Proteínas mutantes de la proteína F de PIV-5 y de PIV-2.

Proteína mutante, cuya secuencia en aminoácidos comprende una secuencia que difiere de la de la proteína F de un virus PIV-5 o PIV-2:

- por sustitución:

- del aminoácido que, en la secuencia de dicha proteína F de virus PIV-5, está en la posición 22, o que, en la secuencia de dicha proteína F de virus PIV-2, está en la posición 24, por el aminoácido P, y

- del aminoácido que, en la secuencia de dicha proteína F de virus PIV-5, está en la posición 132, o que, en la secuencia de dicha proteína F de virus PIV-2, está en la posición 133, por el aminoácido E, y

- del aminoácido que, en la secuencia de dicha proteína F de virus PIV-5, está en la posición 290, o que, en la secuencia de dicha proteína F de virus PIV-2, está en la posición 294, por el aminoácido A, y

- del aminoácido que, en la secuencia de dicha proteína F de virus PIV-5, está en la posición 447, o que, en la secuencia de dicha proteína F de virus PIV-2, está en la posición 445, por el aminoácido P,

- y por sustitución:

- del aminoácido que, en la secuencia de dicha proteína F de virus PIV-5, está en la posición 147, o que, en la secuencia de dicha proteína F de virus PIV-2, está en posición 151, por un aminoácido hidrófobo seleccionado de entre V, I, L, preferiblemente V, y/o

- del aminoácido que, en la secuencia de dicha proteína F de virus PIV-5, está en la posición 158, o que, en la secuencia de dicha proteína F de virus PIV-2, está en posición 162, por un aminoácido hidrófobo seleccionado de entre V, I, L, preferiblemente V,

- y, opcionalmente:

- por sustitución del sitio de escisión nativo de dicha proteína F por otro sitio de escisión enzimático, y/o por inserción en dicha proteína F de un sitio de escisión enzimático diferente del sitio de escisión nativo de esta proteína F, y/o

- por supresión de una parte C-terminal de dicha proteína F, extendiéndose dicha parte C-terminal en dirección N-terminal a partir del último aminoácido en el extremo C-terminal de la proteína, pero sin extenderse más allá del dominio HR2 de dicha proteína F,

la secuencia de dicha proteína F de virus PIV-5 o PIV-2 que comprende la secuencia de la SEC ID NO: 34.

Proteínas mutantes de la proteína F de PIV-5 y de PIV-2

Campo técnico 5

La presente solicitud se refiere a proteínas mutantes de la proteína de fusión (proteína F) del virus Parainfluenza (PIV) que están actualmente catalogadas bajo PIV de tipo 5 (PIV-5 o PIV5) y PIV de tipo 2 (PIV-2 o PIV2) .

La presente solicitud se refiere a productos que derivan de ellos, tales como: 10

* ácidos nucleicos, vectores, células,

* inhibidores de fusión de tipo anticuerpo, aptámeros, ARN interferente, 15

* mielomas, hibridomas,

* células madre y progenitoras.

La presente solicitud se refiere también a estas proteínas mutantes y productos que derivan de ellas para su 20 utilización en aplicaciones médicas y biotecnológicas.

Técnica anterior

El virus Parainfluenza (PIV) que está actualmente catalogado bajo PIV de tipo 5 (PIV-5 o PIV5) es un virus con 25 envoltura del género Rubulavirus de la familia de las Paramyxoviridae. PIV-5 se conocía anteriormente bajo el nombre de SV5 (Simian Virus 5) , ya que su aislamiento se realizó inicialmente a partir de cultivos primarios de células de mono. El hospedante natural de PIV-5 parece ser sin embargo el perro, en el que causa una tos conocida con el nombre de tos de las perreras.

Después, se han obtenido algunos aislados de PIV-5 a partir de muestras extraídas en humanos, pero que han sido colocadas en cultivo sobre células animales. Además, no está asociado ningún síntoma o enfermedad al PIV-5 en el ser humano. La cuestión de saber si el ser humano es efectivamente un hospedante para PIV-5 está por lo tanto hoy día todavía sujeta a debate.

