Síntesis de conjugados poliméricos de compuestos de indolocarbazol.

Un procedimiento para la preparación de un conjugado polimérico de un compuesto de indolocarbazol de la fórmula (I):

en la que:

R1 y R2 son el mismo o un resto diferente y se seleccionan cada uno independientemente del grupo que consiste en: (a) hidrógeno, halógeno, alquilo inferior sustituido o no sustituido, alquenilo inferior sustituido o no sustituido, alquinilo inferior sustituido o no sustituido, hidroxi, alcoxi inferior, carboxi, alcoxicarbonilo inferior, acilo, nitro, carbamoílo, alquilaminocarbonilo inferior, -NR5R6, en el que R5 y R6 se seleccionan cada uno independientemente de hidrógeno, alquilo inferior sustituido o no sustituido, alquenilo inferior sustituido o no sustituido, alquinilo inferior sustituido o no sustituido, arilo sustituido o no sustituido, heteroarilo sustituido o no sustituido, aralquilo sustituido o no sustituido, alquilaminocarbonilo inferior sustituido o no sustituido, arilaminocarbonilo inferior sustituido o no sustituido, alcoxicarbonilo, carbamoílo, acilo o R5 y R6 se combinan con un átomo de nitrógeno para formar un grupo heterocíclico,

(b) -CO(CH2)jR4, en el que j es 1 a 6 y R4 se selecciona del grupo que consiste en:

(i) hidrógeno, halógeno, -N3,

(ii) -NR5R6, en el que R5 y R6 son como se definió anteriormente,

(iii) -SR7, en el que R7 se selecciona del grupo que consiste en: hidrógeno, alquilo inferior sustituido o no sustituido, alquenilo inferior sustituido o no sustituido, alquinilo inferior sustituido o no sustituido, arilo sustituido o no sustituido, heteroarilo sustituido o no sustituido, aralquilo sustituido o no sustituido, -(CH2)aCO2R10 (en el que a es 1 ó 2 y en el que R10 se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno y alquilo inferior sustituido o no sustituido) y -(CH2)aCO2NR5R6,

(iv) -OR8, -OCOR8, en los que R8 se selecciona de: hidrógeno, alquilo inferior sustituido o no sustituido, alquenilo inferior sustituido o no sustituido, alquinilo inferior sustituido o no sustituido, arilo sustituido o no sustituido, heteroarilo sustituido o no sustituido,

(c) -CH(OH)(CH2)j R4, en el que j y R4 son como se definió anteriormente.

Síntesis de conjugados poliméricos de compuestos de ¡ndolocarbazol.

La presente invención se refiere a un procedimiento para la preparación de conjugados poliméricos de compuestos de ¡ndolocarbazol, en particular de conjugados poliméricos de K-252a y derivados de los mismos, por una ruta sintética que da como resultado un producto muy puro, con un alto rendimiento de producto.

En un aspecto más la presente invención se refiere a nuevos conjugados poliméricos de K-252a y derivados de los mismos, en los que el grupo químico que une la unidad polimérica al compuesto K-252a o al compuesto derivado de K-252a se caracteriza por una estructura cíclica oxazolidindiónica de 5 miembros. Estos nuevos conjugados poliméricos se obtienen por la nueva ruta sintética con alta pureza y altos rendimientos.

En la bibliografía el potencial terapéutico de K-252a y derivados del mismo en la prevención, alivio y tratamiento de patologías asociadas a la cinasa, en particular de patologías asociadas a HMGB1 tales como trastornos neurológicos, neuropatías y trastornos neurodegenerativos del sistema nervioso central y periférico se describe (por ejemplo a partir de la patente europea PCT/EP25/8258, Annu Rev Pharmacol Toxicol. 2.4; 44: 451-74; Neurochem Int. Nov-Dic 2.1; 39 (5-6): 459-68; Neuroport. 9 de noviembre de 2.; 11 (16): 3.453-6; Neuroscience. Sep. 1.998; 86 (2): 461-72; Brains Res. 4 de julio de 1.994; 65 (1): 17-4). Por otra parte, el estado de la técnica describe la eficacia terapéutica de estos compuestos de ¡ndolocarbazol en la prevención, alivio y tratamiento de patologías dérmicas, en particular patologías dérmicas asociadas a una proliferación excesiva de queratinocitos, tales como soriasis (por ejemplo de la patente internacional WO 25/143, Raychaudhuri et al., J. Invest. Dermatol. 122: 812-819, 2.4). Aún además se indicó en la técnica que K-252a y sus derivados son útiles como agentes activos contra dolor relacionado con NGF (por ejemplo de Koizumi et al., J. Neurosci. 8: 715-721,

