Inventos patentados en España.

Inventos patentados en España.

Inventos patentados en España en los últimos 80 años. Clasificación Internacional de Patentes CIP 2013.

COMPUESTOS BIFENILICOS COMO AGONISTAS SELECTIVOS PARA RECEPTORES GAMMA-RAR.

Resumen:

Compuestos bifenílicos de fórmula (I) **(Ver fórmula)** donde n es un número entero comprendido entre 1 y 3 inclusive, así como las sales de los compuestos de fórmula

(I).

Solicitante: GALDERMA RESEARCH & DEVELOPMENT.

Nacionalidad solicitante: Francia.

Dirección: LES TEMPLIERS 2400 ROUTE DES COLLES,06410 BIOT.

Inventor/es: BIADATTI, THIBAUD, THOREAU, ETIENNE.

Fecha de Publicación de la Concesión: 4 de Enero de 2010.

Fecha Concesión Europea: 9 de Septiembre de 2009.

Clasificación PCT: A61P17/06 (.para el tratamiento de la psoriasis [7]), A61P17/00 (Medicamentos para el tratamiento de problemas dermatológicos [7 ]), A61K31/192 (...que tienen grupos aromáticos, p. ej. sulindac, ácidos 2-aril-propiónicos, ácido etacrínico [7]), A61P17/10 (.Preparados contra el acné [7]), C07C65/26 (...que contienen ciclos distintos a los ciclos aromáticos de seis miembros [3]).

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COMPUESTOS BIFENILICOS COMO AGONISTAS SELECTIVOS PARA RECEPTORES GAMMA-RAR.
Descripción:

Compuestos bifenílicos como agonistas selectivos para receptores gamma-RAR.

La presente invención se relaciona con la utilización en terapia, especialmente en el campo de la dermatología, de compuestos bifenílicos substituidos por un radical aromático con actividad selectiva para el subtipo gamma de la familia de los receptores RAR.

Se describió una familia de compuestos bifenílicos en la solicitud de patente WO 99/10308. Estos compuestos son descritos como poseedores de una aplicación en el tratamiento tópico y sistémico de las afecciones dermatológicas ligadas a un trastorno de la queratinización y de las afecciones oftalmológicas especialmente.

La actividad de estos compuestos ha sido especialmente puesta en evidencia por pruebas de diferenciación de las células F9 de teratocarcinoma embrionario del ratón y pruebas de diferenciación de los queratinocitos en el hombre.

Por el contrario, este documento no tiene en cuenta en absoluto una eventual actividad específica de los compuestos frente al subtipo gamma de los receptores RAR.

En efecto, el subtipo gamma de la familia de los receptores RAR es con mucho mayoritario en la epidermis, donde representa aproximadamente un 90% del total de los receptores ("Retinoic acid receptors and binding proteins in human skin", Elder JT, Astrom A, Pettersson U, Tavakkol A, Krust A, Kastner P, Chambon P, Voorhees JJ: J. Invest. Dermatol. 1992; 98 (6 Supl.): 36S-41S; o: "Retinoic acid receptor expression in human skin keratinocytes and dermal fibroblasts in vitro", Redfern CP, Todd C. J. Cell Sci. 1992; 102 (Pt. 1): 113-21) y es la interacción con este receptor RAR gamma la responsable de la eficacia de los retinoides sobre la epidermis ("Retinoic acid receptor gamma mediates topical retinoid efficacy and irritation in animal models", Chen S, Ostrowski J, Whiting G, Roalsvig T, Hammer L, Currier SJ, Honeyman J, Kwasniewski B, Yu KL, Sterzycki R y col. J. Invest. Dermatol. 1995; 104 (5): 779-83).

La patente WO 2005/056516 divulga compuestos bifenílicos que actúan específicamente sobre los receptores RAR-gamma. Estos compuestos son utilizados en las enfermedades dermatológicas que implican a estos receptores.

Los receptores RAR gamma son, pues, el único objetivo en el tratamiento de patologías a nivel de la epidermis, como por ejemplo para el acné o la psoriasis o cualquier otra patología cutánea tratada mediante los retinoides.

Por otra parte, se pueden evitar ciertos efectos secundarios propios de los RAR alfa o RAR beta si se utilizan compuestos que tienen una acción selectiva sobre RAR gamma.