En cualquier caso, el virus PIV-5 es actualmente considerado como un virus animal.

El virus de la Parainfluenza (PIV) que está actualmente catalogado bajo el PIV de tipo (PIV-2 o PIV2) es también un virus con envoltura del género Rubulavisu de la familia de los Paramyxoviridae.

Hoy día, sólo se han identificado unos aislados humanos de PIV-2 (hPIV-2) , de manera que el PIV-2 está considerado como un virus humano.

Los virus PIV-5 y PIV-2 son muy parecidos el uno del otro, tanto en términos de secuencias de ácidos nucleicos, como de secuencias proteicas, de organización, de estructura y de morfología. 45

Entre los virus de Parainfluenza humanos, el PIV-2 es el virus más parecido a PIV-5 que se ha encontrado en el ser humano.

El PIV-2 se puede considerar, y así se considera por lo menos por los inventores, como el equivalente humano de 50 PIV-5.

La infección por PIV-5 o PIV-2 conduce a la formación de estructuras plurinucleares denominadas sincitio, que resulta de la fusión de células del hospedante infectado.

La entrada de los virus PIV-5 y PIV-2 en la célula hospedante se realiza mediante la fusión de la envoltura viral con la membrana celular.

Esta fusión implica dos glicoproteínas virales: la proteína de fijación hemaglutinina-neuraminidasa (HN) y la proteína de fusión (F) . 60

La proteína de fusión F de PIV-5 y PIV-2 se sintetiza en forma de un simple precursor (F0) y se presenta en forma de un homotrímero glicosilado. La proteína de fusión F de PIV-5 y PIV-2 necesita una escisión proteolítica por unas furinas del hospedante para generar una forma "pre-activada" que consiste en dos subunidades unidas por unos puentes disulfuros: una gran subunidad F1 carboxi-terminal y una pequeña subunidad amino-terminal F2. 65

La sub-unidad F1 está compuesta de un péptido de fusión hidrófobo (FP) así como dos dominios repetidos en heptadas (HR-1 y HR-2) , que presentan una conformación de tipo super-enrollado ("coiled-coil") . Después de la activación por HN, la proteína de fusión sufre un conjunto de cambios conformacionales que resultan en la inserción del péptido de fusión en la membrana celular diana. Tras lo cual se produce la interacción entre los dominios HR-1 y HR-2 que acercan la envoltura viral de la membrana celular (Russell et al. 2006) . Estos dominios son conocidos por 5 formar un haz ("bundle") de seis hélices muy estable constituido de una estructura trimérica super-enrollada ("coiled-coil") en la que tres dominios HR-1 están unidos con tres dominios HR-2 en orientación antiparalela. Esta conformación representa la forma de post-fusión de la proteína F (Baker et al. 1999, Sergel-Germano et al. 2000, West et al. 2005) .

La proteína de fusión F de PIV-5 y PIV-2 necesita una proteína HN que proviene del mismo tipo viral para que no haya promoción de la fusión (Yao et al. 1997) . Sin embargo, la naturaleza precisa de las interacciones que existen entre F y HN no es todavía bien conocida.

No obstante, varios estudios han mostrado que algunas cepas de PIV-5 y de PIV-2 difieren en su necesidad de HN 15 para la activación de la fusión.

Por ejemplo, Ito et al. 1997 describen dos cepas de "SV5" (PIV-5) a saber W3A y WR, cuyas proteínas F difieren sólo por los tres aminoácidos (residuos 22, 443 y 516) . La proteína F de la cepa W3A es capaz de inducir la fusión de manera autónoma, es decir en ausencia de la proteína HN, mientras que la proteína F de la cepa WR no es 20 capaz de ello.

Ito et al. 1997 indican que la actividad fusogénica de la proteína F de la cepa WR puede ser reestablecida sustituyendo el aminoácido de la posición 22 de esta proteína por un aminoácido prolina.

