61/12D1B
- G01N33/58 FISICA. › G01 METROLOGIA; ENSAYOS. › G01N INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION DE SUS PROPIEDADES QUIMICAS O FISICAS (procedimientos de medida, de investigación o de análisis diferentes de los ensayos inmunológicos, en los que intervienen enzimas o microorganismos C12M, C12Q). › G01N 33/00 Investigación o análisis de materiales por métodos específicos no cubiertos por los grupos G01N 1/00 - G01N 31/00. › en los que intervienen sustancias marcadas (G01N 33/53 tiene prioridad).
- H01B1/12H
Clasificación PCT:
- C08G61/12 QUIMICA; METALURGIA. › C08 COMPUESTOS MACROMOLECULARES ORGANICOS; SU PREPARACION O PRODUCCION QUIMICA; COMPOSICIONES BASADAS EN COMPUESTOS MACROMOLECULARES. › C08G COMPUESTOS MACROMOLECULARES OBTENIDOS POR REACCIONES DISTINTAS A AQUELLAS EN LAS QUE INTERVIENEN SOLAMENTE ENLACES INSATURADOS CARBONO - CARBONO (procesos de fermentación o procesos que utilizan enzimas para sintetizar un compuesto dado o una composición dada o para la separación de isómeros ópticos a partir de una mezcla racémica C12P). › C08G 61/00 Compuestos macromoleculares obtenidos por reacciones que forman un enlace carbono-carbono en la cadena principal de la macromolécula (C08G 2/00 - C08G 16/00 tienen prioridad). › Compuestos macromoleculares que contienen átomos distintos del carbono en la cadena principal de la macromolécula.
- H01B1/12 ELECTRICIDAD. › H01 ELEMENTOS ELECTRICOS BASICOS. › H01B CABLES; CONDUCTORES; AISLADORES; ,o EMPLEO DE MATERIALES ESPECIFICOS POR SUS PROPIEDADES CONDUCTORAS, AISLANTES O DIELECTRICAS (empleo por las propiedades magnéticas H01F 1/00; guías de ondas H01P). › H01B 1/00 Conductores o cuerpos conductores caracterizados por los materiales conductores utilizados; Empleo de materiales específicos como conductores (conductores, cables o líneas de transmisión superconductores o hiperconductores caracterizados por los materiales utilizados H01B 12/00). › sustancias orgánicas.
Clasificación antigua:
Países PCT: Austria, Bélgica, Suiza, Alemania, Dinamarca, España, Francia, Reino Unido, Grecia, Italia, Liechtensein, Luxemburgo, Países Bajos, Suecia, Mónaco, Portugal, Irlanda, Eslovenia, Finlandia, Rumania, Chipre, Lituania, Letonia, Ex República Yugoslava de Macedonia, Albania.
Fragmento de la descripción:
Complejo electroactivo, sonda electroactiva y procedimiento de preparación.
La presente invención se refiere a los electrodos orgánicos elaborados a partir de polímeros electroactivos en los que se unen unos anti-ligandos destinados a interactuar específicamente con unos ligandos.
La interacción específica del anti-ligando con el ligando provoca una variación sensible y selectiva de las propiedades electroquímicas del polímero electroactivo, tal como una disminución de la electroactividad de dicho polímero. Esta variación, que depende de la concentración en ligando injertado, se observa, eventualmente se mide, y se correlaciona directamente con la cantidad de ligando injertado. Una de las aplicaciones esenciales de esta técnica se basa por lo tanto en la detección, la identificación, y eventualmente la dosificación, de un ligando, presente en una muestra biológica.
La variación citada anteriormente es de tipo potenciométrica, tal como una variación del potencial de oxidación del polímero electroactivo antes y después de la interacción, o de tipo amperométrica, tal como una variación de la corriente de oxidación o de reducción del polímero
Para caracterizar precisamente la respuesta electroquímica del polímero, éste debe presentar una electroactividad fuerte.
Por tanto, uno de los objetivos de la invención es aportar una sonda a base de polímero electroactivo sobre el cual se fija por lo menos un anti-ligando, presentando esta sonda una electroactividad fuerte.