Sorprendentemente, se ha mostrado ahora que los compuestos según la invención presentan una actividad agonista selectiva para el subtipo gamma de la familia de los receptores RAR extremadamente interesante.

Los compuestos según la invención, agonistas selectivos del subtipo RAR gamma, permiten así prevenir y/o tratar diversas patologías o trastornos dermatológicos, disminuyendo los efectos secundarios habitualmente debidos a la acción de los principios activos sobre los subtipos RAR alfa y beta.

La presente invención tiene, pues, por primer objeto compuestos que pueden ser representados por la fórmula general siguiente:


donde n es un número entero comprendido entre 1 y 3 inclusive, por lo tanto igual a 1, 2 ó 3, así como las sales de los compuestos de fórmula (I).

Según una forma de realización preferida, n es igual a 2 ó 3 y los compuestos de fórmula (I) preferidos son seleccionados entre el ácido 4'-(3-hidroxipropoxi)-3'-(5,5,8,8-tetrametil-5,6,7,8-tetrahidronaftalen-2-il)bifenil-4-carboxílico y el ácido 4'-(4-hidroxibutoxi)-3'-(5,5,8,8-tetrametil-5,6,7,8-tetrahidronaftalen-2-il)-bifenil-4-carboxílico.

Por sal farmacéuticamente aceptable, se entiende especialmente una sal de metal alcalino o una sal alcalinotérrea, o una sal de amina orgánica.

La invención contempla igualmente la utilización de al menos un compuesto de fórmula (I) para la preparación de una composición farmacéutica o cosmética destinada a prevenir y/o tratar patologías para las cuales se desea una actividad agonista selectiva para el subtipo gamma de la familia de los receptores RAR.

Se representa una vía de síntesis general para preparar los compuestos de fórmula (I) en el esquema según la figura 1.

Las materias primas y/o los reactivos utilizados son de disponibilidad comercial y/o pueden ser preparados según métodos conocidos de la literatura.

Según otro aspecto, la presente invención se relaciona igualmente con un procedimiento de preparación de los compuestos de fórmula (I) antes descritos consistente en las etapas siguientes:

i) reacción de copulación, por ejemplo de tipo copulación de Suzuki entre el compuesto de fórmula 1 preparado por ejemplo como se describe en la solicitud de patente WO 99/10308:


y el compuesto de fórmula 2 preparado por ejemplo como se describe en la solicitud de patente WO 99/10308:


para dar lugar al compuesto de fórmula 3,


ii) reacción de eterificación, por ejemplo del tipo eterificación de Williamson o similar (véase, por ejemplo, Lerman, L y col.; Synthesis 2004, (18), 3043-3046), del compuesto de fórmula 3 con el compuesto de fórmula 4,


donde X representa un grupo saliente que permite una substitución nucleofílica, como por ejemplo un halógeno (preferiblemente un átomo de yodo o de bromo); R representa un hidrógeno o un grupo protector apropiado, tal como se describe en "Protective groups in organic synthesis" (Greene & Wuts, Wiley-Interscience 1991), por ejemplo acetilo o dimetil-terc-butilsililo, y n es un número entero comprendido entre 1 y 3, preferiblemente 2 ó 3, para dar lugar al compuesto de fórmula 5,


iii) en el caso de que R sea diferente de H, esta reacción ii) va seguida de una reacción de desprotección de la función alcohol del compuesto de fórmula 5 para dar lugar al compuesto de fórmula 6,


iv) saponificación de la función éster del compuesto obtenido en la etapa anterior, es decir, en la etapa ii) para los casos en que R=H o en la etapa iii) para los casos en que R es diferente de H, para dar lugar al compuesto de fórmula (I) correspondiente (compuesto 7 en la figura 1).

La etapa i) puede ser, por ejemplo, realizada en presencia de carbonato de potasio, de tetrakis(trifenilfosfino)paladio en una solución de tolueno.

La etapa ii) puede ser, por ejemplo, realizada en presencia de carbonato de cesio y de dimetilformamida y eventualmente de yoduro de potasio.

La etapa iii) puede ser realizada conforme a las reacciones de desprotección descritas en "Protective groups in organic synthesis" (Greene & Wuts, Wiley-Interscience 1991).