Ito et al. 2000 sugieren que el aminoácido E de la posición 132 y el aminoácido A de la posición 290 de la proteína F de las cepas W3A y WR podrían estar implicados en la capacidad de la proteína F de estas cepas para ser autónoma de la proteína HN.

Paterson et al. 2000 indican que la presencia del aminoácido prolina de la posición 22 de la proteína F de la cepa 30 W3A, la presencia del aminoácido 443 de la proteína F de la cepa WR podrían aumentar la capacidad fusogénica de estas cepas virales.

Russell et al. 2003 indican que el hecho de sustituir los residuos L447 y l449 de la proteína F de la cepa W3A por unos aminoácidos aromáticos podría aumentar la capacidad fusogénica de esta cepa viral. 35

Gardner y Dutch 2007 indican que la mutación I49A de la proteína F de un virus "SV5" (PIV-5) de tipo salvaje tendría un efecto pro-fusogénico.

Gardner et al. 2007 indican que la mutación V402A de la proteína F de un virus "SV5" (PIV-5) de tipo salvaje tendría 40 un efecto pro-fusogénico.

Kawano et al., 1990 (Virology 178: 289-292) se refiere a clones de ADNc que representan el gen de fusión (F) del virus PIV-2.

En lo referente a la proteína PIV-2, no parece haber documento en la técnica anterior que describiera la introducción de mutación (es) en la secuencia de la proteína F de este virus, a fin de intentar aumentar su autonomía y su capacidad fusogénica.

Por otra parte, existen otras numerosas proteínas virales capaces de fusión, tales como por ejemplo las proteínas 50 HA1/HA2 de Influenza, la proteína G de los Rhabdovirus, las proteínas gp41/gp120 del VIH. Los conocimientos actuales en cuestión de capacidades de fusogenicidad y de autonomía de estas diferentes proteínas virales siguen siendo hoy día muy limitados.

En cualquier caso, los conocimientos actuales en cuestión de proteínas de fusión virales no aportan un dominio 55 técnico que sea suficiente para considerar unas aplicaciones médicas y/o biotecnológicas efectivas.

Resumen de la invención

Los inventores han considerado que el hecho de disponer de una proteína de fusión que sea hiperfusogénica y que 60 tenga asimismo una gran autonomía en su capacidad de fusión permitiría aportar una solución a un cierto número de situaciones médicas y biotecnológicas.

Los inventores han realizado entonces una selección selectiva frente a la proteína F de PIV-5 y/o PIV-2 con respecto al conjunto de las demás proteínas de fusión virales, tales como las proteínas HA1/HA2 de Influenza, la proteína G 65 de los Rhabdovirus, las proteínas gp41/gp120 del VIH.

Después, han construido unas proteínas F mutantes, que son capaces de fusogenicidad en ausencia de la proteína HN.

Las proteínas mutantes de la invención demuestran una fuerte capacidad de fusogenicidad y una fuerte autonomía. 5 No necesitan la presencia de la proteína HN para inducir la fusión celular y la formación de sincitio.

Los inventores muestran además que es posible introducir en estas proteínas mutantes un sitio de escisión diferente del que presenta la proteína F en estado natural, y más particularmente un sitio de escisión específico del tejido.

Los inventores proponen además unas aplicaciones médicas (terapéuticas, preventivas, paliativas,... [Seguir leyendo]

1. Proteína mutante, cuya secuencia en aminoácidos comprende una secuencia que difiere de la de la proteína F de un virus PIV-5 o PIV-2:

- por sustitución: 5

- del aminoácido que, en la secuencia de dicha proteína F de virus PIV-5, está en la posición 22, o que, en la secuencia de dicha proteína F de virus PIV-2, está en la posición 24, por el aminoácido P, y

- del aminoácido que, en la secuencia de dicha proteína F de virus PIV-5, está en la posición 132, o que, en la 10 secuencia de dicha proteína F de virus PIV-2, está en la posición 133, por el aminoácido E, y