I. 988; Doherti et al., Neurosci. Lett. 96: 1-6, 1.989; Matsuda et al, Neurosci. Lett. 87: 11-17, 1.988, Winston JH et al.

J. Pain (2.3) 4: 329-337). Por lo tanto, la importancia biológica y la actividad terapéutica del compuesto de ¡ndolocarbazol K-252a y sus derivados se indican en la bibliografía (por ejemplo de Kim etal., Biol. Pharm. Bull. 21: 498-55, 1.998, Schneideret al., Org. Lett. 7: 1.695-1.698, 2.5).

Los conjugados poliméricos de K-252a y derivados de los mismos y su uso como agentes activos en composiciones farmacéuticas útiles para la prevención, alivio y tratamiento de patologías como se describió anteriormente se describen en la patente internacional WO 27/22999. Según la patente internacional WO 27/22999 el objetivo de la conjugación a un polímero y en particular de la pegilación de los compuestos derivados de ¡ndolocarbazol de K- 252a activos, es desarrollar formas de administración de dichos compuestos activos que permite una realización farmacocinética y toxicológica mejorada, consiguiendo la mejor biodisponibilidad de K-252a o de su derivado en las diversas posibles rutas de aplicación.

La propuesta sintética descrita en la patente internacional WO 27/22999 para la producción de los conjugados poliméricos de K-252a y sus derivados incluye una unión covalente del resto polimérico a la estructura del ¡ndolocarbazol del compuesto de K-252a o sus derivados. En particular la patente internacional WO 27/22999 describe la reacción de un polímero activado con isocianato con un grupo hidroxilo en la posición C3 del resto tetrahidrofurano del K-252a o su derivado en condiciones de reacción adecuadas, según lo cual se obtiene un enlace carbamida como unión covalente entre el resto polimérico y el compuesto activo.

Puesto que los conjugados poliméricos de K-252a y derivados de los mismos con una alta pureza son muy necesarios para aplicación médica, fue el objeto de la presente invención proporcionar un método para la producción de conjugados poliméricos de los compuestos de ¡ndolocarbazol activos, que da como resultado un producto de reacción muy puro, obtenido con rendimientos altos y consistentes. Por otra parte, el objetivo de la invención fue además eliminar etapas de purificación complejas y permitir una purificación y recuperación fáciles del compuesto conjugado polimérico diana, para maximizar la eficacia de la reacción de conjugación polimérica.

Sorprendentemente, los autores encontraron que haciendo reaccionar el K-252a o compuesto derivado con un resto polimérico de co-1-H-imidazol-carboxamida usado como reactivo polimérico de partida de la reacción de conjugación proporcionaba un procedimiento de conjugación controlada, obteniéndose así un rendimiento y una pureza mayores deseados del conjugado polimérico de ¡ndolocarbazol resultante.

Por lo tanto, la presente invención se refiere a un procedimiento para la preparación de un conjugado polimérico de un compuesto de ¡ndolocarbazol de la fórmula (I):

R3

formula (I)

en la que:

R1 y R2 son el mismo o un resto diferente y se seleccionan cada uno independientemente del grupo que consiste en:

(a) hidrógeno, halógeno, alquilo inferior sustituido o no sustituido, alquenilo inferior sustituido o no sustituido, alquinilo inferior sustituido o no sustituido, hidroxi, alcoxi inferior, carboxi, alcoxicarbonilo inferior, acilo, nitro, carbamoílo, alquilaminocarbonilo inferior, -NR5R6, en el que R5 y R6 se seleccionan cada uno independientemente de hidrógeno, alquilo inferior sustituido o no sustituido, alquenilo inferior sustituido o no sustituido, alquinilo inferior sustituido o no sustituido, arilo sustituido o no sustituido, heteroarilo sustituido o no sustituido, aralquilo sustituido o no sustituido, alquilaminocarbonilo inferior sustituido o no sustituido, arilaminocarbonilo inferior sustituido o no sustituido, alcoxicarbonilo, carbamoílo, acilo o R5 y R6 se combinan con un átomo de nitrógeno para formar un grupo heterocíclico,