Según el documento WO-A-95/29199, se conoce un polipirrol, constituido por unos monómeros que consisten cada uno en un núcleo pirrol sustituido de manera covalente sobre el carbono en posición 3 del núcleo pirrol, por un polinucleótido sonda.
Según el documento WO 00/31750 A1, se conocen unos complejos electroactivos para los cuales el polímero electroactivo es un polipirrol unido de manera covalente, por medio de un grupo (CH2)mCONH(CH2)m'' en el que m y m'' son idénticos o diferentes y son un número entero comprendido entre 1 y 3, a un grupo electro-donante que consiste en un ferroceno, una quinona, un ferroceno o una quinona activado(a) por un éster seleccionado de entre el grupo constituido por COON-hidroxiftalamida, COON-hidroxisuccinimida y COO-pentafluorofenol, estando dicho grupo electro-donante unido
El polipirrol así obtenido se aplica a la detección, y eventualmente a la dosificación, de ligandos, in vitro o in vivo.
Sin embargo, se espera todavía la elaboración de polímeros que presenten mejores propiedades electro-activas.
Según la invención, se aporta un polímero electroactivo, modificado, portador de por lo menos un anti-ligando, y cuya sensibilidad puede ser del orden de cien veces superior a la de un polímero electroactivo modificado conocido, tal como un polipirrol que ha constituido el objeto del documento WO-A-95/29199.
Así, un primer objeto de la invención es un complejo electroactivo, constituido por un polímero homopolímero o copolímero electroactivo de por lo menos dos monómeros, un anti-ligando y un ligando que ha interactuado específicamente con dicho anti-ligando, comprendiendo dicho complejo además por lo menos un grupo electro-donante, siendo dicho complejo electroactivo tal como se reivindica en la reivindicación 1.
Según la invención, el grupo electro-donante se selecciona ventajosamente de entre el ferroceno, la quinona y los derivados de éstos, y/o el polímero electroactivo se selecciona preferentemente de entre el polipirrol, el poliacetileno, la poliazina, el poli(p-fenileno), el poli(p-fenilen-vinileno), el polipireno, el politiofeno, el polifurano, el poliselenofeno, la polipiridazina, el policarbazol, la polianilina, los polinucleótidos bicatenarios.
Antes de detallar la invención, se definen a continuación algunos términos utilizados en la descripción y en las reivindicaciones.
Mediante la expresión "grupo electro-donante" se entiende un par redox que presenta una onda de oxidación estrecha, rápida y reversible, tal como el ferroceno, la quinona y sus derivados, por ejemplo sus derivados sustituidos.
Por los términos "anti-ligando" y "ligando" se hace referencia indiferentemente a unas moléculas biológicas tales como unos polinucleótidos o unos péptidos, pero también a unas moléculas químicas.
El anti-ligando es susceptible de interactuar específicamente con el ligando para formar un conjugado ligando/anti-ligando. A título de ejemplos de conjugados, se puede citar cualquier par péptido/anticuerpo, anticuerpo/hapteno, hormona/receptor, polinucleótido/polinucleótido, polinucleótido/ácido nucleico, y análogos.