- del aminoácido que, en la secuencia de dicha proteína F de virus PIV-5, está en la posición 290, o que, en la secuencia de dicha proteína F de virus PIV-2, está en la posición 294, por el aminoácido A, y 15

- del aminoácido que, en la secuencia de dicha proteína F de virus PIV-5, está en la posición 447, o que, en la secuencia de dicha proteína F de virus PIV-2, está en la posición 445, por el aminoácido P,

- y por sustitución:

- del aminoácido que, en la secuencia de dicha proteína F de virus PIV-5, está en la posición 147, o que, en la secuencia de dicha proteína F de virus PIV-2, está en posición 151, por un aminoácido hidrófobo seleccionado de entre V, I, L, preferiblemente V, y/o

- del aminoácido que, en la secuencia de dicha proteína F de virus PIV-5, está en la posición 158, o que, en la 25 secuencia de dicha proteína F de virus PIV-2, está en posición 162, por un aminoácido hidrófobo seleccionado de entre V, I, L, preferiblemente V,

- y, opcionalmente:

- por sustitución del sitio de escisión nativo de dicha proteína F por otro sitio de escisión enzimático, y/o por inserción en dicha proteína F de un sitio de escisión enzimático diferente del sitio de escisión nativo de esta proteína F, y/o

- por supresión de una parte C-terminal de dicha proteína F, extendiéndose dicha parte C-terminal en dirección N-terminal a partir del último aminoácido en el extremo C-terminal de la proteína, pero sin extenderse más allá del 35 dominio HR2 de dicha proteína F,

la secuencia de dicha proteína F de virus PIV-5 o PIV-2 que comprende la secuencia de la SEC ID NO: 34.

2. Proteína mutante según la reivindicación 1, caracterizada por que la secuencia de dicha proteína F es una 40 proteína F de PIV-5.

3. Proteína mutante según la reivindicación 2, caracterizada por que la secuencia de dicha proteína F consiste en:

- la secuencia de la SEC ID NO: 31, o la secuencia alternativa que es idéntica a la secuencia de SEC ID NO: 31 con 45 la excepción del aminoácido en la posición 443, que es S en esta secuencia alternativa (en lugar de P en la SEC ID NO: 31) , o en

- una secuencia variante de esta secuencia de la SEC ID NO: 31 o de dicha secuencia alternativa, esta secuencia variante: 50

es de un tamaño idéntico al de la SEC ID NO: 31, o es de un tamaño superior en un máximo de 7 aminoácidos al de la SEC ID NO: 31, o es de un tamaño inferior en un máximo de 7 aminoácidos al de la SEC ID NO: 31, y

presenta una identidad de secuencia de más del 95%, preferiblemente de al menos el 96%, más preferiblemente 55 de al menos el 97%, con respecto a la secuencia de la SEC ID NO: 31 o a dicha secuencia alternativa, siendo esta identidad calculada sobre la longitud de la secuencia de la SEC ID NO: 31 o, llegado el caso, de dicha secuencia alternativa.

4. Proteína mutante según la reivindicación 3, caracterizada por que la secuencia de dicha proteína F consiste en la 60 secuencia de la SEC ID NO: 31 modificada por las sustituciones de aminoácidos indicados en la tabla 1 en la columna "W3A" o "MIL" o "DEN" o "LN" o "MEL" o "Criptovirus" o "CPI+" o "CPI-" o "H221" o "78524" o "T1" o "SER".

5. Proteína mutante según cualquiera de las reivindicaciones 2 a 4, caracterizada por que su secuencia en aminoácidos no comprende otra mutación con respecto a dicha secuencia de la proteína F de PIV-5. 65

6. Proteína mutante según la reivindicación 5, caracterizada por que dicha secuencia que difiere de la de dicha proteína F difiere además por:

- sustitución del aminoácido que, en la secuencia de dicha proteína F, está en la posición 147, por el aminoácido V, 5 o por

- sustitución del aminoácido que, en la secuencia de dicha proteína F, está en la posición 158, por el aminoácido V, o por 10

- sustitución del aminoácido que, en la secuencia de dicha proteína F, está en la posición 147, por el aminoácido V, y por sustitución del aminoácido que, en la secuencia de dicha proteína F, está en la posición 158, por el aminoácido V.

