Producción de una línea de células beta humanas a partir de un páncreas postnatal temprano.

Un método para preparar células beta pancreáticas humanas o tumores de células beta humanas,

que comprende las etapas de:

a) disociar con colagenasa in vitro, el tejido pancreático humano neonatal de un individuo de menos de 5 años de edad, para obtener células pancreáticas humanas neonatales;

b) transducir y co-transducir las células pancreáticas humanas neonatales obtenidas en la etapa a) con i) un vector lentiviral que expresa el antígeno T SV40 Grande bajo el control del promotor de insulina, o ii) con un vector lentiviral que expresa el antígeno T SV40 Grande bajo el control del promotor de insulina y un vector lentiviral que expresa hTERT bajo el control del promotor de insulina, o iii) un vector lentiviral que expresa tanto el antígeno T SV40 Grande como hTERT;

c) introducir las células pancreáticas neonatales transducidas obtenidas en b) dentro de la cápsula del riñón de un animal no humano con inmunodeficiencia comprometida severa (scid);

d) permitir a las células del páncreas transducidas desarrollar estructuras similares al insulinoma, en donde las células del páncreas humanas neonatales en las estructuras similares al insulinoma tienen diferenciadas las células beta pancreáticas que producen insulina;

e) micro-diseccionar las estructuras similares al insulinoma obtenidas en la etapa de, disociar las células de las mismas;

f) sub-transplantar las células obtenidas en la etapa e) dentro de la cápsula del riñón de un nuevo animal no humano con scid;

g) permitir a las células sub-transplantadas en la etapa f) desarrollar y regenerar las estructuras similares al insulinoma, en donde dichas estructuras similares al insulinoma desarrolladas nuevamente están enriquecidas en células beta pancreáticas que producen insulina;

h) micro-diseccionar las estructuras similares al insulinoma obtenidas en la etapa g), y disociar y recoger las células de las mismas;

i) opcionalmente, sub-transplantar las células obtenidas en la etapa g) dentro de la cápsula del riñón de un nuevo animal no humano con scid, permitiendo además por lo tanto el enriquecimiento y la amplificación de células beta pancreáticas que producen insulina; y,

j) opcionalmente repetir las etapas f), g) y h) hasta obtener la cantidad apropiada de células beta pancreáticas que producen insulina.

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/EP2012/070612.

Solicitante: UNIVERCELL BIOSOLUTIONS.

Nacionalidad solicitante: Francia.

Dirección: 1 place Pierre POTIER 31100 Toulouse FRANCIA.

Inventor/es: CZERNICHOW, PAUL, SCHARFMANN,RAPHAËL, RAVASSARD,PHILIPPE.

Fecha de Publicación: 7 de Junio de 2017.

Clasificación Internacional de Patentes:

A01K67/027 NECESIDADES CORRIENTES DE LA VIDA. › A01 AGRICULTURA; SILVICULTURA; CRIA; CAZA; CAPTURA; PESCA. › A01K CRÍA DE ANIMALES; AVICULTURA; APICULTURA; PISCICULTURA; PESCA; ANIMALES PARA CRIA O REPRODUCCIÓN, NO PREVISTOS EN OTRO LUGAR; NUEVAS VARIEDADES DE ANIMALES. › A01K 67/00 Cría u obtención de animales, no prevista en otro lugar; Nuevas razas de animales. › Nuevas razas de vertebrados.
C12N5/071 QUIMICA; METALURGIA. › C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA. › C12N MICROORGANISMOS O ENZIMAS; COMPOSICIONES QUE LOS CONTIENEN; PROPAGACION, CULTIVO O CONSERVACION DE MICROORGANISMOS; TECNICAS DE MUTACION O DE INGENIERIA GENETICA; MEDIOS DE CULTIVO (medios para ensayos microbiológicos C12Q 1/00). › C12N 5/00 Células no diferenciadas humanas, animales o vegetales, p. ej. líneas celulares; Tejidos; Su cultivo o conservación; Medios de cultivo para este fin (reproducción de plantas por técnicas de cultivo de tejidos A01H 4/00). › Células o tejidos de vertebrados, p.ej. células o tejidos humanos.
C12N5/10 C12N 5/00 […] › Células modificadas por introducción de material genético extraño, p. ej. células transformadas por virus.

PDF original: ES-2634457_T3.pdf

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