El término "polinucleótido" tal como se utiliza según la invención designa una cadena de por lo menos cinco nucleótidos (desoxirribonucleótidos o ribonucleótidos), naturales o modificados, susceptibles de hibridarse, en unas condiciones apropiadas de hibridación, con un polinucleótido por lo menos parcialmente complementario. Mediante la expresión "nucleótidos modificados", se entiende por ejemplo un nucleótido que comprende una base modificada y/o que comprende una modificación a nivel del enlace internucleotídico y/o a nivel del esqueleto. A título de ejemplo de bases modificadas, se puede citar la inosina, la metil-5-desoxicitidina, la dimetilamino-5-desoxiuridina, la diamino-2,6-purina y la bromo-5-desoxiuridina. Para ilustrar un enlace internucleotídico modificado, se pueden mencionar los enlaces fosforotioato, H-fosfonato y alquil-fosfonato. Los alfa-oligonucleótidos tales como los descritos en el documento FR-A-2 607 507 y los PNA que constituyen el objeto del artículo de M. Egholm et al., J. Am. Chem. Soc. (1992) 114, 1895-1897, son unos ejemplos de
El término "péptido" significa en particular cualquier cadena de por lo menos dos aminoácidos, tales como proteína, fragmento de proteína, oligopéptido, que ha sido extraído, separado, aislado o sintetizado, tal como un péptido obtenido mediante síntesis química o mediante expresión en un organismo recombinante. Están asimismo incluidos cualquier péptido en cuya secuencia uno o varios aminoácidos de la serie L están sustituidos con uno o varios aminoácidos de la serie D, y viceversa; cualquier péptido de los cuales por lo menos uno de los enlaces CO-NH está sustituido por un enlace NH-CO; cualquier péptido de los cuales por lo menos uno de los enlaces CO-NH está sustituido por un enlace NH-CO, estando la quiralidad de cada residuo aminoacilo, ya esté implicado o no en uno o varios de dichos enlaces CO-NH, o bien conservada, o bien invertida con relación a los residuos aminoacilos que constituyen un péptido de referencia (o inmunorretroides); y cualquier mimotopo.
Para ilustrar las diversas clases de los péptidos en cuestión, se pueden mencionar las hormonas adrenocorticotrópicas o sus fragmentos, los análogos de angiotensina y sus inhibidores, los péptidos natriuréticos, la bradiquinina y sus derivados peptídicos, los péptidos quimiotácticos, la dinorfina y sus derivados, las endorfinas y sus derivados, las encefalinas y sus derivados, los inhibidores de enzimas, los fragmentos de fibronectina y sus derivados, los péptidos gastro-intestinales, los péptidos opioides,
Por el término "anticuerpo" se define cualquier anticuerpo monoclonal o policlonal, cualquier fragmento de dicho anticuerpo tal como los fragmentos Fab, Fab'2 o Fe, así como cualquier anticuerpo obtenido mediante modificación o recombinación genética.
Por los términos "injertar", "unir" y "fijar" en ausencia de cualquier otra indicación, se utilizan indiferentemente en la presente memoria para designar una relación entre dos entidades, sin definir su naturaleza química. Así, puede tratarse de un enlace débil o de un enlace covalente.
Un grupo de enlace según la invención une, mediante enlace covalente, dos entidades químicas, después de la interacción de dichas dos entidades, habiendo sido una por lo menos previamente activada o activable, con vistas...
Reivindicaciones:
1. Complejo electroactivo, constituido por un polímero homopolímero o copolímero electroactivo de por lo menos dos monómeros, un anti-ligando y un ligando que ha interactuado específicamente con dicho anti-ligando, caracterizado porque comprende además por lo menos un grupo electro-donante, y porque presenta una de las tres estructuras siguientes:
- el grupo electro-donante está unido de manera covalente por un lado al polímero electroactivo y, por otro lado al anti-ligando que interactúa específicamente con el ligando o al ligando que interactúa específicamente con el anti-ligando,
- el grupo electro-donante está unido de manera covalente al anti-ligando que interactúa específicamente con el ligando, estando el anti-ligando unido a su vez de manera covalente al polímero electroactivo,
- el grupo electro-donante está unido de manera covalente al ligando que interactúa específicamente con el anti-ligando, estando el anti-ligando unido de manera covalente al polímero electroactivo,
estando excluidos los complejos electroactivos para los cuales dicho polímero electroactivo es un polipirrol unido de manera covalente, por medio de un grupo (CH2)mCONH(CH2)m'' en el que m y m'' son idénticos o diferentes y son un número entero comprendido entre 1 y 3, a un grupo electro-donante que consiste en un ferroceno, una quinona, un ferroceno o una quinona activado(a) por un éster seleccionado de entre el grupo constituido por COON-hidroxiftalamida, COON-hidroxísuccinimida y COO-pentafluorofenol, estando dicho grupo electro-donante unido a su vez de manera covalente a un anti-ligando que interactúa específicamente con un ligando.
