METODO FLUOROMETRICO PARA MONITORIZAR Y DETECTAR LA AMPLIACION DE ACIDOS NUCLEICOS.
Un método para detectar la amplificación de un ácido nucleico en una muestra,
que comprende llevar a cabo la amplificación del ácido nucleico para un polinucleótido diana en presencia de (a) una polimerasa del ácido nucleico, (b) a cebador capaz de hibridarse a dicho polinucleótido diana, y (c) una sonda oligonucleótida capaz de hibridarse a dicho polinucleótido y que comprende una molécula fluorescente donante y una molécula fluorescente aceptora con una separación entre sí de modo que la molécula aceptora reduzca la fluorescencia del donante, y una secuencia monocatenaria reconocida por una enzima de restricción que corte en el lugar de dicha secuencia cuando ésta está en forma bicatenaria, siendo localizada dicha secuencia entre dicha molécula donante y dicha molécula aceptora; aplicar dicha enzima de restricción al producto de amplificación de modo que el producto bicatenario de amplificación se escinda para liberar la molécula aceptora de la molécula donante; y detectar una señal fluorescente de la muestra, en donde dicha sonda oligonucleótida es capaz de hibridarse a dicho polinucleótido diana en la región del extremo 3 de dicho polinucleótido de modo que el extremo 3 del polinucleótido pueda extenderse durante la amplificación para proporcionar una región complementaria con la sonda oligonucleótida.
Tipo: Resumen de patente/invención.
Solicitante: THE SECRETARY OF STATE FOR DEFENCE.
Nacionalidad solicitante: Reino Unido.
Dirección: DEFENCE EVALUATION AND RESEARCH AGENCY, IVELY ROAD,FARNBOROUGH, HAMPSHIRE GU14.
Inventor/es: LEE, MARTIN, ALAN.
Fecha de Publicación: .
Fecha Solicitud PCT: 27 de Noviembre de 1998.
Fecha Concesión Europea: 10 de Mayo de 2006.
Clasificación Internacional de Patentes:
- C12Q1/68 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS, ÁCIDOS NUCLEICOS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas, ácidos nucleicos o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › en los que intervienen ácidos nucleicos.
Países PCT: Austria, Bélgica, Suiza, Alemania, Dinamarca, España, Francia, Reino Unido, Italia, Liechtensein, Luxemburgo, Países Bajos, Suecia, Portugal, Irlanda, Finlandia, Oficina Europea de Patentes, Armenia, Azerbayán, Bielorusia, Ghana, Gambia, Kenya, Kirguistán, Kazajstán, Lesotho, República del Moldova, Malawi, Federación de Rusia, Sudán, Tayikistán, Turkmenistán, Uganda, Zimbabwe, Burkina Faso, Benin, República Centroafricana, Congo, Costa de Marfil, Camerún, Gabón, Guinea, Malí, Mauritania, Niger, Senegal, Chad, Togo, Organización Regional Africana de la Propiedad Industrial, Swazilandia, Guinea-Bissau, Organización Africana de la Propiedad Intelectual, Organización Eurasiática de Patentes.
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