Folistatina para usar en la regulación negativa de una respuesta inflamatoria.

Folistatina para uso en un método de regulación negativa de una respuesta inflamatoria en un mamífero,

en donde la respuesta inflamatoria se produce en el contexto de trasplante de pulmón, síndrome de dficultad respiratoria aguda grave o asma.

Folistatina para usar en la regulaciïn negativa de una respuesta inflamatoria

Campo de la invenciïn La presente invenciïn se refiere en general a agentes para usar en la modulaciïn de una respuesta inflamatoria en un mamïfero. Mïs particularmente, la presente invenciïn se refiere a la modulaciïn de una respuesta inflamatoria en un mamïfero modulando la actividad funcional de la activita y, de este modo, modulando la cascada de mediadores proinflamatorios. El uso de la presente invenciïn es ïtil, entre otros, en el tratamiento y/o profilaxis de afecciones caracterizadas por una respuesta inflamatoria aberrante, indeseada o, de otro modo, inadecuada, incluyendo, entre otros, sepsis e inflamaciïn de las vïas respiratorias. Tambiïn se describen procedimientos para identificar y/o diseïar agentes capaces de modular la regulaciïn mediada por la activina de la respuesta inflamatoria.

Antecedentes de la invenciïn Los detalles bibliogrïficos de las publicaciones a las que el autor hace referencia en la presente memoria descriptiva se recogen alfabïticamente al final de la descripciïn.

La referencia a cualquier tïcnica anterior en la presente memoria descriptiva no es un reconocimiento o cualquier forma o sugerencia de que la tïcnica anterior forma parte del conocimiento comïn general en Australia y no debe interpretarse como tal.

Los mamïferos tienen que defenderse contra muchos patïgenos, incluyendo virus, bacterias, hongos y parïsitos, asï

como agresiones no patogïnicas tales como tumores y agentes tïxicos o daïinos de algïn otro modo. En respuesta, han desarrollado mecanismos efectores que son capaces de montar una defensa contra dichos antïgenos. Estos mecanismos estïn mediados por molïculas solubles y/o por cïlulas.

En el contexto de estos, mecanismos efectores, la inflamaciïn es un proceso complejo de mïltiples caras en respuesta a una enfermedad o lesiïn que estï regulado por la liberaciïn de una serie de citocinas (Alexander et al, 2001, J Endotoxin Res 7:167 -202) . Estas citocinas se clasifican en tïrminos generales como citocinas pro o antiinflamatorias y el equilibrio crïtico entre la liberaciïn y la actividad de las citocinas con acciones opuestas regula la respuesta inflamatoria para impedir que se convierta en franco o se subestime.

Si la respuesta inflamatoria continïa sin comprobarse y es franca, el huïsped puede sufrir daïos tisulares asociados y, en los casos graves, esto puede presentarse como shock sïptico y se puede producir insuficiencia multiorgïnica (Ulevitch et al., 1999, Curr Opin Immunol 11:19 -22) . Por el contrario, una respuesta inflamatoria mala o subestimada puede significar infecciïn incontrolada, que tiene como resultado enfermedad crïnica y daïos en el huïsped. La regulaciïn de la respuesta inflamatoria es importante tanto a nivel sistïmico como a nivel local.

El descubrimiento de los procesos de inflamaciïn detallados ha revelado una estrecha relaciïn entre la inflamaciïn y la respuesta inmunitaria. Existen cinco indicadores bïsicos de inflamaciïn, siendo estos enrojecimiento (rubor) , inflamaciïn (tumor) , calor (calor) , dolor (dolor) y funciïn alterada (functio laesa) Estos indicadores aparecen por extravasaciïn de plasma e infiltraciïn de leucocitos en el sitio de la inflamaciïn. Consistente con estos indicadores,

las principales caracterïsticas de la respuesta inflamatoria son, por tanto:

(i) vasodilataciïn, ensanchamiento de los vasos sanguïneos para aumentar el flujo de sangre en el ïrea infectada;

(ii) aumento de la permeabilidad vascular, esto permite que los componentes difundibles entren en el sitio;

(iii) infiltraciïn celular, siendo esto el movimiento dirigido de las cïlulas inflamatorias a travïs de las paredes de los vasos sanguïneos en el sitio de la lesiïn;

(iv) cambios en los perfiles biosintïticos, metabïlicos y catabïlicos de muchos ïrganos; y

(v) activaciïn de las cïlulas del sistema inmunitario, asï como sistemas enzimïticos complejos de plasma sanguïneo.

La extensiïn a la cual estas caracterïsticas se producen generalmente es proporcional a la gravedad de la lesiïn y/o a la extensiïn de la infecciïn.

La respuesta inflamatoria puede clasificarse ampliamente en varias fases. El acontecimiento macroscïpico mïs temprano de una respuesta inflamatoria es la vasoconstricciïn temporal, es decir estrechamiento de loas vasos 65 sanguïneos causada por la contracciïn del mïsculo liso en las paredes de los casos, loo que se puede ver como un blanqueamiento de la piel. A esto le sigue varias fases que se producen en minutos, horas y dïas despuïs, del

siguiente modo:

(i) La respuesta vascular aguda sigue en segundos a una agresiïn tisular y dura unos minutos. Se caracteriza por vasodilataciïn e incremento de la permeabilidad capilar debido a las alteraciones en el endotelio vascular, lo que conduce a un incremento del flujo sanguïneo (hiperemia) que produce enrojecimiento (eritema) y la entrada de flujo en los tejidos (edema) .