(b) -CO(CH2)jR4, en el que j es 1 a 6 y R4 se selecciona del grupo que consiste en :

(i) hidrógeno, halógeno, -N3,

(ii) -NR5R6, en el que R5 y R6son como se definió anteriormente,

(iii) -SR7, en el que R7 se selecciona del grupo que consiste en: hidrógeno, alquilo inferior sustituido o no sustituido, alquenilo inferior sustituido o no sustituido, alquinilo inferior sustituido o no sustituido, arilo sustituido o no sustituido, heteroarilo sustituido o no sustituido, aralquilo sustituido o no sustituido, -(CH2)aC2R1° (en el que a es 1 ó 2 y en el que R1 se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno y alquilo inferior sustituido o no sustituido) y -

(CH2)aC2NR5R6,

(iv) -OR8, -OCOR8, en los que R8 se selecciona de hidrógeno, alquilo inferior sustituido o no sustituido, alquenilo inferior sustituido o no sustituido, alquinilo inferior sustituido o no sustituido, arilo sustituido o no sustituido, heteroarilo sustituido o no sustituido

(c) -CH(OH)(CH2)j R4 en el que j y R4 son como se definió anteriormente;

(d) -(CH2)dCHR11C2R12 o -(CH2)dCHR11CONR5R6, en los que d es a 5, R11 es hidrógeno, -CONR5R6 o -C2R13, en el que R13 es hidrógeno o en el que alquilo inferior sustituido o no sustituido y R12 es hidrógeno o un alquilo inferior sustituido o no sustituido;

(e) -(CH2)i<R14 en el que k es 2 a 6 y R14 es halógeno, arilo sustituido o no sustituido, heteroarilo sustituido o no sustituido, -COOR15, -OR15, (en los que R15 es hidrógeno, alquilo inferior sustituido o no sustituido, alquenilo inferior sustituido o no sustituido, alquinilo inferior sustituido o no sustituido, arilo sustituido o no sustituido, heteroarilo o acilo sustituido o no sustituido), -SR7 (en el que R7 es como se definió anteriormente), -CONR5R6, -NR5R6 (en los que R5 y R6 son como se definió anteriormente) o -N3;

(f) -CH=CH(CH2)mR16, en el que m es a 4 y R16 es hidrógeno, alquilo inferior sustituido o no sustituido, alquenilo inferior sustituido o no sustituido, alquinilo inferior sustituido o no sustituido, arilo sustituido o no sustituido, heteroarilo sustituido o no sustituido, -COOR15, -OR15 (en los que R15 es como se definió anteriormente) -CONR5R6 o -NR5R6 (en los que R5 y R6 son como se definió anteriormente);

(g) -CH=C(C2R12)2, en el que R12 es como se definió anteriormente;

(h) -C=C(CH2)nR16, en el que n es a 4 y R16 es como se definió anteriormente;

(i) -CH2OR22, en el que R22 es tri-(alquilo inferior)sililo en que los tres grupos alquilo inferiores son el mismo o diferentes o en el que R22 tiene el mismo significado que R8.

