Método para la detección de un ácido nucleico diana.

Un método para la detección de dos o más ácidos nucleicos diana en una muestra,

que comprende:

preparar una fase sólida que comprende sondas de detección que tienen respectivamente ciertas secuencias de bases diferentes;

llevar a cabo una PCR en la muestra para obtener ADN quiméricos que tienen cada uno un marcador y una secuencia marcadora complementaria a cada una de las sondas de detección que se han correlacionado con los ácidos nucleicos diana; poner en contacto los ADN quiméricos con las sondas de detección de manera que los ADN quiméricos y las sondas de detección se puedan hibridar por medio de las secuencias marcadoras;

obtener información de intensidad de la señal basándose en el marcador de la fase sólida; y

detectar los ácidos nucleicos diana basándose en la información de intensidad de la señal en donde las secuencias diana de los ácidos nucleicos diana se seleccionan de entre secuencias características que tienen secuencias de bases genéticamente indicativas de la constitución o la incidencia de enfermedades, diagnóstico de enfermedades, pronóstico de enfermedades, selección de fármacos o tratamiento de enfermedades específicas tales como enfermedades genéticas o cáncer en seres humanos y animales no humanos y secuencias de bases que se derivan de microorganismos tales como patógenos y virus y en donde las secuencias diana no contienen polimorfismos y la etapa de PCR comprende:

la preparación de primeros cebadores que tienen secuencias de identificación complementarias a cada una de las secuencias diana de los ácidos nucleicos diana y secuencias de adición de marcador complementarias a las secuencias marcadoras y un segundo cebador que tiene una secuencia parcial idéntica a una secuencia parcial adyacente a la secuencia diana y al marcador,

la realización de una PCR de la muestra utilizando los primeros cebadores y el segundo cebador para sintetizar los ADN quiméricos que tienen una secuencia diana, una secuencia marcadora y el marcador; y en donde la etapa de PCR es la etapa de utilización, para dos o más ácidos nucleicos diana, de dos o más primeros cebadores y un segundo cebador común a los dos o más ácidos nucleicos diana.

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/JP2010/068964.

Solicitante: NGK INSULATORS, LTD..

Nacionalidad solicitante: Japón.

Dirección: 2-56, Suda-cho Mizuho Nagoya-shi, Aichi 467-8530 JAPON.

Inventor/es: KAWASE, MITSUO, HIROTA,TOSHIKAZU, NIWA,KOUSUKE.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • C12M1/00 SECCION C — QUIMICA; METALURGIA.C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA.C12M EQUIPOS PARA ENZIMOLOGIA O MICROBIOLOGIA (instalaciones para la fermentación de estiércoles A01C 3/02; conservación de partes vivas de cuerpos humanos o animales A01N 1/02; aparatos de cervecería C12C; equipos para la fermentación del vino C12G; aparatos para preparar el vinagre C12J 1/10). › Equipos para enzimología o microbiología.
  • C12N15/09 C12 […] › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN (biocidas, productos que repelen o atraen a los animales nocivos, o reguladores del crecimiento de los vegetales, que contienen microorganismos virus, hongos microscópicos, enzimas, productos de fermentación o sustancias obtenidas por o extraídas de microorganismos o sustancias animales A01N 63/00; preparaciones de uso médico A61K; fertilizantes C05F ); PROPAGACION,CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 15/00 Técnicas de mutación o de ingeniería genética; ADN o ARN relacionado con la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos, o su aislamiento, su preparación o su purificación; Utilización de huéspedes para ello (mutantes o microorganismos modificados por ingeniería genética C12N 1/00, C12N 5/00, C12N 7/00; nuevas plantas en sí A01H; reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00; nuevas razas animales en sí A01K 67/00; utilización de preparaciones medicinales que contienen material genético que es introducido en células del cuerpo humano para tratar enfermedades genéticas, terapia génica A61K 48/00; péptidos en general C07K). › Tecnología del ADN recombinante.
  • C12Q1/68 C12 […] › C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › en los que intervienen ácidos nucleicos.
  • G01N33/53 SECCION G — FISICA.G01 METROLOGIA; ENSAYOS.G01N INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION DE SUS PROPIEDADES QUIMICAS O FISICAS (procedimientos de medida, de investigación o de análisis diferentes de los ensayos inmunológicos, en los que intervienen enzimas o microorganismos C12M, C12Q). › G01N 33/00 Investigación o análisis de materiales por métodos específicos no cubiertos por los grupos G01N 1/00 - G01N 31/00. › Ensayos inmunológicos; Ensayos en los que interviene la formación de uniones bioespecíficas; Materiales a este efecto.
  • G01N33/543 G01N 33/00 […] › con un soporte insoluble para la inmovilización de compuestos inmunoquímicos.
  • G01N37/00 G01N […] › Detalles no cubiertos por ningún grupo de esta subclase.

PDF original: ES-2672122_T3.pdf

 

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