(ii) Si se ha producido daïo suficiente en los tejidos o si se ha producido infecciïn, la respuesta celular aguda tiene lugar en las siguientes horas. La caracterïstica principal de esta fase es la apariciïn de granulocitos, en particular neutrïfilos, en el tejido. Estas cïlulas se unen primero a las cïlulas endoteliales dentro de los vasos sanguïneos (marginaciïn) y despuïs cruzan al tejido circundante (diapedesis) . Si el vaso estï daïado, el fibrinïgeno y la fibronectina se depositan en el lugar de la lesiïn, las plaquetas se agregan y se activan y se forman coïgulos.

(iii) Si el daïo es lo bastante grave, en los siguientes dïas se puede producir una respuesta celular crïnica. Una caracterïstica de esta fase de inflamaciïn es la apariciïn de un infiltrado de cïlulas mononucleares compuesto por macrïfagos y linfocitos. Los macrïfagos estïn implicados en la muerte de los microbios, en la limpieza de los residuos celulares y tisulares, y tambiïn se piensa que desempeïan un papel significativo en el remodelado tisular.

(iv) En las siguientes semanas se puede producir resoluciïn, en la que se restablece la arquitectura del tejido normal. Los coïgulos sanguïneos se eliminan mediante fibrinïlisis. Si no es posible devolver el tejido a su forma original se puede producir cicatrizaciïn por llenado con fibroblastos, colïgeno y nuevas cïlulas endoteliales. En general, para este momento cualquier infecciïn se habrï superado, aunque este no siempre es el caso y puede dar lugar a otras respuestas inmunolïgicas, tales como formaciïn de granulomas.

La inflamaciïn a menudo se considera en tïrminos de inflamaciïn aguda, que incluye todos los acontecimientos de la respuesta vascular aguda y celular aguda (1 y 2 anteriores) e inflamaciïn crïnica, que incluye los acontecimientos durante la respuesta celular crïnica y resoluciïn o cicatrizaciïn (3 y 4) .

No obstante, debe entenderse que ademïs de la apariciïn de respuesta inflamatorias de un modo localizado en el tejido que estï daïado, infectado o sometido a una respuesta autoinmunitaria, las respuestas inflamatorias tambiïn se pueden producir sistïmicamente, como en el caso de la sepsis.

De acuerdo con esto, a la luz del amplio impacto de las respuestas inflamatorias, existe una necesidad constante de aclarar los mecanismos complejos por los cuales funcionan. Identificando estos mecanismos, de este modo se proporciona un alcance para desarrollar medios de modulaciïn adecuada de respuestas inflamatorias.

Inhibina, activina y folistatina son tres familias de polipïptidos aislados inicialmente y caracterizados de fluido ovïrico folicular basïndose en su modulaciïn de la liberaciïn de la hormona estimulante del folïculo de cultivos de cïlulas hipofisarias. Ademïs de sus efectos sobre la sïntesis y secreciïn de la hormona estimulante del folïculo, la inhibina y la activita tienen otras funciones biolïgicas. Por el contrario, el significado fisiolïgico de la folistatina era oscuro, hasta que se descubriï que la folistatina es una proteïna de uniïn a la activina.

Las activinas, compuestas por dos subunidades β, βA, βB, βC y/o βE son miembros de la superfamilia del factor transformante del crecimiento (TGF) -β [Vale et al., 1990, Handbook of Experimental Physiology, Vol. 95, Eds. Sporn & Roberts, Springer-Verlag, Berlïn pïg. 211 -248]. Las formas de proteïna multimïrica de la activita incluyen las formas homodimïricas (Activina A -βAβA, Activina B -βBβB, Activina C -βCβC, y Activina E --βEβE) y las formas heterodimïricas (por ejemplo, Activina AB --βAβB,... [Seguir leyendo]

1. Folistatina para uso en un mïtodo de regulaciïn negativa de una respuesta inflamatoria en un mamïfero, en donde la respuesta inflamatoria se produce en el contexto de trasplante de pulmïn, sïndrome de dficultad 5 respiratoria aguda grave o asma.

2. Folistatina para uso en un mïtodo de tratamiento de una afecciïn caracterizado por una respuesta inflamatoria aberrante, no deseada o, de otro modo, inapropiada en un mamïfero, en donde la respuesta inflamatoria se produce en el contexto de trasplante de pulmïn, sïndrome de dificultad respiratoria aguda grave o asma.

3. Folistatina para uso en un mïtodo de regulaciïn negativa de una respuesta inflamatoria en un mamïfero mediante la regulaciïn negativa de la actividad funcional de la activina A y / o de la activina B en dicho mamïfero, en donde la respuesta inflamatoria se produce en el contexto inflamaciïn aberrante, no deseada o, de otra manera, inadecuada, aguda de las vïas respiratorias.

4. Folistatina para su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde la respuesta inflamatoria es una respuesta a una cascada proinflamatoria, en donde dicha cascada de citocinas proinflamatorias se caracteriza por la expresiσn de TNF-α, IL-1 y / o IL-6 y en donde la respuesta inflamatoria se regula por disminuciïn a travïs de la regulaciïn negativa de la actividad funcional de la activina A y / o de la activina B en dicho mamïfero hasta un nivel funcionalmente ineficaz para inhibir o retardar la cascada proinflamatoria.

5. La folistatina para uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde la folistatina es la isoforma 288 de folistatina o la isoforma 315 de folistatina.

6. La folistatina para uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde el la respuesta inflamatoria es aguda.

7. La folistatina para uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, en donde el mamïfero es un ser humano. 30