38 patentes, modelos y diseños de KEYGENE N.V.

Método para eliminar un ligamiento genético en una planta.

(21/03/2019) Método para eliminar un ligamiento genético entre un primer locus A y un segundo locus B presentes en un primer cromosoma vegetal en una planta o célula vegetal, comprendiendo el método: (a) proporcionar al menos una célula vegetal que comprende dicho primer cromosoma que comprende dicho primer locus A y dicho segundo locus B y que comprende además al menos un segundo cromosoma, donde dichos cromosomas son cromosomas homólogos u homeólogos entre sí; e (b) introducir una rotura de doble cadena en el primer cromosoma, donde la rotura de doble cadena en el primer cromosoma se introduce entre dicho primer locus A y dicho segundo locus B proporcionando así una primera parte del primer cromosoma que comprende el…

Códigos de barras de secuencia combinatoria para selección de alto rendimiento.

(30/01/2019) Método para identificar el origen de muestra de ADN de muestra ligado a un adaptador y/o amplificado comprendiendo las etapas de: a) proporcionar un primer y un segundo identificador de secuencias de nucleótidos, donde cada identificador de secuencia de nucleótidos es una secuencia de nucleótidos de al menos un nucleótido; b) proporcionar adaptadores y/o cebadores de amplificación, donde al menos un primer adaptador o cebador de amplificación comprende el primer identificador de secuencia de nucleótidos y un segundo adaptador o cebador de amplificación comprende el segundo identificador de secuencia de nucleótidos, y donde opcionalmente se proporcionan otros adaptadores o cebadores de amplificación que comprenden otro identificador de secuencias de nucleótidos; c) proporcionar una pluralidad de ADNs…

Promotores específicos de los tricomas.

Sección de la CIP Química y metalurgia

(20/09/2017). Inventor/es: DIERGAARDE,PAUL JOHAN, PRINS,MARINUS WILLEM, DE VOS,MARTIN. Clasificación: C12N15/82.

Planta o célula vegetal o tejido vegetal u órgano vegetal transgénico que comprende un gen quimérico integrado en su genoma, caracterizado por el hecho de que dicho gen quimérico comprende un promotor específico de los tricomas operativamente enlazado a una secuencia de ácido nucleico homóloga o heteróloga, dicha secuencia de ácido nucleico homóloga o heteróloga está opcionalmente además operativamente enlazada a una secuencia homóloga o heteróloga UTR 3', donde el promotor se selecciona del grupo de: (a) la secuencia de ácido nucleico de SEQ ID Nº: 4 o SEQ ID Nº: 3; y (b) una secuencia de ácido nucleico que comprende al menos una identidad de secuencia del 70 % con la secuencia de ácido nucleico de SEQ ID Nº: 4 o SEQ ID Nº: 3.

PDF original: ES-2651714_T3.pdf

Uso de JAZ5a para mejorar la resistencia a la sequía en una planta.

Sección de la CIP Química y metalurgia

(08/03/2017). Inventor/es: VAN TUNEN,ADRIANUS JOHANNES. Clasificación: C12N15/82, C07K14/415.

Un procedimiento para mejorar la resistencia a la sequía en una planta que comprende proporcionar o aumentar la expresión de una proteína de resistencia a la sequía de origen vegetal, que es: (a) una proteína que tiene una secuencia de aminoácidos de ID DE SECUENCIA N.º:4; o (b) una proteína derivada de la proteína de (a) por sustitución, deleción o adición de 1-50 residuos en la secuencia de aminoácidos de ID DE SECUENCIA N.º:4 y que es capaz de conferir resistencia a la sequía a una planta; o (c) una proteína derivada de la proteína de (a), que tiene al menos una identidad de secuencia del 70 % con la secuencia de aminoácidos de ID DE SECUENCIA N.º:4 y que es capaz de conferir resistencia a la sequía a una planta, en dicha planta.

PDF original: ES-2627330_T3.pdf

Alteración dirigida de ADN.

Sección de la CIP Química y metalurgia

(29/06/2016). Inventor/es: BUNDOCK,PAUL, LHUISSIER,FRANCK. Clasificación: C12N15/10.