La etapa iv) puede ser, por ejemplo, realizada en presencia de hidróxido de sodio y de THF.

La presente invención tiene igualmente por objeto los compuestos de fórmula (I) tales como los antes descritos a modo de medicamento.

Según otro aspecto, la invención tiene por objeto una composición farmacéutica o cosmética caracterizada por incluir, en un vehículo farmacéutica o cosméticamente aceptable, al menos un compuesto de fórmula (I).

Por "vehículo farmacéutica o cosméticamente aceptable", se entiende un vehículo adaptado para una utilización en contacto con células humanas y de animales, sin toxicidad, irritación, respuesta alérgica indebida y similares, y que guarde proporción con una razón ventaja/riesgo razonable.

Se puede efectuar la administración por vía tópica, enteral u oral, parenteral u ocular. Entre estas vías de administración, la vía tópica resulta particularmente preferida.

Por vía tópica, la composición farmacéutica según la invención está más particularmente destinada al tratamiento de la piel y de las mucosas y puede presentarse en forma líquida, pastosa o sólida y más particularmente en forma de ungüentos, de cremas, de leches, de pomadas, de polvos, de tampones embebidos, de syndets, de soluciones, de geles, de sprays, de espumas, de suspensiones, de barras, de champúes o de bases de lavado. Puede también presentarse en forma de suspensiones de microesferas o nanoesferas o de vesículas lipídicas o poliméricas o de parches poliméricos o gelificados que permitan una liberación controlada.

Los compuestos son utilizados por vía tópica a una concentración generalmente comprendida entre el 0,001% y el 3% en peso, con respecto al peso total de la composición.

Para una aplicación cosmética, la composición está preferentemente en forma de crema, de leche, de loción, de gel, de microesferas o nanoesferas o vesículas lipídicas o poliméricas, de jabón o de champú.

Por vía enteral u oral, la composición puede presentarse en forma de comprimidos, de cápsulas, de grageas, de jarabes, de suspensiones, de soluciones, de polvos, de granulados, de emulsiones o de suspensiones de microesferas o nanoesferas o de vesículas lipídicas o poliméricas que permitan una liberación controlada. Por vía parenteral, la composición puede presentarse en forma de soluciones o suspensiones para perfusión o para inyección.

Los compuestos según la invención son generalmente administrados a una dosis diaria de aproximadamente 0,01 mg/kg a 30 mg/kg de peso corporal, en 1 a 3 tomas.

Los compuestos de la invención son útiles, solos o en mezcla, para la preparación de una composición farmacéutica destinada al tratamiento y/o a la prevención de patologías ligadas a una deficiencia de la activación del receptor RAR gamma.

La invención se relaciona igualmente con un método de tratamiento terapéutico o cosmético, consistente en la administración de una composición farmacéutica o cosmética que incluye al menos un compuesto de fórmula (I), cuyo compuesto ejerce una actividad agonista selectiva del receptor RAR gamma.

La composición farmacéutica puede estar más particularmente destinada a tratar una patología para cuyo tratamiento se desea una actividad agonista selectiva del receptor RAR gamma, más particularmente a nivel de los tejidos epiteliales, de la piel y de los huesos.

La composición es también útil para el tratamiento de una patología ligada a los trastornos de la diferenciación y/o de la proliferación celular, en particular en el campo de la dermatología.

Más particularmente, es útil para el tratamiento de una patología ligada a un trastorno de la queratinización.

Se contempla así el tratamiento del acné, especialmente los acnés vulgares, comedonianos y polimórficos, los acnés noduloquísticos, los conglobata, los acnés seniles y los acnés secundarios, tales como el solar, el medicamentoso y el profesional.

La composición farmacéutica que incluye un compuesto de fórmula (I) es igualmente útil para tratar otras afecciones dermatológicas ligadas a una alteración de la queratinización con un componente inflamatorio y/o inmunoalérgico y especialmente todas las formas de psoriasis, ya sea cutánea, mucosa o ungueal.

Un compuesto según la invención es también útil en una composición cosmética para luchar contra el envejecimiento cutáneo, ya sea, por ejemplo, fotoinducido o cronológico.

La composición farmacéutica o cosmética puede permitir además la regulación de las pigmentaciones de la piel y el tratamiento de las queratosis actínicas.