7. Proteína mutante según la reivindicación 5 o 6, caracterizada por que la secuencia de dicha proteína F es la 15 secuencia SEC ID NO: 31 con el aminoácido S en posición 443, y por que dicha secuencia que difiere de la de dicha proteína F difiere además por:

- sustitución del aminoácido que, en la secuencia de dicha proteína F, está en la posición 147, por el aminoácido V, o por 20

- sustitución del aminoácido que, en la secuencia de dicha proteína F, está en la posición 158, por el aminoácido V, o por

- sustitución del aminoácido que, en la secuencia de dicha proteína F, está en la posición 147, por el aminoácido V, y 25 por sustitución del aminoácido que, en la secuencia de dicha proteína F, está en la posición 158, por el aminoácido V.

8. Proteína mutante según cualquiera de las reivindicaciones 2 a 4, caracterizada por que dicha secuencia que difere de la de dicha proteína F difiere además por: 30

- al menos una mutación de prefusión seleccionada de entre:

- la sustitución del aminoácido en la posición 49 por el aminoácido A, - la sustitución del aminoácido en la posición 402 por el aminoácido A, 35

- la sustitución del aminoácido en la posición 443 por el aminoácido P, - la sustitución del aminoácido en la posición 449 por el aminoácido P,

y/o por 40

- al menos una mutación de post-fusión seleccionada de entre:

- la sustitución del aminoácido en la posición 463 por un aminoácido hidrófobo.

9. Proteína mutante según cualquiera de las reivindicaciones 2 a 7, caracterizada por que dicha secuencia que 45 difiere de la de la proteína F de un virus PIV-5 comprende la sustitución del aminoácido que, en la secuencia de dicha proteína F de virus PIV-5, está en la posición 158, por un aminoácido hidrófobo, seleccionado de entre V, I, L, preferiblemente V.

10. Proteína mutante según cualquiera de las reivindicaciones 2 a 7, caracterizada por que dicha secuencia que 50 difiere de la de la proteína F de un virus PIV-5 comprende la sustitución del aminoácido que, en la secuencia de dicha proteína F de virus PIV-5, está en la posición 147, por un aminoácido hidrófobo, seleccionado de entre V, I, L, preferiblemente V.

11. Proteína mutante según la reivindicación 1, caracterizada por que la secuencia de dicha proteína F es una 55 proteína F de PIV-2.

12. Proteína mutante según la reivindicación 11, caracterizada por que la secuencia de dicha proteína F consiste en:

- la secuencia de la SEC ID NO: 33, o en 60

- una secuencia variante de esta secuencia de SEC ID NO: 33, esta secuencia variante:

* es de un tamaño idéntico al de la SEC ID NO: 33, o es de un tamaño superior en un máximo de 2 aminoácidos al de la SEC ID NO: 33, o es de un tamaño inferior en un máximo de 2 aminoácidos al de la SEC ID NO: 33, y 65

* presenta una identidad de la secuencia de más del 95%, preferiblemente de al menos el 96%, más preferiblemente de al menos el 97%, con respecto a la secuencia de la SEC ID NO: 33, siendo esta identidad calculada sobre la longitud de la secuencia de SEC ID NO: 33.

13. Proteína mutante según la reivindicación 11 o 12, caracterizada por que dicha secuencia en aminoácidos no 5 comprende otra mutación con respecto a dicha secuencia de proteína F de PIV-2.

14. Proteína mutante según la reivindicación 13, caracterizada por que dicha secuencia que difiere de la de dicha proteína F difiere además por:

- sustitución del aminoácido que, en la secuencia de dicha proteína F, está en la posición 151, por el aminoácido V, o por

- sustitución del aminoácido que, en la secuencia de dicha proteína F, está en la posición 162, por el aminoácido V, o por 15

- sustitución del aminoácido que, en la secuencia de dicha proteína F, está en la posición 151, por el aminoácido V, y sustitución del aminoácido que, en la secuencia de dicha proteína F, está en la posición 162, por el aminoácido V.

