Modulación del crecimiento celular y glucosilación en la producción de glucoproteínas recombinantes.
Un procedimiento para la producción de una glucoproteína recombinante en condiciones de cultivo de fermentación en una célula eucariota,
comprendiendo el procedimiento ajustar las concentraciones de cada uno de hierro, cobre, cinc y manganeso en el medio de cultivo durante el cultivo para afectar a la generación de biomasa y/o madurez de N-glucano en la glucoproteína expresada en el que el ajuste es:
- incrementar la concentración de cada uno de hierro, cobre, cinc y manganeso para incrementar la biomasa, en el que las concentraciones se ajustan a:
(a) hierro: de 15 μM a más de 80 μM;
(b) cobre: de 0,3 μM a más de 2,5 μM;
(c) cinc: de 20 μM a más de 50μμM; y
(d) manganeso: de 0,01 μM a más de 3 μM; y/o
- incrementar la concentración de cada uno de cinc y manganeso y, opcionalmente, disminuir la concentración de cada uno de hierro y cobre para incrementar la madurez de N-glucano en la glucoproteína expresada, en el que la porción de hidratos de carbono de la glucoproteína expresada tiene una estructura G0, G1 o G2; o
- (i) disminuir la concentración de cada uno de hierro, cobre, cinc y manganeso para incrementar la producción de glucoproteínas no fucosiladas inmaduras o (ii) incrementar la concentración de cada uno de cobre y hierro y disminuir la concentración de cada uno de cinc y manganeso para incrementar la producción de glucoproteínas no fucosiladas inmaduras;
en el que se logra una disminución en la concentración de cualquiera o todos de hierro, cobre, cinc y manganeso en el medio de cultivo complejando el hierro, cobre, cinc y manganeso con un quelante y/o sembrando las células en un medio recién preparado que contiene una reducción en la concentración de cualquiera o todos de hierro, cobre, cinc y manganeso en comparación con el medio de la fase de cultivo inmediatamente precedente.
Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/EP2015/053804.
Solicitante: F. HOFFMANN-LA ROCHE AG.
Inventor/es: BEAUCAMP, NICOLA, POPP,OLIVER, DRABNER,GEORG, ESSLINGER,STEPHANIE.
Fecha de Publicación: .
Clasificación Internacional de Patentes:
- C07K16/00 QUIMICA; METALURGIA. › C07 QUIMICA ORGANICA. › C07K PEPTIDOS (péptidos que contienen β -anillos lactamas C07D; ipéptidos cíclicos que no tienen en su molécula ningún otro enlace peptídico más que los que forman su ciclo, p. ej. piperazina diones-2,5, C07D; alcaloides del cornezuelo del centeno de tipo péptido cíclico C07D 519/02; proteínas monocelulares, enzimas C12N; procedimientos de obtención de péptidos por ingeniería genética C12N 15/00). › Inmunoglobulinas, p. ej. anticuerpos mono o policlonales.
- C12N1/00 C […] › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › Microorganismos, p.ej. protozoos; Composiciones que los contienen (preparaciones de uso médico que contienen material de protozoos, bacterias o virus A61K 35/66, de algas A61K 36/02, de hongos A61K 36/06; preparación de composiciones de uso médico que contienen antígenos o anticuerpos bacterianos, p. ej. vacunas bacterianas, A61K 39/00 ); Procesos de cultivo o conservación de microorganismos, o de composiciones que los contienen; Procesos de preparación o aislamiento de una composición que contiene un microorganismo; Sus medios de cultivo.
- C12N1/38 C12N […] › C12N 1/00 Microorganismos, p.ej. protozoos; Composiciones que los contienen (preparaciones de uso médico que contienen material de protozoos, bacterias o virus A61K 35/66, de algas A61K 36/02, de hongos A61K 36/06; preparación de composiciones de uso médico que contienen antígenos o anticuerpos bacterianos, p. ej. vacunas bacterianas, A61K 39/00 ); Procesos de cultivo o conservación de microorganismos, o de composiciones que los contienen; Procesos de preparación o aislamiento de una composición que contiene un microorganismo; Sus medios de cultivo. › Estimulación química del crecimiento o de la actividad por adición de compuestos químicos que no son factores esenciales de crecimiento; Estimulación del crecimiento por eliminación de un compuesto químico (C12N 1/34 tiene prioridad).
- C12N5/071 C12N […] › C12N 5/00 Células no diferenciadas humanas, animales o vegetales, p. ej. líneas celulares; Tejidos; Su cultivo o conservación; Medios de cultivo para este fin (reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00). › Células o tejidos de vertebrados, p.ej. células o tejidos humanos.
- C12P21/00 C12 […] › C12P PROCESOS DE FERMENTACION O PROCESOS QUE UTILIZAN ENZIMAS PARA LA SINTESIS DE UN COMPUESTO QUIMICO DADO O DE UNA COMPOSICION DADA, O PARA LA SEPARACION DE ISOMEROS OPTICOS A PARTIR DE UNA MEZCLA RACEMICA. › Preparación de péptidos o de proteínas (proteína monocelular C12N 1/00).
- C12P21/08 C12P […] › C12P 21/00 Preparación de péptidos o de proteínas (proteína monocelular C12N 1/00). › Anticuerpos monoclonales.
PDF original: ES-2769003_T3.pdf
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