2. Complejo según la reivindicación 1, caracterizado porque el polímero electroactivo se selecciona de entre el polipirrol, el poliacetileno, la poliazina, el poli(p-fenileno), el poli(p-fenileno vinileno), el polipireno, el politiofeno, el polifurano, el poliselenofeno, la polipiridazina, el policarbazol, la polianilina, y los polinucleótidos bicatenarios.
3. Complejo según la reivindicación 1, caracterizado porque el grupo electro-donante se selecciona de entre el ferroceno, la quinona y los derivados de éstos.
4. Complejo según la reivindicación 1, caracterizado porque el ligando y el anti-ligando son unas moléculas biológicas seleccionadas en particular de entre los polinucleótidos y los polipéptidos.
5. Complejo según la reivindicación 4, caracterizado porque el ligando y/o el anti-ligando están marcados por un marcador susceptible de generar directa o indirectamente una señal.
6. Complejo según la reivindicación 1, caracterizado porque el anti-ligando o el ligando están unidos de manera covalente al grupo electro-donante, por medio de un segundo grupo de enlace.
7. Complejo según la reivindicación 1, caracterizado porque el anti-ligando o el ligando están unidos de manera covalente al polímero electroactivo, por medio de un tercer grupo de enlace.
8. Complejo según cualquiera de las reivindicaciones 6 a 7, caracterizado porque los segundo y/o tercer grupos de enlace unen respectivamente el grupo electro-donante al anti-ligando y el anti-ligando al polímero electroactivo, por medio de un brazo de acoplamiento.
9. Complejo según la reivindicación 1, caracterizado porque el grupo electro-donante está unido al ligando por medio de un soporte inerte o biológico.
10. Complejo según la reivindicación 9, caracterizado porque el soporte inerte es una bola de poliestireno, una bola magnética o una bola de vidrio.
11. Complejo según la reivindicación 9, caracterizado porque el soporte biológico es una célula, en la que el grupo electro-donante ha sido internalizado.
12. Complejo según la reivindicación 1, caracterizado porque el polímero electroactivo es un polipirrol constituido por lo menos por dos monómeros que consisten cada uno en un núcleo pirrol, y porque el grupo electro-donante es el ferroceno.
13. Complejo según la reivindicación 12, caracterizado porque el anti-ligando es un polinucleótido sonda y el ligando es un polinucleótido diana, por lo menos parcialmente hibridado a dicho anti-ligando.
14. Complejo según la reivindicación 13, caracterizado porque el polinucleótido sonda está unido al ferroceno y al núcleo pirrol de dicho monómero por lo menos.
15. Complejo según la reivindicación 12, caracterizado porque el núcleo pirrol está sustituido sobre el carbono en posición 3.
16. Complejo según la reivindicación 14, caracterizado porque el polinucleótido sonda está fijado sobre el carbono en la posición 1 de uno de los núcleos ciclopentadieno del ferroceno.
17. Complejo según la reivindicación 12, caracterizado porque el polipirrol es un copolímero y comprende un monómero cuyo núcleo pirrol está sustituido con un grupo -CH2-COOH o -CH2-CH2OH.
18. Complejo según la reivindicación 14, caracterizado porque el segundo grupo de enlace, entre el ferroceno y el polinucleótido sonda o el polinucleótido diana es el grupo -CO-.
19. Complejo según la reivindicación 14, caracterizado porque el tercer grupo de enlace entre el polinucleótido sonda o el polinucleótido diana y el núcleo pirrol es el grupo -CH2-CO-.
20. Complejo según cualquiera de las reivindicaciones 18 a 19, caracterizado porque los segundo y/o tercer grupos de enlace unen, indirectamente, el ferroceno al polinucleótido sonda o al polinucleótido diana y el núcleo pirrol al polinucleótido sonda o al polinucleótido diana, por medio de un brazo de acoplamiento.
21. Complejo según la reivindicación 20, caracterizado porque el brazo de acoplamiento es una cadena hidrocarbonada saturada que tiene por lo menos dos átomos de carbono, preferentemente por lo menos 2 ó 3 átomos de carbono.