15. Proteína mutante según cualquiera de las reivindicaciones 11 o 12, caracterizada por que dicha secuencia que 20 difiere de la de dicha proteína F difiere además por:

- al menos una mutación de pre-fusión seleccionada de entre:

- la sustitución del aminoácido en la posición 53 por el aminoácido A, 25

- la sustitución del aminoácido en la posición 406 por el aminoácido A, - la sustitución del aminoácido en la posición 428 por el aminoácido P, - la sustitución del aminoácido en la posición 439 por el aminoácido P, y/o por

- al menos una mutación de post-fusión seleccionada de entre: 30

- la sustitución del aminoácido en la posición 474 por un aminoácido hidrófobo.

16. Proteína mutante según la reivindicación 8 o 15, caracterizada por que dicha aminoácido hidrófobo se selecciona de entre V, I, L, preferiblemente V. 35

17. Proteína mutante según cualquiera de las reivindicaciones 11 a 16, caracterizada por que dicha secuencia que difiere de la de la proteína F de un virus PIV-2 comprende la sustitución del aminoácido que, en la secuencia de dicha proteína F de virus PIV-2, está en posición 162, por un aminoácido hidrófobo seleccionado de entre V, I, L, preferiblemente V. 40

18. Proteína mutante según cualquiera de las reivindicaciones 11 a 16, caracterizada por que dicha secuencia que difiere de la de la proteína F de un virus PIV-2 comprende la sustitución del aminoácido que, en la secuencia de dicha proteína F de virus PIV-2, está en posición 151, por un aminoácido hidrófobo seleccionado de entre V, I, L, preferiblemente V. 45

19. Proteína mutante según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 18, caracterizada por que comprende una secuencia que difiere de la de la proteína F de un virus PIV-5 o PIV-2 por sustitución del sitio de escisión nativo de dicha proteína F por otro sitio de escisión enzimático, y/o por inserción en dicha proteína F de un sitio de escisión enzimático diferente del sitio de escisión nativo de esta proteína F. 50

20. Proteína mutante según la reivindicación 19, caracterizada por que dicho sitio de escisión diferente del sitio de escisión nativo es un sitio de escisión específico de tejido.

21. Proteína mutante según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 20, caracterizada por que es fusogénica. 55

22. Ácido nucleico, ADN o ARN, que codifica una proteína mutante según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 21, o ácido nucleico complementario de tal ácido nucleico.

23. Vector de transfección, transducción o transformación, que comprende al menos un ácido nucleico según la 60 reivindicación 22.

24. Vector de expresión según la reivindicación 23, caracterizado por que es un vector adenoviral oncolítico.

25. Célula, caracterizada por que comprende al menos una proteína mutante según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 21, y/o al menos un ácido nucleico, ADN o ARN según la reivindicación 22, y/o al menos un vector según la reivindicación 23 o 24.

26. Proteína mutante según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 21, un ácido nucleico, ADN o ARN según la 5 reivindicación 22, un vector según la reivindicación 23 o 24, una célula según la reivindicación 25, para una utilización en el tratamiento y/o la prevención y/o la paliación de una enfermedad o de un estado neoplásico, preferiblemente de un tumor metastásico, preferiblemente de un melanoma metastásico.

27. Proteína mutante según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 21, un ácido nucleico, ADN o ARN según la 10 reivindicación 22, un vector según la reivindicación 23, una célula según la reivindicación 24, para una utilización en el tratamiento y/o la prevención y/o la paliación de una deficiencia del desarrollo placentario.