En todas las aplicaciones contempladas, dicho compuesto puede asociarse a otro agente terapéutico útil en el tratamiento de una patología ligada a los trastornos de la diferenciación o de la proliferación celular.

Como agentes terapéuticos utilizables en las composiciones según la invención, se pueden citar los agentes que modulan la diferenciación y/o la proliferación y/o la pigmentación cutánea, tales como el ácido retinoico y sus isómeros, el retinol y sus ésteres, el retinal, los retinoides, los estrógenos, los antibacterianos, los antibióticos, los antiparasitarios, los antifúngicos, los agentes antiinflamatorios esteroideos o no esteroideos, los agentes anestésicos, los agentes antipruriginosos, los agentes antivíricos, los agentes queratolíticos, los agentes antirradicales libres, los antiseborreicos, los anticaspa, los antiacneicos, los agentes para luchar contra la caída del cabello y la vitamina C y sus derivados, a condición, como se ha indicado anteriormente, de que los principios activos estén en forma solubilizada en la composición según la invención.

Los ejemplos siguientes ilustran la invención sin, no obstante, limitarla. Los productos de partida utilizados son productos conocidos o preparados según modos operativos conocidos.

En los ejemplos siguientes, se analizaron las muestras por 1H RMN y 13C RMN y HPLC/MS.

Ejemplo 1

Síntesis del ácido 4'-(3-hidroxi-propoxi)-3'-(5,5,8,8-tetrametil-5,6,7,8-tetrahidronaftalen-2-il)bifenil-4-carboxílico

a) 4'-Hidroxi-3'-(5,5,8,8-tetrametil-5,6,7,8-tetrahidronaftalen-2-il)bifenil-4-carboxilato de etilo

En un matraz de tres bocas, se ponen 10 g (31 mmol) de 3'-bromo-4'-hidroxibifenil-4-carboxilato de etilo (preparado según EP952974), 8,7 g (37 mmol) de ácido 6-(1,1,4,4-tetrametil-1,2,3,4-tetrahidronaftalen)borónico (preparado según EP952974) y 34 mL (74,6 mmol) de una solución acuosa 2M de carbonato de potasio en 200 mL de tolueno y se añaden luego 1,8 g (1,55 mmol) de tetrakis(trifenilfosfino)paladio bajo nitrógeno. Se calienta la mezcla de reacción durante 24 h a 110ºC. Después de enfriar, se detiene la reacción por adición de 200 mL de agua y se extrae luego con acetato de etilo. Se juntan las fases orgánicas, se lavan con una solución de cloruro de sodio saturada y se secan sobre sulfato de magnesio. Se evaporan los solventes y se cromatografía después el residuo en gel de sílice (heptano/acetato de etilo 80/20). Se obtienen 8 g de 4'-hidroxi-3'-(5,5,8,8-tetra-metil-5,6,7,8-tetrahidronaftalen-2-il)bifenil-4-carboxilato de etilo en forma de un sólido blanco (rendimiento = 60%).

b) 4'-[4-(terc-Butildimetilsilaniloxi)propoxi]-3'-(5,5,8,8-tetrametil-5,6,7,8-tetrahidronaftalen-2-il)bifenil-4-car- boxilato de etilo

En un matraz de tres bocas, se introduce una solución de 2,1 g (4,9 mmol) de 4'-hidroxi-3'-(5,5,8,8-tetrametil-5,6,7,8-tetrahidronaftalen-2-il)bifenil-4-carboxilato de etilo en 24 mL de dimetilformamida y se añaden luego 1,9 g (5,9 mmol) de carbonato de cesio, 1,33 mL (5,9 mmol) de terc-butil-(4-yodopropoxi)dimetilsilano y 0,24 g (1,44 mmol) de yoduro de potasio. Se calienta la mezcla de reacción durante 6 h a 80ºC. Después de enfriar, se filtra la mezcla de reacción para eliminar el carbonato de cesio (aclarado con acetato de etilo). Se evapora el filtrado a vacío. Se cromatografía el producto bruto obtenido en forma de aceite en gel de sílice (heptano/acetato de etilo: 95/5) para obtener 2,75 g de 4'-[4-(terc-butildimetilsilaniloxi)propoxi]-3'-(5,5,8,8-tetrametil-5,6,7,8-tetrahidronaftalen-2-il)bifenil-4-carboxilato de etilo en forma de un aceite incoloro (rendimiento = 93%).