22. Complejo según cualquiera de las reivindicaciones 13 a 21, caracterizado porque el polinucleótido sonda o el polinucleótido diana está fijado al ferroceno y/o al núcleo pirrol del monómero por lo menos, por medio respectivamente del segundo y/o del tercer grupos de enlace y de por lo menos una de las funciones aminadas del polinucleótido sonda o del polinucleótido diana.
23. Sonda electro-activa para la detección y/o la identificación de un ligando, constituida por un polímero homopolímero o copolímero electroactivo de por lo menos dos monómeros y un anti-ligando, caracterizada porque comprende además por lo menos un grupo electro-donante y porque presenta una de las dos estructuras siguientes:
- el grupo electro-donante está unido de manera covalente por un lado al polímero electroactivo y, por otro lado al anti-ligando,
- el grupo electro-donante está unido de manera covalente al anti-ligando, estando dicho anti-ligando unido a su vez de manera covalente al polímero electroactivo,
estando excluidos los complejos electroactivos para los cuales dicho polímero electroactivo es un polipirrol unido de manera covalente, por medio de un grupo (CH2)mCONH(CH2)m'' en el que m y m'' son idénticos o diferentes y son un número entero comprendido entre 1 y 3, a un grupo electro-donante que consiste en un ferroceno, una quinona, un ferroceno o una quinona activado(a) por un éster seleccionado de entre el grupo constituido por COON-hidroxiftalamida, COON-hidroxisuccinimida y COO-pentafluorofenol, estando dicho grupo electro-donante unido a su vez de manera covalente a un anti-ligando.
24. Sonda según la reivindicación 23, caracterizada porque el polímero electroactivo se selecciona de entre el polipirrol, el poliacetileno, la poliazina, el poli(p-fenileno), el poli(p-fenileno vinileno), el polipireno, el politiofeno, el polifurano, el poliselenofeno, la polipiridazina, el policarbazol, la polianilina, y los polinucleótidos bicatenarios.
25. Sonda según la reivindicación 23, caracterizada porque el grupo electro-donante se selecciona de entre el ferroceno, la quinona y los derivados de éstos.
26. Sonda según la reivindicación 23, caracterizada porque el anti-ligando está unido de manera covalente al grupo electro-donante, por medio de un segundo grupo de enlace.
27. Sonda según la reivindicación 23, caracterizada porque el anti-ligando está unido de manera covalente al polímero electroactivo, por medio de un tercer grupo de enlace.
28. Sonda según cualquiera de las reivindicaciones 24 a 26, caracterizada porque los segundo y/o tercer grupos de enlace unen respectivamente el grupo electro-donante al anti-ligando y el anti-ligando al polímero electroactivo, por medio de un brazo de acoplamiento.
29. Sonda según las reivindicaciones 24 y 25, caracterizada porque el polímero electroactivo es el polipirrol constituido por lo menos por dos monómeros que consisten cada uno en un núcleo pirrol, y porque el grupo electro-donante es el ferroceno.
30. Sonda según las reivindicaciones 23 y 29, caracterizada porque el anti-ligando es un polinucleótido sonda, susceptible de hibridar un polinucleótido diana, en unas condiciones de hibridación apropiadas.
31. Sonda según la reivindicación 30, caracterizada porque el polinucleótido sonda está unido al ferroceno y al núcleo pirrol de dicho monómero por lo menos.
32. Sonda según la reivindicación 29, caracterizada porque el núcleo pirrol está sustituido sobre el carbono en posición 3.
33. Sonda según la reivindicación 31, caracterizada porque el polinucleótido sonda está unido sobre el carbono en posición 1 de uno de los núcleos ciclopentadieno del ferroceno.
34. Sonda según la reivindicación 29, caracterizada porque el polipirrol es un copolímero y comprende un monómero cuyo núcleo pirrol está sustituido por un grupo -CH2-COOH o -CH2CH2OH.
35. Sonda según la reivindicación 31, caracterizada porque el segundo grupo de enlace, entre el ferroceno y el polinucleótido sonda es el grupo -CO-.
36. Sonda según la reivindicación 31, caracterizada porque el tercer grupo de enlace entre el polinucleótido sonda y el núcleo pirrol es el grupo -CH2-CO-.