Un procedimiento para la alteración dirigida de una secuencia de ADN de doble cadena aceptora en un protoplasto vegetal que comprende una primera secuencia de ADN y una segunda secuencia de ADN que es complementaria a la primera secuencia de ADN, comprendiendo el procedimiento la combinación de la secuencia de ADN de doble cadena aceptora con un oligonucleótido donador en el que el oligonucleótido comprende al menos un dominio que es capaz de hibridar con la primera secuencia de ADN, cuyo dominio comprende o está directamente adyacente a al menos un desapareamiento con respecto a la primera secuencia de ADN y en el que dicho al menos un desapareamiento está ubicado a lo sumo a 2, preferiblemente a lo sumo a 1 nucleótido del extremo 3' de dicho oligonucleótido, más preferiblemente, dicho al menos un desapareamiento está en el extremo 3' del oligonucleótido.

PDF original: ES-2588482_T3.pdf

Técnicas mejoradas para la transfección de protoplastos.

(27/04/2016) Procedimiento para la introducción de una o más moléculas de interés en un protoplasto de célula vegetal que comprende las etapas de: - proporcionar el protoplasto de la célula vegetal mediante degradación enzimática y/o eliminación de la pared celular de una célula vegetal; - realizar una primera transfección del protoplasto de la célula vegetal con una composición que es capaz de inducir una rotura del ADN de doble cadena; - realizar una segunda transfección del protoplasto de la célula vegetal con una o más moléculas de interés, en el que dicha una o más moléculas de interés se seleccionan del grupo…

Genotipado a base de secuencias en base a ensayos de ligación a oligonucleótidos.

(19/01/2016) Procedimiento para la determinación de una secuencia de nucleótidos diana en una muestra que comprende las etapas de: (a) proporcionar para cada secuencia de nucleótidos diana (T) una primera sonda (P1) y una segunda sonda (P2), en el que la primera sonda comprende una primera sección específica de diana (TS1) y una primera sección etiqueta (TAG1) que es no complementaria a la secuencia de nucleótidos diana y que comprende opcionalmente una primera secuencia de unión a cebador (PBS1), en el que la primera sección etiqueta comprende una primera secuencia de reconocimiento (RE1) para una primera endonucleasa de restricción; en el que la segunda sonda comprende una segunda sección específica de diana (TS2) y una segunda sección etiqueta (TAG2) que es no complementaria…

Detección de alto rendimiento de marcadores moleculares basada en fragmentos de restricción.

(06/01/2016) Método para identificar la presencia o ausencia de fragmentos de restricción en una muestra, que comprende las etapas de: (a) proporcionar dos o más muestras de ácidos nucleicos; (b) digerir cada muestra de ácido nucleico con al menos una endonucleasa de restricción para obtener un conjunto de fragmentos de restricción; (c) proporcionar adaptadores sintéticos bicatenarios que comprenden - una sección identificadora específica de la muestra, - al menos un extremo que se puede ligar al extremo romo o que sobresale de un fragmento de restricción; (d) ligar los adaptadores sintéticos bicatenarios a los fragmentos de restricción en el conjunto, para proporcionar un conjunto de fragmentos de restricción ligados al adaptador; (e) determinar la secuencia de al menos la sección identificadora específica de…

Procedimiento para detección de polimorfismos basada en AFLP de alto rendimiento.

(16/12/2015) Procedimiento para genotipificación de marcadores genéticos en una muestra, que comprende las etapas consistentes en: (a) suministro de una muestra de ADN; (b) reducción de la complejidad de la muestra de ácido nucleico que usa AFLP para producir un subconjunto reproducible de fragmentos de restricción ligados a un adaptador amplificados; (c) secuenciación del subconjunto reproducible de fragmentos de restricción ligados a un adaptador amplificados que usa secuenciación de alto rendimiento; (d) alineación de las secuencias del subconjunto reproducible de fragmentos de restricción ligados a un adaptador amplificados; (e) selección de fragmentos de restricción ligados a un adaptador amplificados…

Un procedimiento de mutagénesis mejorado con el uso de la introducción de nucleobases mutágenas en protoplastos vegetales mediante polietilenglicol.