c) 4'-(3-Hidroxipropoxi)-3'-(5,5,8,8-tetrametil-5,6,7,8-tetrahidronaftalen-2-il)bifenil-4-carboxilato de etilo

En un matraz de tres bocas, se añaden 6,9 mL (6,9 mmol) de una solución de fluoruro de tetrabutilamonio (1 M) a una solución de 2,75 g (4,6 mmol) de 4'-[3-(terc-butildimetilsilaniloxi)propoxi]-3'-(5,5,8,8-tetra-metil-5,6,7,8-tetrahidronaftalen-2-il)bifenil-4-carboxilato de etilo en 20 mL de tetrahidrofurano. Se agita la mezcla de reacción durante 4 h a temperatura ambiente. Se detiene la reacción por adición de 20 mL de agua y se extrae después con acetato de etilo. Se juntan las fases orgánicas, se lavan con una solución acuosa de cloruro de sodio saturada y se secan sobre sulfato de magnesio. Se evaporan los solventes. Se cromatografía el producto bruto obtenido en forma de aceite en gel de sílice (heptano/acetato de etilo: 70/30) para obtener 2 g de 4'-(3-hidroxipropoxi)-3'-(5,5,8,8-tetrametil-5,6,7,8-tetrahidro-naftalen-2-il)bifenil-4-carboxilato de etilo en forma de un aceite incoloro (rendimiento = 89%).

d) Ácido 4'-(3-hidroxipropoxi)-3'-(5,5,8,8-tetrametil-5,6,7,8-tetrahidronaftalen-2-il)bifenil-4-carboxílico

Se añaden 2,05 mL (2,05 mmol) de una solución acuosa de hidróxido de sodio (1 M) a una solución de 0,20 g (0,41 mmol) de 4'-(3-hidroxipropoxi)-3'-(5,5,8,8-tetra-metil-5,6,7,8-tetrahidronaftalen-2-il)bifenil-4-carboxilato de etilo en 5 mL de tetrahidrofurano. Se agita la mezcla de reacción durante 48 h calentando a 40ºC. Se pone la mezcla de reacción bajo un flujo de nitrógeno con el fin de eliminar el tetrahidrofurano y se añaden luego 2,5 mL (2,5 mmol) de una solución de ácido clorhídrico (1 M). El producto precipita en forma de un sólido blanco. Tras la filtración, se lava el producto dos veces con 5 mL de éter dietílico y se pone después en la estufa a vacío durante una noche. Se obtienen 0,17 g de ácido 4'-(3-hidroxipropoxi)-3'-(5,5,8,8-tetrametil-5,6,7,8-tetrahi-dronaftalen-2-il)bifenil-4-carboxílico (sólido blanco, pf = 317ºC, rendimiento = 90%).

1H RMN (DMSO, 400 MHz): 1,26 (s, 12H); 1,6 (s, 4H); 1,90 (t, J = 6,2 Hz, 2H); 3,8 (t, J = 6,0 Hz, 2H); 4,09 (t, J = 6,3 Hz, 2H); 7,05 (d, J = 9,2 Hz, 1H); 7,25-7,29 (m, 2H); 7,50-7,52 (m, 5H); 8,01 (d, J = 8,2 Hz, 2H).

Ejemplo 2

Síntesis del ácido 4'-(4-hidroxi-butoxi)-3'-(5,5,8,8-tetrametil-5,6,7,8-tetrahidronaftalen-2-il)bifenil-4-carboxílico

a) 4'-[4-(terc-Butildimetilsilaniloxi)butoxi]-3'-(5,5,8,8-tetrametil-5,6,7,8-tetrahidronaftalen-2-il)bifenil-4-carboxilato de etilo

