Métodos y kits para detectar la actividad de proteasa en muestras complejas.

Un método para medir actividad de proteasa en una muestra de pienso,

que comprende:

(a) añadir un sustrato para una proteasa a una muestra de pienso que comprende la actividad de proteasa que debe medirse, en la que el sustrato es insoluble en solución acuosa y comprende un polipéptido unido a un grupo productor de señal de cromóforo, de manera que la señal se produce con el corte del polipéptido por parte de la proteasa, en donde el pienso es un pienso animal y la proteasa es un tipo de proteasa que se añade al pienso animal para mejorar la digestibilidad de las proteínas del pienso, en donde el polipéptido es caseína y en donde el pienso animal es un pienso granulado;

(b) incubar el sustrato con la muestra de pienso en un tampón de reacción esencialmente libre de fosfato, que comprende 5% a 15% de dodecilsulfato sódico (SDS) a un pH comprendido entre 6,5 y 10 y a una temperatura de 30ºC a 65ºC durante un periodo de tiempo comprendido entre 30 minutos y 5 horas, para permitir el corte del polipéptido, de manera que se produce la señal para la medición de la actividad de proteasa, y

(c) medir la actividad de proteasa mediante inspección visual de un cambio de color resultante de la señal producida por el cromóforo.

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/US2014/023222.

Solicitante: Bioresource International, Inc.

Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.

Dirección: 4222 Emperor Blvd. 460 Durham, NC 27703 ESTADOS UNIDOS DE AMERICA.

Inventor/es: WANG,JENG-JIE, TALBOT,BONNYE, KACZOWKA,STEVEN.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • A23K20/189 NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA.A23 ALIMENTOS O PRODUCTOS ALIMENTICIOS; SU TRATAMIENTO, NO CUBIERTO POR OTRAS CLASES.A23K ALIMENTOS PARA ANIMALES; METODOS ESPECIALMENTE ADAPTADOS PARA SU PRODUCCION.A23K 20/00 Factores alimenticios complementarios para alimentos de animales. › Enzimas.
  • C12Q1/37 QUIMICA; METALURGIA.C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA.C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS, ÁCIDOS NUCLEICOS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas, ácidos nucleicos o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › peptidasa o proteinasa.

PDF original: ES-2714295_T3.pdf

 

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