(17/11/2015) Procedimiento para la producción de una célula vegetal, una planta, un callo vegetal o un tallo, en que el procedimiento comprende la realización de una alteración dirigida de una secuencia de ADN aceptor bicatenario en un protoplasto de una célula vegetal, que comprende la combinación de la secuencia de ADN aceptor bicatenario con una nucleobase mutágena monocatenaria donante, en que la secuencia de ADN aceptor bicatenario contiene una primera secuencia de ADN y una segunda secuencia de ADN que es el complemento de la primera secuencia de ADN y en que la nucleobase mutágena monocatenaria donante comprende al menos un emparejamiento…

Detección de alto rendimiento de marcadores moleculares basada en fragmentos de restricción.

(10/06/2015) Método para identificar la presencia o ausencia de fragmentos de restricción en una muestra, que comprende las etapas de: (a) proporcionar dos o más muestras de ácidos nucleicos; (b) digerir cada muestra de ácido nucleico con al menos una endonucleasa de restricción para obtener un conjunto de fragmentos de restricción; (c) proporcionar adaptadores sintéticos bicatenarios que comprenden - una secuencia complementaria del cebador 5', - una sección identificadora específica de la muestra, - al menos un extremo que se puede ligar al extremo romo o que sobresale de un fragmento de restricción; (d) ligar los adaptadores sintéticos bicatenarios a los fragmentos de restricción en el conjunto, para proporcionar un conjunto de…

Procedimientos basados en OLA para la detección de secuencias de ácidos nucleicos objetivo.

(01/04/2015) Procedimiento para determinar la presencia, ausencia o cantidad de una secuencia de nucleótidos diana en una muestra de ácido nucléico, comprendiendo el procedimiento las siguientes etapas: a) proporcionar a una muestra de ácido nucléico una primera sonda para cada secuencia diana (T) a detectar en la muestra, de manera que la primera sonda tiene una primera sección específica de la diana que es complementaria de una primera parte de la secuencia diana y una segunda sonda para cada secuencia diana a detectar en la muestra, de manera que la segunda sonda tiene una segunda sección específica diana, que es complementaria de una segunda parte de la secuencia diana , de manera que la primera y la segunda partes de la secuencia diana están situadas adyacentes entre sí , y de manera que la segunda sonda comprende además una sección de…

Alteración dirigida de ADN.

(18/02/2015) Procedimiento para la alteración dirigida de una secuencia de ADN aceptor de doble cadena que comprende una primera secuencia de ADN y una segunda secuencia de ADN que es el complemento de la primera secuencia de ADN, comprendiendo el procedimiento combinar la secuencia de ADN aceptor de doble cadena con un oligonucleótido donante, en el que el oligonucleótido comprende al menos un dominio que es capaz de hibridarse a la primera secuencia de ADN, cuyo dominio comprende o está directamente adyacente a al menos un desapareamiento con respecto a la primera secuencia de ADN, y en el que dicho al menos un desapareamiento se encuentra como máximo 2 nucleótidos, preferiblemente como máximo 1 nucleótido del extremo 3' de dicho…

Alteración dirigida de ADN con oligonucleótidos.

(18/02/2015) Procedimiento para la alteración dirigida de una secuencia de ADN aceptor de doble cadena que comprende una primera secuencia de ADN y una segunda secuencia de ADN que es el complemento de la primera secuencia de ADN, comprendiendo el procedimiento combinar la secuencia de ADN aceptor de doble cadena con al menos un primer oligonucleótido y un segundo oligonucleótido, en el que el primer oligonucleótido comprende al menos un dominio que es capaz de hibridarse a la primera secuencia de ADN y en el que el primer oligonucleótido comprende además al menos un desapareamiento con respecto a la primera secuencia de ADN y en el que dicho al menos un desapareamiento se encuentra como máximo 2 nucleótidos del extremo 3' de dicho…

Farneseno sintasa.

(11/02/2015) Polinucleótido aislado según la SEQ ID NO: 1, o un polinucleótido que tiene al menos un 70% de identidad de secuencia con la secuencia de nucleótidos de la SEQ ID NO: 1, en el que dicho polinucleótido codifica un polipéptido con actividad de alfa-farneseno sintasa y actividad de beta-farneseno sintasa.

Detección rápida de SNP basada en secuencias utilizando ensayos de ligación.

