PURIFICACION DE UNA PROTEINA DE MEMBRANA EXTERNA DE PERTUSSIS.

SE RECUPERA LA PERTACTINA (ANTERIORMENTE PROTEINA 69 KDA) EN UNA FORMA BIOLOGICAMENTE PURA ESTABLE SIN ACTIVIDAD DETECTABLE DE CICLASA DE ADENILATO A PARTIR DEL CALDO DE FERMENTACION DEL BORDETELLA PERTUSSI ASI COMO A PARTIR DE CELULAS.

SE TRATA EL CALDO PARA EXTRAER SELECTIVAMENTE LA TOXINA PERTUSSI (TP) Y LA HEMAGLUTININA FILAMENTOSA (HAF), SE PRECIPITA LA PERTACTINA CON SULFATO DE AMONIO Y SE DISUELVE EL PRECIPITADO EN TAMPON A UN PH DE 0,6 A 8,5, A CONTINUACION SE PASA LA DISOLUCION A TRAVES DE HIDROXIAPATITA Y A LAS COLUMNAS CROMATOGRAFICAS DE Q-SEPHAROSE ANTES DE LA ULTRAFILTRACION FINAL. SE EXTRAEN LAS CELULAS CON UREA Y EL EXTRACTO ULTRAFILTRADO Y DIAFILTRADO. SE PRECIPITA LA PERTACTINA A PARTIR DEL EXTRACTO Y SE PROCESA EL PRECIPITADO DE LA FORMA DESCRITA ANTERIORMENTE. EN UNA VARIACION, SE PONE EN CONTACTO EL CALDO CON SULFATO DE AMONIO PARA PRECIPITAR LA PERTACTINA, LA TP Y LA HAF, SE DISUELVE EL PRECIPITADO Y SE EXTRAEN SELECTIVAMENTE LA TP Y LA HAF ANTES DE PASAR LA DISOLUCION A LAS COLUMNAS CROMATOGRAFICAS.

Tipo: Resumen de patente/invención.

Solicitante: CONNAUGHT LABORATORIES INC.

Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.

Dirección: ROUTE 611, P.O.BOX 187, SWIFTWATER PENNSYLVANIA 183.

Inventor/es: KLEIN, MICHEL, CHONG, PELE, JACKSON, GAIL, FAHIM, RAAFAT, TAN, LARRY, VOSE, JOHN.

Fecha de Publicación: 16 de Mayo de 1997.

Fecha Solicitud PCT: 3 de Abril de 1991.

Fecha Concesión Europea: 15 de Enero de 1997.

Clasificación Internacional de Patentes:

A61K39/10 NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA. › A61 CIENCIAS MEDICAS O VETERINARIAS; HIGIENE. › A61K PREPARACIONES DE USO MEDICO, DENTAL O PARA EL ASEO (dispositivos o métodos especialmente concebidos para conferir a los productos farmacéuticos una forma física o de administración particular A61J 3/00; aspectos químicos o utilización de substancias químicas para, la desodorización del aire, la desinfección o la esterilización, vendas, apósitos, almohadillas absorbentes o de los artículos para su realización A61L; composiciones a base de jabón C11D). › A61K 39/00 Preparaciones medicinales que contienen antígenos o anticuerpos (materiales para ensayos inmunológicos G01N 33/53). › Brucella; Bordetella, p. ej. Bordetella pertussis.
C07K1/14 QUIMICA; METALURGIA. › C07 QUIMICA ORGANICA. › C07K PEPTIDOS (péptidos que contienen β -anillos lactamas C07D; ipéptidos cíclicos que no tienen en su molécula ningún otro enlace peptídico más que los que forman su ciclo, p. ej. piperazina diones-2,5, C07D; alcaloides del cornezuelo del centeno de tipo péptido cíclico C07D 519/02; proteínas monocelulares, enzimas C12N; procedimientos de obtención de péptidos por ingeniería genética C12N 15/00). › C07K 1/00 Procedimientos generales de preparación de péptidos. › Extracción; Separación; Purificación.
C07K1/36 C07K 1/00 […] › por una combinación de varios procesos de diferentes tipos.
C07K14/235 C07K […] › C07K 14/00 Péptidos con más de 20 aminoácidos; Gastrinas; Somatostatinas; Melanotropinas; Sus derivados. › de Bordetella (G).

Países PCT: Austria, Bélgica, Suiza, Alemania, Dinamarca, España, Francia, Reino Unido, Grecia, Italia, Liechtensein, Luxemburgo, Países Bajos, Suecia, Oficina Europea de Patentes, Canadá, Japón, Estados Unidos de América.

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