PROCEDIMIENTO Y KIT DE ANALISIS PARA LA DETERMINACION CUANTITATIVA DE LAS VARIACIONES EN LAS CANTIDADES DE POLINUCLEOTIDOS EN MUESTRAS DE CELULAS O DE TEJIDOS.
Procedimiento para la determinación cuantitativa de las cantidades de más de una de las secuencias de polinucleótido (analitos) diferentes presentes en una muestra de células o de tejido aplicando una hibridación en solución asistida por afinidad,
caracterizado porque el procedimiento comprende las etapas consecutivas siguientes: (a) proporcionar, uno o más conjuntos organizados con un número opcional programado previamente de diferentes secuencias polinucleotídicas solubles (sondas), en el que el número opcional de sondas es más de uno, y las sondas presentan distintos tamaños que permiten su identificación o registro, y opcionalmente una o más etiquetas, que son etiquetas de trazador que permiten el registro directo después de la etapa cuantitativa (e) o dos etiquetas de cebador terminales que permiten la ampliación tras la etapa cuantitativa (e) y etiquetado opcional con un trazador durante o después de la ampliación, estando dispuestos dichos conjuntos de manera organizada en sus propios recipientes que están separados o unidos; (b) proporcionar las secuencias polinucleotídicas (analitos) presentes en una muestra de células o de tejido del organismo diana con por lo menos una etiqueta de afinidad; (c) permitir que tenga lugar una reacción de hibridación entre las sondas solubles de la etapa (a) y los analitos de la etapa (b) que conduce a la formación de híbridos; (d) recuperar los híbridos formados en la etapa (c) capturando dichos híbridos en una herramienta auxiliar de separación proporcionada con el par de afinidad de la etiqueta de afinidad de los analitos; (e) liberar las sondas opcionalmente etiquetadas de los híbridos y de la herramienta auxiliar de separación; (f) registrar el tamaño y la cantidad de las sondas etiquetadas por trazador liberadas opcionalmente no ampliadas o ampliadas.
Tipo: Resumen de patente/invención.
Solicitante: VALTION TEKNILLINEN TUTKIMUSKESKUS.
Nacionalidad solicitante: Finlandia.
Dirección: VUORIMIEHENTIE 5,02150 ESPOO.
Inventor/es: PALOHEIMO, MARJA, SODERLUND, HANS, KATAJA,KARI, ILMEN,MARJA, TAKKINEN,KRISTIINA.
Fecha de Publicación: .
Fecha Concesión Europea: 22 de Agosto de 2007.
Clasificación PCT:
- C12N15/09 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Tecnología del ADN recombinante.
- C12Q1/68 C12 […] › C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS, ÁCIDOS NUCLEICOS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas, ácidos nucleicos o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › en los que intervienen ácidos nucleicos.
- G01N21/78 FISICA. › G01 METROLOGIA; ENSAYOS. › G01N INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION DE SUS PROPIEDADES QUIMICAS O FISICAS (procedimientos de medida, de investigación o de análisis diferentes de los ensayos inmunológicos, en los que intervienen enzimas o microorganismos C12M, C12Q). › G01N 21/00 Investigación o análisis de los materiales por la utilización de medios ópticos, es decir, utilizando rayos infrarrojos, visibles o ultravioletas (G01N 3/00 - G01N 19/00 tienen prioridad). › produciendo un cambio de color.
- G01N27/62 G01N […] › G01N 27/00 Investigación o análisis de materiales mediante el empleo de medios eléctricos, electroquímicos o magnéticos (G01N 3/00 - G01N 25/00 tienen prioridad; medida o ensayo de variables eléctricas o magnéticas o de las propiedades eléctricas o magnéticas de los materiales G01R). › investigando la ionización del gas, p. ej. aerosoles; investigando la descarga eléctrica, p. ej. la emisión catódica.
- G01N30/88 G01N […] › G01N 30/00 Investigación o análisis de materiales por separación en constituyentes utilizando la adsorción, la absorción o fenómenos similares o utilizando el intercambio iónico, p. ej. la cromatografía (G01N 3/00 - G01N 29/00 tienen prioridad). › Sistemas integrados de análisis, especialmente adaptados a este efecto, no cubiertos por uno solo de los grupos G01N 30/04 - G01N 30/86.
- G01N33/483 G01N […] › G01N 33/00 Investigación o análisis de materiales por métodos específicos no cubiertos por los grupos G01N 1/00 - G01N 31/00. › Análisis físico de material biológico.
- G01N33/53 G01N 33/00 […] › Ensayos inmunológicos; Ensayos en los que interviene la formación de uniones bioespecíficas; Materiales a este efecto.
- G01N33/566 G01N 33/00 […] › utilizando un soporte específico o proteínas receptoras como reactivos para la formación de uniones por ligando.
- G01N33/58 G01N 33/00 […] › en los que intervienen sustancias marcadas (G01N 33/53 tiene prioridad).
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