(j) -CH(SR23)2 y -CH2-SR7 en el que R23 es alquilo Inferior, alquenilo inferior o alquinilo Inferior y en el que R7... [Seguir leyendo]

1. Un procedimiento para la preparación de un conjugado polimérico de un compuesto de indolocarbazol de la fórmula (I):

fórmula (I)

en la que:

R1 y R2 son el mismo o un resto diferente y se seleccionan cada uno independientemente del grupo que consiste en:

(a) hidrógeno, halógeno, alquilo inferior sustituido o no sustituido, alquenilo inferior sustituido o no sustituido, alquinilo inferior sustituido o no sustituido, hidroxi, alcoxi inferior, carboxi, alcoxicarbonilo inferior, acilo, nitro, carbamoílo, alquilaminocarbonilo inferior, -NR5R6, en el que R5 y R6 se seleccionan cada uno independientemente de hidrógeno, alquilo inferior sustituido o no sustituido, alquenilo inferior sustituido o no sustituido, alquinilo inferior sustituido o no sustituido, arilo sustituido o no sustituido, heteroarilo sustituido o no sustituido, aralquilo sustituido o no sustituido, alquilaminocarbonilo inferior sustituido o no sustituido, arilaminocarbonilo inferior sustituido o no sustituido, alcoxicarbonilo, carbamoílo, acilo o R5 y R6 se combinan con un átomo de nitrógeno para formar un grupo heterocíclico,

(b) -CO(CH2)jR4, en el que j es 1 a 6 y R4 se selecciona del grupo que consiste en:

(i) hidrógeno, halógeno, -N3,

(ii) -NR5R6, en el que R5 y R6son como se definió anteriormente,

(iii) -SR7, en el que R7 se selecciona del grupo que consiste en: hidrógeno, alquilo inferior sustituido o no sustituido, alquenilo inferior sustituido o no sustituido, alquinilo inferior sustituido o no sustituido, arilo sustituido o no sustituido, heteroarilo sustituido o no sustituido, aralquilo sustituido o no sustituido, -(CH2)aC2R1 (en el que a es 1 ó 2 y en el que R1 se selecciona del grupo que consiste en hidrógeno y alquilo inferior sustituido o no sustituido) y -(CH2)aC2NR5R6,

(iv) -OR8, -OCOR8, en los que R8 se selecciona de: hidrógeno, alquilo inferior sustituido o no sustituido, alquenilo inferior sustituido o no sustituido, alquinilo inferior sustituido o no sustituido, arilo sustituido o no sustituido, heteroarilo sustituido o no sustituido,

(c) -CH(OH)(CH2)j R4, en el que j y R4son como se definió anteriormente;

(d) -(CH2)dCHR11C2R12 o -(CH2)dCHR11CONR5R6, en los que d es a 5, R11 es hidrógeno, -CONR5R6 o -C2R13, en el que R13 es hidrógeno o en el que alquilo inferior sustituido o no sustituido y R~ es hidrógeno o un alquilo inferior sustituido o no sustituido;

(e) -(CH2)kR14 en el que k es 2 a 6 y R14 es halógeno, arilo sustituido o no sustituido, heteroarilo sustituido o no sustituido, -COOR15, -OR15, (en los que R15 es hidrógeno, alquilo inferior sustituido o no sustituido, alquenilo inferior sustituido o no sustituido, alquinilo inferior sustituido o no sustituido, arilo sustituido o no sustituido, heteroarilo o acilo sustituido o no sustituido), -SR7 (en el que R7 es como se definió anteriormente), -CONR5R6, -NR5R6 (en los que R5 y R6 son como se definió anteriormente) o -N3;

(f) -CH=CH(CH2)mR16, en el que m es a 4 y R16 es hidrógeno, alquilo inferior sustituido o no sustituido, alquenilo inferior sustituido o no sustituido, alquinilo inferior sustituido o no sustituido, arilo sustituido o no sustituido, heteroarilo sustituido o no sustituido, -COOR15, -OR15 (en los que R15 es como se definió anteriormente) -CONR5R6 o -NR5R6 (en los que R5 y R6 son como se definió anteriormente);

(g) -CH=C(C2R12)2, en el que R12 es como se definió anteriormente;

(h) -C=C(CH2)nR16, en el que n es a 4 y R16 es como se definió anteriormente;

(i) -CH2OR22, en el que R22 es tri-(alquil inferior)sililo en que los tres grupos alquilo inferiores son el mismo o diferentes o en el que R22 tiene el mismo significado que R8

(j) -CH(SR23)2 y -CH2-SR7 en el que R23 es alquilo inferior, alquenilo inferior o alquinilo inferior y en el que R7 es como se definió anteriormente y