En un matraz de tres bocas, se introduce una solución de 2,1 g (4,9 mmol) de 4'-hidroxi-3'-(5,5,8,8-tetrametil-5,6,7,8-tetrahidronaftalen-2-il)bifenil-4-carboxilato de etilo (preparado según el ejemplo 1, etapa a) en 24 mL de dimetilformamida y se añaden luego 1,9 g (5,9 mmol) de carbonato de cesio y 1,53 mL (5,9 mmol) de terc-butil(4-yodobutoxi)dimetilsilano. Se calienta la mezcla de reacción durante 6 h a 80ºC. Después de enfriar, se filtra la mezcla de reacción para eliminar el carbonato de cesio (aclarado con acetato de etilo). Se evapora el filtrado a vacío. Se cromatografía el producto bruto obtenido en forma de aceite en gel de sílice (heptano/acetato de etilo: 95/5) para obtener 2,8 g de 4'-[4-(terc-butildimetilsilaniloxi)butoxi]-3'-(5,5,8,8-tetrametil-5,6,7,8-tetrahidronaftalen-2-il)bifenil-4-carboxilato de etilo en forma de un aceite incoloro (rendimiento = 93%).

b) 4'-(4-Hidroxibutoxi)-3'-(5,5,8,8-tetrametil-5,6,7,8-tetrahidronaftalen-2-il)bifenil-4-carboxilato de etilo

Se añaden 6,8 mL (6,8 mmol) de una solución de fluoruro de tetrabutilamonio (1 M) a una solución de 2,8 g (4,5 mmol) de 4'-[4-(terc-butildimetilsilaniloxi)-butoxi]-3'-(5,5,8,8-tetrametil-5,6,7,8-tetrahidronaftalen-2-il)bifenil-4-carboxilato de etilo en 20 mL de tetrahidrofurano. Se agita la mezcla de reacción durante 4 h a temperatura ambiente. Se detiene la reacción por adición de 20 mL de agua y se extrae después con acetato de etilo. Se juntan las fases orgánicas, se lavan con una solución acuosa de cloruro de sodio saturada y se secan sobre sulfato de magnesio. Se evaporan los solventes. Se cromatografía el producto bruto obtenido en forma de aceite en gel de sílice (heptano/acetato de etilo: 70/30) para obtener 2,10 g de 4'-(4-hidroxibutoxi)-3'-(5,5,8,8-tetrametil-5,6,7,8-tetrahidronaftalen-2-il)bifenil-4-carboxilato de etilo en forma de un aceite incoloro (rendimiento = 93%).

c) Ácido 4'-(4-hidroxibutoxi)-3'-(5,5,8,8-tetrametil-5,6,7,8-tetrahidronaftalen-2-il)bifenil-4-carboxílico

Se añaden 2 mL (2,0 mmol) de una solución acuosa de hidróxido de sodio (1 M) a una solución de 0,20 g (0,40 mmol) de 4'-(4-hidroxibutoxi)-3'-(5,5,8,8-tetra-metil-5,6,7,8-tetrahidronaftalen-2-il)bifenil-4-carboxilato de etilo en 8 mL de tetrahidrofurano. Se agita la mezcla de reacción durante 48 h calentando a 40ºC. Se pone la mezcla de reacción bajo un flujo de nitrógeno con el fin de eliminar el tetrahidrofurano y se añaden luego 2,4 mL (2,4 mmol) de una solución de ácido clorhídrico (1 M). El producto precipita en forma de un sólido blanco. Después de filtrar, se lava el producto dos veces con 5 mL de éter dietílico y se seca luego en la estufa a vacío durante una noche. Se obtienen 0,17 g de ácido 4'-(4-hidroxibutoxi)-3'-(5,5,8,8-tetrametil-5,6,7,8-tetrahidro-naftalen-2-il)bifenil-4-carboxílico (sólido blanco, pf = 235ºC, rendimiento = 90%).

1H RMN (DMSO, 400 MHz): 1,24 (s, 12H); 1,56 (m, 2H); 1,64 (s, 4H); 1,78 (m, 2H); 3,48 (t, J = 6,4 Hz, 2H); 3,99 (t, J = 6,5 Hz, 2H); 7,60 (d, J = 8,5 Hz, 1H); 7,24-7,27 (m, 2H); 7,46-7,53 (m, 5H); 8,01 (d, J = 8,3 Hz, 2H).