(18/12/2013) Procedimiento para la detección rápida de por lo menos 100 secuencias de nucleótidos elegidas como objetivo en una pluralidad de muestras, comprendiendo el procedimiento las etapas de: (a) proporcionar para cada secuencia de nucleótidos elegida como objetivo en cada una de las muestras: I. una primera sonda y una segunda sonda, comprendiendo la primera sonda una sección específica elegida como objetivo en su extremo 3' y una primera sección etiquetada que no es complementaria a la secuencia de nucleótidos elegida como objetivo y que comprende una primera secuencia de enlace con un cebador, comprendiendo la segunda sonda una segunda sección específica elegida como objetivo…

Un método de mutagénesis mejorada utilizando polietilenglicol por introducción de bases nitrogenadas mutagénicas en protoplastos vegetales.

(11/12/2013) Procedimiento para la alteración dirigida de una secuencia bicatenaria de ADN aceptor en un protoplasto deuna célula vegetal, que comprende la combinación de la secuencia bicatenaria de ADN aceptor con una basenitrogenada mutágena dadora, comprendiendo la secuencia bicatenaria de ADN aceptor una primerasecuencia de ADN y un segunda secuencia de ADN que es complementaria de la primera secuencia de ADN ycomprendiendo la base nitrogenada mutágena dadora por lo menos un emparejamiento incorrecto conrespecto a la secuencia bicatenaria de ADN aceptor a alterar, preferentemente con respecto a la primerasecuencia de ADN, comprendiendo el…

Método para el cribado ultrarrápido de poblaciones de transposón etiquetado e identificación masiva de la secuencia en paralelo de los sitios de inserción.

(10/09/2013) Método para la identificación de una inserción asociada a un gen o fenotipo de interés en un miembro deuna población de transposones, que comprende las etapas de: (a) aislar, individualmente o en mezclas, el ADN genómico de miembros de la población detransposones; (b) realizar la restricción del ADN utilizando una o más endonucleasas de restricción, realizar laligación de los adaptadores con los fragmentos de restricción para preparar de este modo losfragmentos de restricción ligados a adaptadores; (c) realizar la amplificación de los fragmentos de restricción ligados a adaptadores con un par decebadores, con lo que uno de los cebadores comprende una sección que es complementaria a partede…

Intercambio de nucleótidos seleccionados mejorado con oligonucleótidos modificados con ANB.

(13/06/2013) Un procedimiento para la altered& seleccionada de una secuencia de ADN aceptor bicatenario quecomprende la combinación de la secuencia de ADN aceptor bicatenario con un oligonucleotido donador en presenciade proteinas que sean susceptibles de intercambio de nucleotidos seleccionados, en el que la secuencia de ADNaceptor bicatenario contiene una primera secuencia de ADN y una segunda secuencia de ADN que es elcomplemento de la primera secuencia de ADN y en el que el oligonucleotido donador comprende un dominio quocomprende al menos una discrepancia con respecto a la secuencia de ADN aceptor bicatenario que ha de seralterada, preferentemente con respecto a la primera secuencia de ADN, y en el quo el nucleatido on la discrepanciano este modificado, en el que el oligonucleatido contiene mas de un AND, en el que cada…

Nuevas estrategias para la secuenciación del genoma.

(17/05/2013) Procedimiento para determinar la secuencia genómica que comprende las etapas de: - proporcionar un mapa físico de una muestra de genoma por secuenciación de los extremos de fragmentos defragmentos de clones de cromosomas artificiales mezclados; - proporcionar un conjunto de lecturas de secuencia de la muestra de genoma; - generar un cóntigo del mapa físico y las lecturas de secuencia para construir una secuencia genómica.

Procedimiento basado en la AFLP para la integración de mapas físicos y genéticos.

(06/02/2013) Procedimiento para proporcionar un mapa genético y físico integrado de un genoma o parte del mismo,comprendiendo el procedimiento las etapas de: (a) proporcionar por lo menos dos marcadores genéticos individuales para el genoma o parte del mismo,preferentemente en forma de mapa genético; (b) caracterizar cada uno de los marcadores genéticos mediante por lo menos un fragmento de la AFLP identificadomediante la obtención de huellas genéticas de AFLP; (c) proporcionar una genoteca de clones que comprende fragmentos de genoma o parte del mismo, preferentementeuna genoteca de cromosomas artificiales tales como un BAC o un YAC; (d) generar una pluralidad de mezclas, conteniendo cada mezcla una pluralidad de clones individuales…

Estrategias mejoradas para elaboración de perfiles de transcritos usando tecnologías de secuenciación de alto rendimiento.