R3 es hidrógeno, halógeno, acilo, carbamoílo, alquilo inferior sustituido o no sustituido, alquenilo sustituido o no sustituido, alquinilo inferior sustituido o no sustituido o amino,

según lo cual el término "alquilo inferior", cuando se usa solo o junto con otros grupos, se refiere a un grupo alquilo inferior de cadena lineal o ramificado que contiene de 1-6 átomos de carbono;

el término "alquenilo inferior" se refiere a grupos alquenilo C2-C6 que pueden ser de cadena lineal o ramificados y pueden estar en la forma Z o E;

el término grupos "alquinilo inferior" se refiere a grupos alquinilo C2-C6 que pueden ser de cadena lineal o ramificados y

el término "alcoxi inferior" se refiere a un grupo alcoxi que contiene de 1 a 6 átomos de carbono y W1 y W2 son independientemente hidrógeno, hidroxi o W1 y W2 representan juntos oxígeno y en los que X es un resto polimérico,

según lo cual el procedimiento comprende hacer reaccionar un compuesto polimérico de ro-IH-imidazol-carboxamida de fórmula general (II)

X

fórmula (II)

en la que X se define como anteriormente con un compuesto de indolocarbazol de fórmula general (III)

fórmula (III)

en la que R-i, R2, R3, W1 y W2 se definen como anteriormente y que están protegidos opcionalmente por grupos protectores y en la que Y representa un grupo saliente y en la que el procedimiento comprende además opcionalmente desprotegerlos grupos R1, R2, R3, W1 y W2 para obtener el compuesto de la Fórmula (I).

2. El procedimiento según la reivindicación 1, en el que el procedimiento se realiza en la presencia de una base en un disolvente orgánico, en el que la base se puede seleccionar del grupo de hidruros de metal alcalino, en particular 3 hidruro de sodio, y en el que la relación molar de la base al compuesto de la fórmula (III) puede ser entre aproximadamente 1:1 y aproximadamente 4:1, preferiblemente aproximadamente 1:1 a aproximadamente 1,5:1 y más preferiblemente aproximadamente 1:1.

3. El procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 2, en el que el procedimiento se realiza en un disolvente orgánico, preferiblemente en un disolvente orgánico anhidro, seleccionado del grupo de diclorometano, cloroformo y N,N-dimetilformamida o en el que el procedimiento se realiza en atmósfera de gas inerte, preferiblemente en atmósfera de nitrógeno o argón.

4. El procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que el procedimiento se realiza a una temperatura de -1 a 6°C, preferiblemente de °C a 25°C y lo más preferiblemente a temperatura ambiente después de una etapa inicial a °C.

5. El procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que el compuesto conjugado polimérico de la fórmula (I) se obtiene directamente por purificación cromatográfica, en el que la purificación del compuesto conjugado polimérico de la fórmula (I) se realiza preferiblemente en un disolvente, seleccionado preferiblemente de diclorometano, agua, metanol, acetonitrilo, disolución tampón de formiato de amonio a diferentes relaciones de mezcla.

6. El procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, que da como resultado un rendimiento del compuesto de la fórmula (I) de aproximadamente 4% a aproximadamente 95% en peso, preferiblemente de aproximadamente 5% a aproximadamente 95% en peso basado en el peso del compuesto de la fórmula (III).

7. El procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que el grupo saliente Y se selecciona de un triflato, un tosilato, un mesilato, un sulfato, un halógeno, un hidroxi o un grupo alcoxi inferior y en el que el grupo saliente Y es preferiblemente un grupo alcoxi inferior, más preferiblemente un grupo metoxi.

8. El procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que el polímero X se selecciona de poli(óxidos de alquileno), en particular de óxidos de (polietileno), en el que el polímero X tiene preferiblemente un peso molecular de aproximadamente 1 a aproximadamente 1. Da, más preferiblemente de aproximadamente 2 a aproximadamente 5. Da y en el que el polímero X es preferiblemente un (polietilen)glicol (PEG), más preferiblemente seleccionado de polietilenglicoles alcoxi-sustituidos de manera terminal tales como metoxi-polietilenglicol (m-PEG).

