Variantes de la T7 ARN polimerasa con sustituciones de Cisteína-Serina.
(15/04/2015) Una solución acuosa en la que está ausente un agente reductor con un grupo tiol, comprendiendo la solución acuosa un polipéptido, comprendiendo el polipéptido una variante de la T7 ARN polimerasa (variante de T7), teniendo la variante de T7 las propiedades de (i) actividad de ARN polimerasa dependiente de ADN, y (ii) una composición distinta de aminoácidos en comparación con el polipéptido de 883 aminoácidos de la T7 ARN polimerasa de SEC ID Nº: 2 (referencia de tipo silvestre),
en la que en una posición seleccionada de la 510 a la 530 de la variante de T7, numerada a partir del extremo N-terminal de la referencia de tipo silvestre, está presente un resto de Cisteína,
en la que la variante de T7 comprende una o más sustituciones de aminoácidos de las cuales una (o la primera) está en la posición…
Polimerasas libres de detergente.
(26/11/2014) Mezcla de reacción libre de cualquier detergente que comprende una formulación de una ADN polimerasa termoestable que está completamente libre de detergentes, que comprende Tris/HCl 10 a 50 mM, EDTA 0,05-0,2 mM, DTT 0,5-2 mM, cloruro de potasio 50-200 mM y glicerol al 20-80 %,
- un ácido nucleico de molde, que preferentemente es un ADN,
- al menos un cebador que es un oligonucleótido que se puede unir a dicho ADN, y
- 4 dNTP,
que comprende adicionalmente al menos un par de sondas de hibridación de FRET.
Composición seca de compuestos de reacción con una polimerasa estabilizada.
(05/02/2013) Método para producir una composición seca de los compuestos de reacción almacenable, y dicho método incluyelos pasos de
a) proporcionar una mezcla líquida de compuestos de reacción, y dicha mezcla líquida incluye cebadores,nucleótidos, una Taq DNA polimerasa y una primera molécula estabilizante, donde dicha primera moléculaestabilizante es una proteína, y
b) secar dicha mezcla líquida mediante la reducción de la presión que envuelve a dicha mezcla líquida,en el que dicha composición seca de los compuestos de reacción es soluble en solución acuosa,caracterizada de manera que dicha mezcla líquida de los compuestos de reacción del paso a) también incluye…
Una composición acuosa estabilizada de alfa-galactosidasa y métodos relacionados con la misma.
(19/09/2012) Una composición acuosa que comprende una proteína bacteriana con actividad enzimática alfa-galactosidasa,que se caracteriza en que dicha composición contiene arginina a una concentración por encima de 100 mM, enparticular a una concentración de al menos 150 mM, y en la que la conductividad de dicha composición es comomucho 40 mS/cm.
METODO PARA LA PRODUCCION DE UNA TRANSCRIPTASA INVERSA AMV HETERODIMERICA ACTIVA, EN CELULAS PROCARIOTAS.
(18/10/2010) Método para la producción de una AMV-RT heterodimérica activa en células procariotas, en el que
(i) se clonan una o varias secuencias de ADN que codifican las cadenas a y/o ß de la AMV-RT en plásmidos de expresión,
(ii) los plásmidos de expresión se transforman en células procariotas,
(iii) se induce la expresión soluble de la AMV-RT heterodimérica, y
(iv) se aísla la AMV-RT heterodimérica recombinante de las células, en el que la expresión se produce a una temperatura de crecimiento de aproximadamente 15ºC y a una concentración de inductor entre 0,1 M y 0,5 M
ENZIMAS TERMOESTABLES MODIFICADAS REVERSIBLEMENTE PARA LA SINTESIS Y LA AMPLIFICACION DE DNA IN VITRO.
(16/11/2007) La composición que comprende una primera enzima modificada termoestable que muestra actividad exonucleasa 3'', que prácticamente no muestra actividad DNA-polimerasa y una segunda enzima modificada termoestable que muestra actividad DNA-polimerasa, considerando que la fidelidad del proceso de amplificación se mejora con el uso de la composición en un proceso de amplificación, en comparación con el uso de la segunda enzima solamente y, considerando que dichas primera y segunda enzimas termoestables modificadas se modifican reversiblemente mediante un reactivo inhibidor que provoca prácticamente una inactivación completa de la actividad enzimática, en la que la incubación de dichas primera y segunda…
ENZIMA TERMOESTABLE QUE PROMUEVE LA FIDELIDAD DE LAS POLIMERASAS DE DNA TERMOESTABLES PARA LA MEJORA DE LA SINTESIS Y AMPLIFICACION DE ACIDOS NUCLEICOS IN VITRO.
Sección de la CIP Química y metalurgia
(01/04/2007). Solicitante/s: ROCHE DIAGNOSTICS GMBH. Clasificación: C12Q1/68, C12N15/10, C12N9/12, C12N15/55, C12N15/54, C12P19/34, C12N9/22.
Una composición que comprende una primera enzima termoestable que muestra actividad exonucleasa 3' pero no actividad polimerasa de DNA y una segunda enzima termoesta- ble que muestra actividad polimerasa de DNA, en la que la fidelidad de un proceso de amplificación está potenciada por la utilización de la composición comparado con el uso de la segunda enzima únicamente.