Ensayo de transferencia de energía de resonancia con un resto de sustrato de sinaptobrevina.
Procedimiento basado en células de medición de la actividad proteasa de una proteasa BoNT,
que comprende:
proporcionar una célula transfectada que produce (I) una proteína híbrida que tiene una estructura de A-BC- D o (II) dos proteínas híbridas que tienen una estructura de A-C-B y A-C-D, respectivamente;
en la que A es un dominio transmembrana que no es escindible por la proteasa BoNT y que inserta a través de una membrana lipídica de forma tal que B, C y D se encuentran en el mismo lado de la membrana lipídica, B es una primera proteína fluorescente, C es una secuencia de reconocimiento y escisión de la proteasa BoNT y D es una segunda proteína fluorescente;
poner en contacto la célula transfectada con una proteasa BoNT en condiciones que permiten a la célula tomar la proteasa BoNT; y
medir la fluorescencia de al menos una de las primera y segunda proteínas fluorescentes en la célula transfectada.
Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/US2010/052847.
Solicitante: BioMadison, Inc.
Nacionalidad solicitante: Estados Unidos de América.
Dirección: 1568 Luneta Drive Del Mar, CA 92014 ESTADOS UNIDOS DE AMERICA.
Inventor/es: TUCKER,WARD, ZEYTIN,FÜSÛN N.
Fecha de Publicación: .
Clasificación Internacional de Patentes:
- C07H21/04 QUIMICA; METALURGIA. › C07 QUIMICA ORGANICA. › C07H AZUCARES; SUS DERIVADOS; NUCLEOSIDOS; NUCLEOTIDOS; ACIDOS NUCLEICOS (derivados de ácidos aldónicos o sacáricos C07C, C07D; ácidos aldónicos, ácidos sacáricos C07C 59/105, C07C 59/285; cianohidrinas C07C 255/16; glicales C07D; compuestos de constitución indeterminada C07G; polisacáridos, sus derivados C08B; ADN o ARN concerniente a la ingeniería genética, vectores, p. ej. plásmidos o su aislamiento, preparación o purificación C12N 15/00; industria del azúcar C13). › C07H 21/00 Compuestos que contienen al menos dos unidades mononucleótido que tienen cada una grupos fosfato o polifosfato distintos unidos a los radicales sacárido de los grupos nucleósido, p. ej. ácidos nucleicos. › con desoxirribosilo como radical sacárido.
- G01N33/53 FISICA. › G01 METROLOGIA; ENSAYOS. › G01N INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION DE SUS PROPIEDADES QUIMICAS O FISICAS (procedimientos de medida, de investigación o de análisis diferentes de los ensayos inmunológicos, en los que intervienen enzimas o microorganismos C12M, C12Q). › G01N 33/00 Investigación o análisis de materiales por métodos específicos no cubiertos por los grupos G01N 1/00 - G01N 31/00. › Ensayos inmunológicos; Ensayos en los que interviene la formación de uniones bioespecíficas; Materiales a este efecto.
- G01N33/573 G01N 33/00 […] › para enzimas o isoenzimas.
PDF original: ES-2576747_T3.pdf
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