(04/02/2013) Procedimiento para determinar niveles de transcripción relativos de una secuencia de nucleótidos en muestrasde ADNc que comprende las etapas de: (a) Proporcionar una primera muestra de ADNc; (b) Realizar una reducción de la complejidad reproducible de la primera muestra de ADNc 5 para obtener unaprimera colección que comprende las etapas de: - digerir el ADNc con al menos una endonucleasa de restricción para fragmentarlo en fragmentos derestricción; - ligar los fragmentos de restricción con al menos un adaptador oligonucleotídico sintético bicatenario quetenga un extremo compatible con uno o ambos extremos de los fragmentos de restricción para producirfragmentos de restricción ligados a adaptador; - poner en contacto dichos fragmentos…

Intercambio de nucleótidos seleccionados mejorado con oligonucleótidos modificados por propinilo.

(22/08/2012) Un procedimiento para la alteración seleccionada de una secuencia de AON aceptor bicatenario que comprendela combinación de la secuencia de AON aceptor bicatenario con un oligonucleótido donador, en el que la secuenciade AON aceptor bicatenario contiene una primera secuencia de AON y una segunda secuencia de AON que es elcomplemento de la primera secuencia de AON y en el que el oligonucleótido donador comprende un dominio quecomprende al menos una discrepancia con respecto a la secuencia de AON aceptor bicatenario que ha de seralterada, preferentemente con respecto a la primera secuencia de AON, y en el que…

Estrategias para la identificación y detección de alto rendimiento de polimorfismos.

Sección de la CIP Química y metalurgia

(22/08/2012). Inventor/es: VAN EIJK,MICHAEL,JOSEPHUS,THERESIA, VAN DER POEL,Henricus,Johannes,Adam. Clasificación: C12Q1/68.

Utilización en un método de reducción de la complejidad, de un adaptador que porta un extremoprotuberante 3' de T en la reducción del etiquetado mixto de una muestra de ADN amplificado y/o en lareducción o prevención de la formación de concatámeros de fragmentos de ADN de una muestra de ADNque comprende fragmentos de restricción amplificados que portan un extremo protuberante 3' de Aobtenido de una reducción de complejidad.

PDF original: ES-2393318_T3.pdf

Método para la detección de polimorfismos basados en AFLP de alto rendimiento.

(25/07/2012) Método para el descubrimiento, la detección y el genotipado de alto rendimiento de uno o más marcadoresgenéticos en una o más muestras, que comprende las etapas de: (a) proporcionar ADN de una o más muestras; (b) cortar el ADN con al menos una endonucleasa de restricción para producir fragmentos de restricción; (c) ligar adaptadores a los fragmentos de restricción para producir fragmentos de restricción ligados a adaptador; (d) amplificar los fragmentos de restricción ligados a adaptador con un par de cebadores que es complementario alos adaptadores para producir fragmentos de restricción ligados a adaptador preamplificados; (e) amplificar los fragmentos de restricción ligados a adaptador preamplificados con un par de cebadores,conteniendo al menos uno de los cebadores desde uno hasta…

Estrategias para la identificación de alto rendimiento y la detección de polimorfismos.

(09/05/2012) Método para identificar uno o más polimorfismos en muestras de ácido nucleico, comprendiendo dichométodo las etapas de: a) proporcionar una pluralidad de muestras de ácido nucleico de interés; b) realizar una reducción de la complejidad en cada una de las muestras para proporcionar una pluralidadde bibliotecas de muestras de ácido nucleico, c) ligar adaptadores a las muestras de ácido nucleico de complejidad reducida en las bibliotecas, usando undaptador que porta una proyección 3'-T; d) secuenciar al menos una parte de las bibliotecas; e) alinear las secuencias de cada muestra obtenida en la etapa d); f) determinar uno o más polimorfismos entre la pluralidad de muestras de ácido nucleico en la alineación dela etapa e); g) opcionalmente, examinar…

MÉTODOS PARA GENERAR RESISTENCIA FRENTE A CGMMV EN PLANTAS.