37. Sonda según cualquiera de las reivindicaciones 35 a 36, caracterizada porque los segundo y/o tercer grupos de enlace unen, indirectamente, de forma respectiva, el ferroceno al polinucleótido sonda y el núcleo pirrol al polinucleótido sonda, por medio de un brazo de acoplamiento.
38. Sonda según la reivindicación 37, caracterizada porque el brazo de acoplamiento es una cadena hidrocarbonada saturada que tiene por lo menos dos átomos de carbono, preferentemente por lo menos 2 ó 3 átomos de carbono.
39. Sonda según cualquiera de las reivindicaciones 29 a 38, caracterizada porque el polinucleótido sonda está fijado al ferroceno y/o al núcleo pirrol del monómero por lo menos, por medio respectivamente del segundo y/o del tercer grupo de enlace y de por lo menos una de las funciones aminadas del polinucleótido sonda.
40. Procedimiento para preparar una sonda según la reivindicación 28, caracterizado porque comprende las etapas siguientes:
(a) disponer de un polipirrol homopolímero o copolímero constituido por lo menos por dos monómeros que consisten cada uno en un núcleo pirrol, de los cuales por lo menos uno está sustituido en el carbono en posición 3 por un polinucleótido sonda,
(b) obtener el ferroceno que comprende en el carbono en posición 1 de uno de los núcleos ciclopentadieno, por lo menos un grupo activado o activable, y
(c) poner en contacto el polipirrol homopolímero o copolímero, sustituido por un polinucleótido sonda, con el ferroceno que comprende dicho grupo activado o activable.
41. Procedimiento según la reivindicación 40, caracterizado porque el o los grupos activados o activables del ferroceno, idénticos o diferentes, son un grupo éster activado o activable, y preferentemente el grupo -CO-[N-hidroxi-ftalimida].
42. Procedimiento según cualquiera de las reivindicaciones 40 ó 41, caracterizado porque el o los grupos activados o activables del ferroceno están fijados sobre éste por medio de un brazo de acoplamiento.
43. Electrodo del que la totalidad o parte de la superficie está revestida de una sonda según cualquiera de las reivindicaciones 23 a 39.
44. Utilización de un grupo electro-donante para aumentar la electroactividad de un polímero electroactivo sobre el cual se fija un anti-ligando susceptible de interactuar con un ligando, encontrándose dicho grupo electro-donante sobre el mismo monómero que el anti-ligando.
45. Procedimiento de detección de un ligando en una muestra biológica, que comprende las etapas que consisten en poner en contacto, en unas condiciones de reacción apropiadas para la interacción específica anti-ligando/ligando, una sonda electro- activa para la detección y/o la identificación de dicho ligando, y demostrar o cuantificar una diferencia de potencial o una variación de corriente entre la sonda antes de la puesta en contacto y la sonda después de la puesta en contacto, caracterizado porque dicha sonda está constituida por un polímero homopolímero o copolímero electroactivo de por lo menos dos monómeros y un anti-ligando, estando dicho anti-ligando unido de manera covalente al polímero electroactivo, y dicha sonda comprende además por lo menos un grupo electro-donante unido de manera covalente al anti-ligando, y porque presenta una de las estructuras siguientes:
- el grupo electro-donante está unido de manera covalente por un lado al polímero electroactivo y, por otro lado al anti-ligando,
- el grupo electro-donante está unido de manera covalente al anti-ligando, estando dicho anti-ligando unido a su vez de manera covalente al polímero electroactivo,
estando excluidas las sondas electro-activas para las cuales dicho polímero electroactivo es un polipirrol unido de manera covalente, por medio de un grupo (CH2)mCONH(CH2)m'' en el que m y m'' son idénticos o diferentes y son un número entero comprendido entre 1 y 3, a un grupo electro-donante que consiste en un ferroceno, una quinona, un ferroceno o una quinona activado(a) por un éster seleccionado de entre el grupo constituido por COON-hidroxiftalamida, COON-hidroxisuccinimida y COO-pentafluorofenol, estando dicho grupo electro-donante unido a su vez de manera covalente a un anti-ligando.
