Dispositivo para la detección de nucleótidos individuales.

Un dispositivo de secuenciación de ácidos nucleicos microfluido caracterizado por que comprende:



* una primera zona que comprende un sitio de unión contenido en ella, al cual se une el ácido nucleico a secuenciar; una primera tubería microfluida para hacer que un primer medio de pirofosforólisis acuoso fluya sobre el sitio de unión, permitiendo de este modo que el ácido nucleico se pirofosforolice de forma progresiva en sus nucleótidos trifosfato constituyentes y una segunda tubería microfluida para eliminar un segundo medio acuoso que fluye, que contiene los nucleótidos trifosfato, de alrededor del sitio de unión;

* un medio para crear microgotitas del segundo medio acuoso en un disolvente transportador inmiscible en agua, al menos algunas de las cuales contiene uno de dichos nucleótidos trifosfato, aguas abajo de la primera zona;

* medios de contacto dispuestos para introducir de forma consecutiva en el segundo medio acuoso del cual se componen las microgotitas, una o más de una pirofosfatasa, una ligasa, una polimerasa, un sistema de captura marcado con fluoróforos en un estado no detectable selectivo para al menos uno de los nucleótidos trifosfato obtenidos del ácido nucleico y una exonucleasa o polimerasa que tiene actividad exonucleasa, para liberar los fluoróforos detectables de cualquier sistema de captura utilizado mediante exonucleolisis;

* una serie de sitios de retención de microgotitas en los cuales cada microgotita se incuba hasta que se produce fluorescencia detectable;

* una tercera tubería microfluida para entregar de forma sucesiva cada microgotita a uno de los sitios de retención;

* un sistema de detección de fluorescencia que comprende una fuente de luz adaptada para impactar de forma sucesiva sobre cada sitio de retención tras la incubación, y;

* un detector para la detección de la fluorescencia allí emitida.

Tipo: Patente Europea. Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: E14194399.

Solicitante: Base4 Innovation Limited.

Nacionalidad solicitante: Reino Unido.

Dirección: Broers Building JJ Thomson Avenue Cambridge CB3 0FA REINO UNIDO.

Inventor/es: DEAR,PAUL, BALMFORTH,BARNABY, FRAYLING,CAMERON ALEXANDER, SOARES,BRUNO FLAVIO NOGUEIRA DE SOUSA, ISAAC,THOMAS HENRY, BREINER,BORIS, NATALE,ALESSANDRA, AMASIO,MICHELE.

Fecha de Publicación: .

Clasificación Internacional de Patentes:

  • B01L3/00 SECCION B — TECNICAS INDUSTRIALES DIVERSAS; TRANSPORTES.B01 PROCEDIMIENTOS O APARATOS FISICOS O QUIMICOS EN GENERAL.B01L APARATOS DE LABORATORIO PARA LA QUIMICA O LA FISICA, DE USO GENERAL (aparatos de uso médico o farmacéutico A61; aparatos para aplicaciones industriales o aparatos de laboratorio cuya estructura y funciones son comparables a las de aparatos industriales similares, ver las clases relativas a los aparatos industriales, en particular las subclases B01 y C12; aparatos de separación o de destilación B01D; dispositivos de mezcla o de agitación B01F; atomizadores B05B; tamices, cribas B07B; tapones, capuchones B65D; manipulación de líquidos en general B67; bombas de vacío F04; sifones F04F 10/00; grifos, válvulas F16K; tubos, empalmes para tubos F16L; aparatos especialmente adaptados al estudio y análisis de materiales G01, particularmente G01N; aparatos eléctricos u ópticos, ver las subclases apropiadas en las secciones G y H). › Recipientes o utensilios para laboratorios, p. ej. cristalería de laboratorio (botellas B65D; equipos para enzimología o microbiología C12M 1/00 ); Cuentagotas (recipientes para volumetría G01F).
  • C12Q1/68 SECCION C — QUIMICA; METALURGIA.C12 BIOQUIMICA; CERVEZA; BEBIDAS ALCOHOLICAS; VINO; VINAGRE; MICROBIOLOGIA; ENZIMOLOGIA; TECNICAS DE MUTACION O DE GENETICA.C12Q PROCESOS DE MEDIDA, INVESTIGACION O ANALISIS EN LOS QUE INTERVIENEN ENZIMAS O MICROORGANISMOS (ensayos inmunológicos G01N 33/53 ); COMPOSICIONES O PAPELES REACTIVOS PARA ESTE FIN; PROCESOS PARA PREPARAR ESTAS COMPOSICIONES; PROCESOS DE CONTROL SENSIBLES A LAS CONDICIONES DEL MEDIO EN LOS PROCESOS MICROBIOLOGICOS O ENZIMOLOGICOS. › C12Q 1/00 Procesos de medida, investigación o análisis en los que intervienen enzimas o microorganismos (aparatos de medida, investigación o análisis con medios de medida o detección de las condiciones del medio, p. ej. contadores de colonias, C12M 1/34 ); Composiciones para este fin; Procesos para preparar estas composiciones. › en los que intervienen ácidos nucleicos.
  • G01N35/08 SECCION G — FISICA.G01 METROLOGIA; ENSAYOS.G01N INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION DE SUS PROPIEDADES QUIMICAS O FISICAS (procedimientos de medida, de investigación o de análisis diferentes de los ensayos inmunológicos, en los que intervienen enzimas o microorganismos C12M, C12Q). › G01N 35/00 Análisis automático no limitado a procedimientos o a materiales tratados en uno sólo de los grupos G01N 1/00 - G01N 33/00; Manipulación de materiales a este efecto. › utilizando una corriente de muestras discretas circulando por una canalización, p. ej. análisis de inyección en flujo.

PDF original: ES-2620982_T3.pdf

 

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