Una composición acuosa estabilizada de alfa-galactosidasa y métodos relacionados con la misma.
(19/09/2012) Una composición acuosa que comprende una proteína bacteriana con actividad enzimática alfa-galactosidasa,que se caracteriza en que dicha composición contiene arginina a una concentración por encima de 100 mM, enparticular a una concentración de al menos 150 mM, y en la que la conductividad de dicha composición es comomucho 40 mS/cm.
Fosfatasa alcalina codón-optimizada y su expresión en levadura.
(11/04/2012) Cepa huésped transformada que se obtiene al llevar a cabo las etapas
(a) clonación de una secuencia genética codón-optimizada que codifica para una fosfatasa alcalina eucariota en un primer vector de expresión con un gen de resistencia a un primer antibiótico, y en un segundo vector de expresión con un gen de resistencia a un segundo antibiótico; seguido de
(b) transformación de un huésped de levadura con un primer vector de expresión y la selección de transformantes que tienen integrados en el genoma, por lo menos, una copia del primer vector de expresión con una secuencia genética y el gen de resistencia al primer antibiótico, por medio de su crecimiento sobre un medio de cultivo con una baja concentración del primer antibiótico; seguido de
(c) aumento del número de copias de genes del primer vector de…
ESCISIÓN DE PRECURSORES DE INSULINAS MEDIANTE UNA VARIANTE DE TRIPSINA.
(21/12/2011) Procedimiento para preparar insulina, un análogo de insulina o un derivado de insulina, en el que (a) una pre-pro-insulina, un análogo de pre-pro-insulina o un derivado de pre-pro-insulina se escinde con tripsina porcina Ser172Ala caracterizada por la SEQ ID NO. 3, (b) los productos de la escisión resultantes se separan y (aa) si uno de los productos de la escisión resultantes es un análogo de insulina o un derivado de insulina, se obtiene este análogo de insulina o derivado de insulina, o (cc) siendo esos productos de la escisión precursores de insulina, un análogo de insulina o un derivado de insulina se procesan adicionalmente, y la insulina, el análogo de insulina o el derivado de…
METODO PARA LA PRODUCCION DE UNA TRANSCRIPTASA INVERSA AMV HETERODIMERICA ACTIVA, EN CELULAS PROCARIOTAS.
(18/10/2010) Método para la producción de una AMV-RT heterodimérica activa en células procariotas, en el que
(i) se clonan una o varias secuencias de ADN que codifican las cadenas a y/o ß de la AMV-RT en plásmidos de expresión,
(ii) los plásmidos de expresión se transforman en células procariotas,
(iii) se induce la expresión soluble de la AMV-RT heterodimérica, y
(iv) se aísla la AMV-RT heterodimérica recombinante de las células, en el que la expresión se produce a una temperatura de crecimiento de aproximadamente 15ºC y a una concentración de inductor entre 0,1 M y 0,5 M
ELABORACION DE MUTANTES DE UNA FOSFATASA ALCALINA, INACTIVOS O DE REDUCIDA ACTIVIDAD Y SU EXPRESION EN LEVADURA.
(28/04/2010) Mutantes de la fosfatasa alcalina eucariótica, en donde,
- la frecuencia a mutar, es la SEQ ID NO:2, y
- el mutante, presenta una actividad reducida como mínimo en un factor de 100, en comparación con la del tipo salvaje,
el mutante, presente una o varias de las mutaciones que se citan a continuación, y en donde, la posición de la mutación, se encuentra definida con relación a la SEQ ID NO: 2:
Ser92:por Ala ó Gly
His320:por Asn ó Phe
Gly 322:por Phe ó Lys
CARBOXIPEPTIDASA B RECOMBINANTE Y SU PURIFICACION.
(28/04/2010) Un método para producir una proteína con actividad carboxipeptidasa B, que comprende los pasos de
(a) proporcionar un vector que comprende una secuencia de nucleótidos que codifica una pre-proteína que consiste en una procarboxipeptidasa B de rata que está fusionada en N-terminal con una cola de histidinas y un péptido señal, siendo el péptido señal la secuencia N-terminal de la pre-proteína, e insertándose opcionalmente entre la cola de histidinas y el péptido señal o entre la cola de histidinas y la carboxipeptidasa B de rata una secuencia espaciadora;
(b) transformar un organismo microbiano huésped con el vector;
(c) cultivar el organismo microbiano huésped en un medio de cultivo que contiene nutrientes y una fuente de carbono, expresando el organismo microbiano huésped la pre-proteína y secretándose la pro-carboxipeptidasa…
EXPRESION DE LA FOSFATASA ALCALINA EN LEVADURA.
(01/11/2007) Procedimiento para la obtención de una fosfatasa alcalina eucariota en células de levadura que consta de los pasos siguientes: a) clonación de una secuencia genética en diversos vectores, b) transformación de la levadura, c) expresión y d) purificación de la fosfatasa alcalina, caracterizado porque - un primer vector presenta un gen de resistencia contra un primer marcador de selección, - se seleccionan los transformantes, que han integrado el gen de resistencia y la secuencia genética en el genoma, mediante el cultivo en un medio nutritivo que tiene una baja concentración del primer marcador de selección, - se aumenta el número de copias del gen por transformación múltiple, seleccionándose los transformantes múltiples por cultivo en un medio nutritivo…
EXPRESION DE LA PROTEINASA K RECOMBINANTE DE TRITIRACHIUM ALBUM EN LEVADURA.
Sección de la CIP Química y metalurgia
(16/09/2007). Ver ilustración. Solicitante/s: ROCHE DIAGNOSTICS GMBH F.HOFFMANN-LA ROCHE AG. Clasificación: C12N15/09, C12N15/55, C12N1/19, C12P21/00, C12N15/52, C12N9/58, C12N9/60, C12N15/67, C12N15/80, C12N15/66.
Procedimiento para la obtención de proteinasa K recombinante que consta de los pasos siguientes: a) la transformación de una célula hospedante con un vector que contiene un DNA que codifica al compuesto previo zimógeno de la proteinasa K, este DNA está fusionado en la parte ascendente (upstream) de la secuencia codificadora con una secuencia del marco de lectura, que codifica a un péptido de señal y está bajo el control de un promotor adecuado para la célula hospedante, b) la expresión del compuesto zimógeno previo de la proteinasa K, c) la secreción y la activación autocatalítica de la proteinasa K, caracterizado porque la célula hospedante es una célula de levadura elegida entre el grupo formado por la especie Pichia, la especie Hansenula, la especie Saccharomyces y la especie Schizosaccharomyces y el hospedante de expresión secreta la proteína en forma soluble.