Ejemplo 3

Prueba de transactivación

a) Principio de la prueba

La activación de los receptores por un agonista (activador) en células HeLa conduce a la expresión de un gen informador, la luciferasa, que, en presencia de un substrato, genera luz. Se puede, pues, medir la activación de los receptores cuantificando la luminiscencia producida tras incubación de las células en presencia de un antagonista de referencia. Los productos activadores desplazan el antagonista de su sitio, permitiendo así la activación del receptor. Se realiza la medición de la actividad por cuantificación del aumento de la luz producida. Esta medición permite determinar la actividad activadora del compuesto útil en la invención.

En este estudio, se determina una constante que representa la afinidad de la molécula por el receptor. Al poder fluctuar este valor según la actividad basal y la expresión del receptor, se la designa Kd aparente (KdApp).

Para determinar esta constante, se realizan "curvas cruzadas" del producto de ensayo (por ejemplo el ácido 4'-(3-hidroxipropoxi)-3'-(5,5,8,8-tetrametil-5,6,7,8-tetrahidronaftalen-2-il)bifenil-4-carboxílico o el ácido 4'-(4-hidroxibutoxi)-3'-(5,5,8,8-tetrametil-5,6,7,8-tetrahidronaftalen-2-il)bifenil-4-carboxílico) frente a un antagonista de referencia también llamado ligando de referencia, el ácido 4-(5,5-dimetil-8-p-tolil-5,6-dihidronaftalen-2-iletinil)benzoico. Se utiliza el producto de ensayo a 10 concentraciones y el antagonista de referencia a 7 concentraciones. En cada pocillo (de una placa de 96 pocillos), las células están en contacto con una concentración del producto de ensayo y con una concentración del antagonista de referencia.

Se realizan igualmente mediciones para los controles de agonista total, también llamado agonista del 100%, (el ácido 4-[2-(5,5,8,8-tetrametil-5,6,7,8-tetrahidronaftalen-2-il)propenil]benzoico) y de agonista inverso, también llamado control del 0%, (el ácido 4-{(E)-3-[4-(4-terc-butilfenil)-5,5,8,8-tetrametil-5,6,7,8-tetra-hidronaftalen-2-il]-3-oxopropenil}benzoico).

Estas curvas cruzadas permiten determinar las CA50 (concentración a la cual se observa un 50% de activación del receptor) del ligando de referencia a diferentes concentraciones de producto de ensayo. Se utilizan estas CA50 para calcular la regresión de Schild trazando una recta que responde a la ecuación de Schild ("Quantitation in receptor pharmacology", Terry P. Kenakin, Receptors and Channels, 2001, 7, 371-385).

En el caso de un agonista, la CA50 es calculada trazando la curva del producto a la concentración del ligando de referencia que da un 80% de activación. Se mide igualmente el porcentaje de activación que corresponde al nivel máximo de actividad obtenido.

b) Materiales y método

Las líneas celulares HeLa utilizadas son transfectantes estables que contienen los plásmidos ERE-ßGlob-Luc-SV-Neo (gen informador) y RAR (a, ß, ?) ER-DBD-puro. Se siembran estas células en placas de 96 pocillos a razón de 10.000 células por pocillo en 100 µl de medio DMEM sin rojo de fenol y suplementado con un 10% de suero de ternera deslipidado. Se incuban entonces las placas a 37ºC con un 7% de CO2 durante 4 horas.

Las diferentes diluciones del producto de ensayo, del ligando de referencia (el ácido 4-(5,5-dimetil-8-p-tolil-5,6-dihidronaftalen-2-iletinil)benzoico, del control del 100% (el ácido 4-[2-(5,5,8,8-tetrametil-5,6,7,8-tetrahidronaftalen-2-il)propenil]benzoico 100 nM) y del control del 0% (el ácido 4-{(E)-3-[4-(4-terc-butil-fenil)-5,5,8,8-tetrametil-5,6,7,8-tetrahidronaftalen-2-il]-3-oxopropenil}benzoico 500 nM) son añadidas a razón de 5 µl por pocillo. Se incuban entonces las placas durante 18 horas a 37ºC con un 7% de CO2.

Se elimina el medio de cultivo por inversión y se añaden 100 µl de una mezcla 1:1 de PBS (solución tampón de fosfato)/luciferina a cada pocillo. A los 5 minutos, se leen las placas con el lector de luminiscencia.

c) Resultados

Los valores de las constantes Kd aparentes están indicados en la tabla siguiente. Se comparan estos valores con los de los compuestos de la solicitud de patente WO 99/10308 que presentan las mejores actividades.