9. El procedimiento según la reivindicación 8, en el que el polímero X es un (polietilen)glicol, por ej., un mPEG con un peso molecular promedio de aproximadamente 5 a aproximadamente 1. Da, porej., de aproximadamente 55 Da, aproximadamente 1.1 Da, aproximadamente 2. Da o aproximadamente 5. Da.

1. El procedimiento según una cualquiera de las reivindicaciones precedentes, en el que R-i, R2, R3, W1 y W2 son hidrógeno.

11. Un conjugado polimérico de un compuesto de indolocarbazol de la fórmula (I):

R3

R1

fórmula (I)

en la que:

R1, R2, R3i Wi, W2 y X son como se define en la reivindicación 1 o las reivindicaciones 8 a 1 o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en el que R1, R2, R3, W1 y W2 son preferiblemente hidrógeno y

en el que el polímero X es preferiblemente un (polietilen)glicol, por ej., un mPEG con un peso molecular promedio de aproximadamente 5 a aproximadamente 1. Da, por ej., de aproximadamente 55 Da, aproximadamente

1.1 Da, aproximadamente 2. Da o aproximadamente 5. Da.

12. Conjugado polimérico según la reivindicación 11, para uso como medicamento, porej., para aplicaciones tópicas o para aplicaciones sistémicas, porej., por inyección, infusión intravenosa o inhalación.

13. Composición farmacéutica que comprende al menos un conjugado polimérico de la reivindicación 11, opcionalmente junto con portadores, adyuvantes, diluyentes o/y aditivos farmacéuticamente aceptables, en particular para aplicaciones de diagnóstico o/y terapéuticas.

14. El conjugado polimérico según una de las reivindicaciones 11 ó 12, para uso como medicamento para la prevención, alivio o/y tratamiento de patologías asociadas a HMGB1, en particular seleccionadas de: estenosis, reestenosis, aterosclerosis, artritis reumatoide, enfermedades autoinmunitarias, tumores, enfermedades infecciosas, septicemia, lesión pulmonar inflamatoria aguda, lupus eritematoso, enfermedades neurodegenerativas, enfermedades del sistema nervioso central y periférico y esclerosis múltiple.

15. El conjugado polimérico para uso según la reivindicación 14, en el que el conjugado polimérico se inmoviliza de manera reversible en la superficie de un dispositivo médico.

16. El conjugado polimérico de la reivindicación 11, para uso:

(i) en la prevención, alivio y/o tratamiento de trastornos neurológicos, neuropatías y trastornos neurodegenerativos del sistema nervioso central y periférico,

(ii) en la prevención, alivio o/y tratamiento de patologías dérmicas, caracterizadas en particular por hiperproliferación de queratinocitos,

(iii) en la prevención, alivio o/y tratamiento de dolor relacionado con NGF e hiperalgesia,

(iv) en la prevención, alivio y/o tratamiento de enfermedades inflamatorias, enfermedades autoinmunitarias, síndrome de respuesta inflamatoria sistémica, lesión de revascularización después de trasplante de órganos, afecciones cardiovasculares, enfermedades obstétricas y ginecológicas, enfermedades infecciosas, enfermedades alérgicas y atópicas, patologías de tumores sólidos y líquidos, enfermedades de rechazo de trasplantes, enfermedades congénitas, enfermedades dermatológicas, enfermedades neurológicas, caquexia, enfermedades renales, afecciones de intoxicaciones iatrogénicas, enfermedades metabólicas e idiopáticas y enfermedades oftalmológicas o

(v) en la prevención, alivio y/o tratamiento de enfermedad de Behget, síndrome de Sjógren, vasculitis, uveitis, retinopatías.

17. El conjugado polimérico para uso según la reivindicación 16, en el que las patologías dérmicas son: soriasis, dermatitis atópica, eccema crónico, acné, pitiriasis rubra pilaris, queloides, cicatrices hipertróficas y tumores cutáneos, y en el que la patología dérmica es en particular soriasis.

18. El conjugado polimérico para uso según la reivindicación 17, para administración tópica, en particular en forma de liposomas.

19. El conjugado polimérico para uso según la reivindicación 16, para administración sistémica o junto con al menos un fármaco anti-inflamatorio.