(10/11/2011) Método para generar resistencia en una planta o en una célula vegetal frente a la infección con el virus del mosaico moteado verde del pepino (CGMMV), comprendiendo dicho método transformar dicha planta o célula vegetal con una secuencia de polinucleótido que - tras su transcripción en ARN genera resistencia frente a la infección con CGMMV en dicha planta; - tras su transcripción en ARN no conduce a la generación de actividad replicasa en dicha planta; y - en el que la secuencia de polinucleótido comprende un promotor, operativamente unido a una primera y una segunda secuencia de ADN que están presentes en una repetición invertida, en la que: • la primera secuencia de ADN comprende una primera región de ADN que puede transcribirse en una molécula de ARN homosentido con una secuencia de…

ESTRATEGIAS PARA LA IDENTIFICACIÓN Y DETECCIÓN DE ALTO RENDIMIENTO DE POLIMORFISMOS.

(27/04/2011) Método para identificar uno o más polimorfismos, comprendiendo dicho método las etapas de: a) proporcionar una primera muestra de ácidos nucleicos de interés; b) llevar a cabo una reducción de complejidad de la primera muestra de ácidos nucleicos de interés, proporcionando una primera biblioteca de la primera muestra de ácidos nucleicos; c) llevar a cabo consecutiva o simultáneamente las etapas a) y b) con una segunda o posterior muestra de ácidos nucleicos de interés, obteniendo una segunda o posterior biblioteca de la segunda o posterior muestra de ácidos nucleicos de interés; d) secuenciar por lo menos una parte de la…

RESISTENCIA CONTRA LAS PLAGAS DE PLANTAS.

(11/04/2011) Un ácido nucleico aislado que tiene al menos un 50% de identidad con la secuencia de ADN de la Figura 5 y donde dicho ácido nucleico, cuando es transferido a una planta que es susceptible a una plaga vegetal, es capaz de reducir la susceptibilidad de dicha planta a dicha plaga vegetal

CARTOGRAFÍA FÍSICA DE ALTO RENDIMIENTO UTILIZANDO AFLP.

(24/02/2011) Procedimiento para la generación de un mapa físico de por lo menos una parte de un genoma que comprende las etapas de: (a) proporcionar una muestra ADN; (b) generar un banco de clones de un cromosoma artificial (BAC, YAC) en el que cada clon de un cromosoma artificial; (c) combinar los clones de cromosomas artificiales en uno o más agrupaciones, en los que cada clon se encuentra presente en más de una agrupación, para crear una genoteca; (d) digerir el ADN de una o más agrupaciones con una o más endonucleasas de restricción para proporcionar un conjunto de fragmentos de restricción para cada agrupación; (e) ligar los adaptadores a uno o ambos lados de los fragmentos de restricción, en los…

ESTRATEGIAS MEJORADAS PARA LA SECUENCIACION DE GENOMAS COMPLEJOS UTILIZANDO TECNOLOGIAS DE SECUENCIACION DE ALTO RENDIMIENTO.

(07/09/2010) Procedimiento para determinar una secuencia genómica que comprende las etapas de: (a) proporcionar un primer subconjunto del genoma mediante la digestión del genoma con por lo menos una primera endonucleasa de restricción para proporcionar fragmentos de restricción; (b) realizar la ligación de por lo menos un adaptador con los fragmentos de restricción del primer subconjunto para proporcionar un primer conjunto de fragmentos de restricción ligados al adaptador; (c) amplificar selectivamente el primer conjunto de fragmentos de restricción ligados al adaptador utilizando una primera combinación de cebador en la que por lo menos un primer cebador contiene una sección complementaria al adaptador y a una parte de la secuencia de reconocimiento de la endonucleasa de restricción y que contiene además una primera secuencia…

EXPLORACION DE ALTO RENDIMIENTO DE POBLACIONES MUTAGENIZADAS.

(07/05/2010) Método para la detección de una mutación en una secuencia diana en un miembro de una población mutagenizada, que comprende las etapas de: (a) aislar ADN genómico de cada miembro de la población mutagenizada para proporcionar muestras de ADN de cada miembro de la población; (b) reunir el ADN obtenido en la etapa (a); (c) amplificar la secuencia diana con un par de cebadores (opcionalmente marcados) a partir de los conjuntos de ADN; (d) reunir los productos de amplificación de la etapa (c) para crear una biblioteca de productos de amplificación; (e) opcionalmente, fragmentar los productos de amplificación de la biblioteca; (f) determinar la secuencia de nucleótidos de los fragmentos o productos amplificados usando secuenciación de alto…

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