46. Procedimiento según la reivindicación 45, caracterizado porque el polímero electroactivo se selecciona de entre el polipirrol, el poliacetileno, la poliazina, el poli(p-fenileno), el poli(p-fenileno vinileno), el polipireno, el politiofeno, el polifurano, el poliselenofeno, la polipiridazina, el policarbazol, la polianilina, y los polinucleótidos bicatenarios.
47. Procedimiento según la reivindicación 45, caracterizado porque el grupo electro-donante se selecciona de entre el ferroceno, la quinona y los derivados de éstos.
48. Procedimiento según la reivindicación 45, caracterizado porque el ligando es una molécula biológica seleccionada en particular de entre los polinucleótidos y los polipéptidos.
49. Procedimiento según la reivindicación 45, caracterizado porque el ligando es un polinucleótido.
50. Procedimiento según la reivindicación 45, caracterizado porque el ligando está marcado mediante un marcador susceptible de generar directa o indirectamente una señal.
51. Procedimiento según la reivindicación 45, caracterizado porque el anti-ligando está unido de manera covalente al grupo electro-donante por medio de un segundo grupo de enlace.
52. Procedimiento según la reivindicación 51, caracterizado porque el segundo grupo de enlace une el grupo electro-donante al anti-ligando por medio de un brazo de acoplamiento.
53. Procedimiento según las reivindicaciones 47 y 48, caracterizado porque el polímero electroactivo es el polipirrol constituido por lo menos por dos monómeros que consisten cada uno en un núcleo pirrol, y porque el grupo electro-donante es el ferroceno.
54. Procedimiento según las reivindicaciones 45 y 53, caracterizado porque el anti-ligando es un polinucleótido sonda, susceptible de hibridar un polinucleótido diana, en unas condiciones de hibridación apropiadas.
55. Procedimiento según la reivindicación 53, caracterizado porque el núcleo pirrol está sustituido sobre el carbono en posición 3.
56. Procedimiento según la reivindicación 53, caracterizado porque el polipirrol es un copolímero y comprende un monómero cuyo núcleo pirrol está sustituido por un grupo -CH2-COOH o -CH2-CH2OH.
57. Procedimiento según la reivindicación 51, caracterizado porque el segundo grupo de enlace, entre el ferroceno y el polinucleótido sonda es el grupo -CO-.
58. Procedimiento según la reivindicación 57, caracterizado porque el segundo grupo de enlace une el ferroceno al polinucleótido sonda por medio de un brazo de acoplamiento.
59. Procedimiento según la reivindicación 58, caracterizado porque el brazo de acoplamiento es una cadena hidrocarbonada saturada que tiene por lo menos dos átomos de carbono, preferentemente por lo menos 2 ó 3 átomos de carbono.
60. Procedimiento según cualquiera de las reivindicaciones 53 a 59, caracterizado porque el polinucleótido sonda está fijado al ferroceno por medio respectivamente del segundo y/o del tercer grupo de enlace y de por lo menos una de las funciones aminadas del polinucleótido sonda.
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Etiqueta de epítopo y método de detección, captura y/o purificación de polipéptidos etiquetados, del 15 de Abril de 2020, de ChromoTek GmbH: Péptido epítopo aislado que tiene de 12 a 25 aminoácidos, en donde la secuencia de aminoácidos comprende una secuencia según se define en SEQ ID NO: 32 (X1X2RX4X5AX7SX9WX11X12), […]
Tira para monitorizar concentraciones de analito, del 8 de Abril de 2020, de Biostrip ApS: Un procedimiento para medir la concentración de al menos un analito C en una muestra líquida, consistiendo dicho procedimiento en: i) aplicar una muestra […]
Ensayo para capturar y detectar células de mieloma múltiple circulantes de la sangre, del 25 de Marzo de 2020, de Menarini Silicon Biosystems S.p.A: Un método para capturar, aislar y analizar células de mieloma múltiple circulantes en una muestra de sangre obtenida de un sujeto de prueba que comprende (a) […]