Los resultados obtenidos con el ácido 4'-(3-hidroxipropoxi)-3'-(5,5,8,8-tetrametil-5,6,7,8-tetrahi-dronaftalen-2-il)bifenil-4-carboxílico y el ácido 4'-(4-hidroxibutoxi)-3'-(5,5,8,8-tetrametil-5,6,7,8-tetrahidro-naftalen-2-il)bifenil-4-carboxílico muestran bien una mejor selectividad de estos compuestos por el subtipo gamma del receptor RAR en compasión con los otros dos subtipos RAR alfa y RAR beta. Muestran también una mejor actividad y una mejor selectividad en comparación con los compuestos RAR más activos descritos en la solicitud de patente WO 99/10308.

Estos compuestos son, pues, agonistas o activadores selectivos del receptor RAR gamma.

Ejemplo 4

Ejemplos de formulaciones

En este ejemplo, se ilustraron diversas formulaciones concretas a base de los compuestos según la invención.








Reivindicaciones:

1. Compuestos bifenílicos de fórmula (I)


donde n es un número entero comprendido entre 1 y 3 inclusive, así como las sales de los compuestos de fórmula (I).

2. Compuesto según la reivindicación 1, caracterizado por ser seleccionado entre uno de los compuestos siguientes:

- el ácido 4'-(3-hidroxipropoxi)-3'-(5,5,8,8-tetrametil-5,6,7,8-tetrahidronaftalen-2-il)bifenil-4-carboxílico y

- el ácido 4'-(4-hidroxibutoxi)-3'-(5,5,8,8-tetrametil-5,6,7,8-tetrahidronaftalen-2-il)bifenil-4-carboxílico.

3. Compuesto según una cualquiera de las reivindicaciones precedentes a modo de medicamento.

4. Composición farmacéutica o cosmética, caracterizada por incluir en un vehículo farmacéutica o cosméticamente aceptable al menos un compuesto de fórmula (I) según una de las reivindicaciones 1 ó 2.

5. Composición farmacéutica o cosmética según la reivindicación 4, caracterizada por estar en forma adaptada para una administración por vía tópica.

6. Composición según la reivindicación 5, caracterizada por estar comprendida la cantidad de compuesto de fórmula (I) entre el 0,001% y el 3% en peso con respecto al peso total de la composición.

7. Utilización de un compuesto de fórmula (I) tal como se define en una de las reivindicaciones 1 ó 2 para la preparación de una composición farmacéutica destinada a la prevención y/o al tratamiento de patologías ligadas a una deficiencia de la activación del receptor RAR gamma.

8. Utilización según la reivindicación 7 para el tratamiento de una patología ligada a los trastornos de la diferenciación y/o de la proliferación celular.

9. Utilización según una de las reivindicaciones 7 ó 8 para el tratamiento del acné.

10. Utilización según una de las reivindicaciones 7 ó 8 para el tratamiento de la psoriasis.

11. Procedimiento de preparación de un compuesto de fórmula (I) según una de las reivindicaciones 1 ó 2, que consiste en las siguientes etapas:

i) la reacción de Suzuki entre el compuesto de fórmula 1


y el compuesto de fórmula 2


para dar lugar al compuesto de fórmula 3,


ii) eterificación del compuesto de fórmula 3 con el compuesto de fórmula 4,


donde X representa un grupo saliente que permite una substitución nucleofílica, R representa un hidrógeno o un grupo protector y n es un número entero comprendido entre 1 y 3, para dar lugar al compuesto de fórmula 5,


iv) la saponificación de la función éster del compuesto obtenido en la etapa anterior.

12. Procedimiento de preparación de un compuesto de fórmula (I) según la reivindicación 11, caracterizado por incluir entre las etapas ii) y iv), en el caso en el cual el grupo R es diferente de H, una etapa iii) de desprotección de la función alcohol del compuesto de fórmula 5 para dar lugar al compuesto de fórmula 6:


13. Procedimiento según una de las reivindicaciones 11 ó 12, caracterizado por ser X un halógeno.

14. Procedimiento según una de las reivindicaciones 11 a 13, caracterizado por ser R un grupo protector seleccionado entre acetilo y dimetil-terc-butilsililo.


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