MONITORIZACION DE LA HIBRIDACION DURANTE LA PCR.
Método de monitorización a tiempo real de la amplificación de una secuencia de ácidos nucleicos diana en una muestra biológica,
comprendiendo dicho método las etapas de: la amplificación de la secuencia objetivo por la reacción en cadena de la polimerasa en presencia de una cantidad de SYBR Green I, comprendiendo dicha reacción en cadena de la polimerasa las etapas de adición a la muestra biológica de SYBR Green I, una polimerasa termoestable y cebadores para la secuencia de ácidos nucleicos diana para crear una mezcla de amplificación y el ciclado térmico de la mezcla de amplificación entre, como mínimo, una temperatura de desnaturalización y una temperatura de elongación durante un conjunto de ciclos de amplificación; y la iluminación de la mezcla con una luz a una longitud de onda absorbida por el SYBR Green I en, como mínimo, una parte del conjunto de ciclos de amplificación, y la detección de una emisión fluorescente del SYBR Green I tras la iluminación de la muestra, estando relacionada dicha emisión fluorescente con la cantidad de ácido nucleico diana amplificado en la muestra, o bien, la iluminación de la muestra con una luz a una longitud de onda absorbida por el SYBR Green I posterior a, como mínimo, una parte del conjunto de ciclos de amplificación, y la monitorización de la emisión fluorescente del SYBR Green I en la muestra en función de la temperatura de la muestra para generar una curva de fusión para la secuencia diana amplificada.
Tipo: Resumen de patente/invención.
Solicitante: UNIVERSITY OF UTAH RESEARCH FOUNDATION.
Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.
Dirección: 210 PARK BUILDING,SALT LAKE CITY, UTAH 84112.
Inventor/es: WITTWER, CARL, T., RASMUSSEN, RANDY P., RIRIE, KIRK M..
Fecha de Publicación: .
Fecha Concesión Europea: 11 de Mayo de 2005.
Clasificación Internacional de Patentes:
- C12Q1/68 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS, ÁCIDOS NUCLEICOS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas, ácidos nucleicos o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › en los que intervienen ácidos nucleicos.
- G01N33/58 FISICA. › G01 METROLOGIA; ENSAYOS. › G01N INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION DE SUS PROPIEDADES QUIMICAS O FISICAS (procedimientos de medida, de investigación o de análisis diferentes de los ensayos inmunológicos, en los que intervienen enzimas o microorganismos C12M, C12Q). › G01N 33/00 Investigación o análisis de materiales por métodos específicos no cubiertos por los grupos G01N 1/00 - G01N 31/00. › en los que intervienen sustancias marcadas (G01N 33/53 tiene prioridad).
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