28. Inhibidor de la fusión celular, caracterizado por que es:

- un anticuerpo dirigido contra una proteína mutante según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 21, o un fragmento Fab o F (ab') 2 de tal anticuerpo,

- un ácido nucleico aptámero o un péptido aptámero que se une específicamente a al menos una proteína mutante según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 21, o a un ácido nucleico, ADN, ARN según la reivindicación 22, 20

- una célula del sistema inmunitario recombinante, preferiblemente una célula dendrítica recombinante, que expresa en su superficie al menos una proteína mutante según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 21,

- un ácido nucleico anti-sentido de un ácido nucleico según la reivindicación 22, 25

- un pequeño ARN interferente (small interfering RNA; siRNA) que comprende un ARN bicatenario de 19 a 22 nucleótidos, capaz de unirse a un ácido nucleico según la reivindicación 22.

29. Célula según la reivindicación 25, que es una célula del sistema inmunitario humano o animal no humano, 30 preferiblemente una célula dendrítica humana o animal no humana, expresando dicha célula en su superficie al menos una proteína mutante según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 21.

30. Inhibidor de fusión celular según la reivindicación 28, para una utilización en el tratamiento y/o la prevención y/o la paliación de una enfermedad o de un estado que implique un exceso de fusogenicidad celular, siendo dicha 35 enfermedad o estado una infección por virus con envoltura (preferiblemente una infección por VIH y/o Influenza y/o Parainfluenza y/o Rhabdovirus) , una alergia, una enfermedad autoinmune o un rechazo de injerto.

31. Proteína mutante según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 21, para una utilización a título de agente inmunógeno en el tratamiento y/o la prevención y/o la paliación de una enfermedad o de un estado que implique un 40 exceso de fusogenicidad celular, siendo dicha enfermedad o estado una infección por virus con envoltura (preferiblemente una infección por VIH y/o Influenza y/o Parainfluenza y/o Rhabdovirus) , una alergia, una enfermedad autoinmune o un rechazo de injerto.

32. Vacuna destinada al tratamiento y/o a la prevención y/o a la paliación de una enfermedad o de un estado que 45 implique un exceso de fusogenicidad celular, siendo dicha enfermedad o estado una infección por virus con envoltura (preferiblemente una infección por VIH y/o Influenza y/o Parainfluenza y/o Rhabdovirus) , una alergia, una enfermedad autoinmune o un rechazo de injerto, caracterizada por que comprende al menos una proteína mutante según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 21.

33. Método in vitro para el diagnóstico o el pronóstico de una enfermedad que implique una formación insuficiente, o por el contrario excesiva, de sincitio, caracterizado por que comprende la detección en una muestra biológica de al menos una proteína mutante según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 21 o de al menos un ácido nucleico según la reivindicación 22.

34. Método in vitro para el cribado de un compuesto capaz de disminuir o bloquear la formación de sincitio, caracterizado por que comprende la puesta en contacto de un compuesto candidato con unas células que expresan al menos una proteína mutante según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 21, a fin de determinar si este compuesto candidato disminuye o bloquea la fusión de dichas células.

35. Célula tumoral, más particularmente mieloma, que comprende al menos una proteína mutante según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 21, preferiblemente que comprende al menos tal proteína mutante en su superficie, y/o que comprende al menos un ácido nucleico según la reivindicación 22, y/o que comprende al menos un vector según la reivindicación 23.

36. Célula tumoral, más particularmente el mieloma, según la reivindicación 35, para una utilización en la producción de un hibridoma.

37. Hibridoma, caracterizado por que comprende al menos una proteína mutante según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 21, y/o al menos un ácido nucleico según la reivindicación 22, y/o al menos un vector según la 5 reivindicación 23.

38. Célula madre o progenitora, que presenta una capacidad de diferenciación en célula muscular, caracterizada por que comprende al menos una proteína mutante según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 21, preferiblemente que comprende al menos tal proteína mutante en su superficie, y/o que comprende al menos un ácido nucleico según la 10 reivindicación 22, y/o que comprende al menos un vector según la reivindicación 23, no siendo dicha célula una célula embrionaria humana.

39. Célula madre o progenitora de la reivindicación 38, para una utilización como célula madre o progenitora de fibra muscular. 15