Uso de ureasa para inhibir el crecimiento de células cancerosas.

Una composición farmacéutica para uso en el tratamiento del cáncer,

que comprendeuna enzima ureasa;

un componente de direccionamiento conjugado con dicha ureasa, en donde dicho componente dedireccionamiento es un anticuerpo anti-antígeno tumoral o un fragmento del mismo, componente dedireccionamiento que es eficaz en cuanto a potenciar el suministro de la enzima a las células de un tumor sólido,cuando la composición se administra a un sujeto; y

un vehículo farmacéutico.

Uso de ureasa para inhibir el crecimiento de células cancerosas La presente invención se refiere a composiciones farmacéuticas para tratar el cáncer empleando una enzima ureasa y un anticuerpo anti-antígeno tumoral.

El cáncer representa la quinta parte de la mortalidad total en los Estados Unidos y es la segunda causa principal de muerte. El cáncer se caracteriza típicamente por la división incontrolada de una población de células. Esta división incontrolada puede afectar a células sanguíneas, tal como en diversos tipos de linfomas, o a células que se agregan en, o son nativas de, un tejido u órgano particular, por ejemplo, en tumores sólidos, tales como tumores secundarios o primarios de la mama, el hígado, el esófago, el estómago, los intestinos, el cerebro, el hueso o la próstata.

Se han propuesto una diversidad de modalidades de tratamiento para la terapia del cáncer. Éstas incluyen, en general, la resección quirúrgica de tumores sólidos, el tratamiento con radiación, tal como con rayos X, la quimioterapia, la terapia inmune y la terapia génica. El (los) tipo (s) de terapia que se selecciona (n) para un cáncer dado dependerá (n) de factores tales como la edad del paciente, el grado de localización del cáncer, y el tipo y la fase del cáncer. La terapia implica a menudo una combinación de dos o más modalidades, tal como una terapia con rayos X en combinación con quimioterapia, o con inmunoterapia en combinación con quimioterapia.

Para tratar los cánceres se ha empleado un gran número de compuestos y composiciones y estrategias quimioterapéuticos. Se diseñan muchos compuestos antineoplásicos para alterar la replicación en células que se dividen rápidamente, o para inhibir un vínculo metabólico esencial en células que proliferan activamente. Aunque tales planteamientos han conducido a niveles de éxito en ciertos tipos de cánceres, o en cánceres en ciertas fases, la quimioterapia se asocia generalmente con efectos secundarios que van de desagradables a debilitantes, tales como malestar, náuseas, pérdida de apetito, alopecia y anemia. Además, los compuestos que actúan a nivel de la replicación celular, sea al introducir compuestos nucleotídicos análogos en células que se dividen o sea al alterar la replicación normal, presentan la posibilidad de introducir mutaciones genéticas generalizadas en células normales del sujeto. Además, las células cancerosas pueden desarrollar resistencia a muchos tipos de agentes antitumorales, sea limitando la incorporación del agente a las células o sea alterando el metabolismo del agente dentro de las células.

El Documento WO-A-95/22987 se refiere al uso del antígeno de ureasa de H. pylori para cambiar los niveles de pH en el tracto gastrointestinal, para el tratamiento y la erradicación de la enfermedad gastroduodenal asociada con una infección por Helicobacter en mamíferos.

En el Documento US 6.248.330 se describe una composición inmunogénica para inducir anticuerpos protectores frente a una infección por Helicobacter usando los polipéptidos de ureasa de H. felis, de modo que la composición comprende (i) al menos una subunidad de un polipéptido estructural de ureasa de H. pylori y/o al menos una subunidad de un polipéptido estructural de ureasa de H. felis, (ii) y/o una proteína de choque térmico o chaperonina de Helicobacter.

En el Documento US 6.126.938 se describen una composición y un método para inducir una respuesta inmune contra un antígeno de un patógeno del tracto respiratorio, gastrointestinal o genitourinario en un sitio efector mucoso de un mamífero, que comprende ureasa encerrada en liposomas.

A. Zimber et al., Proceedings of the Society for Exp. Biology and Medicine, volumen 139, nº 1, 1972, páginas 143149, describen estudios sobre el efecto de una inyección intraperitoneal (IP) de ureasa en ratones a los que se ha inyectado subcutáneamente líquido ascítico que contiene células de tumor ascítico de Ehrlich (EAT; del inglés, Earlich ascites tumor) .

En respuesta a estas limitaciones, se han desarrollado intentos para modificar los agentes quimioterapéuticos con objeto de reducir sus efectos secundarios, solventar los problemas de resistencia o mejorar su direccionamiento a sitios tumorales seleccionados. Aunque estos esfuerzos han producido resultados terapéuticos mejorados en ciertos casos, sigue siendo una necesidad el proporcionar un agente y un método quimioterapéuticos mejorados. En particular, dicho agente debería ser eficaz en cuanto a matar células cancerosas o inhibir su crecimiento, debería ser relativamente atóxico en términos de efectos secundarios y efectos a largo plazo sobre la integridad genética del sujeto tratado, y preferiblemente debería ser suministrable en una forma que permitiera la introducción directa en un tumor o el direccionamiento selectivo a tumores.

La invención proporciona una composición farmacéutica para uso en la inhibición del crecimiento de células cancerosas en un sujeto mamífero, como se define en las reivindicaciones. La composición incluye una enzima ureasa, tal como una ureasa bacteriana o vegetal, y un componente de direccionamiento asociado con la ureasa para potenciar el suministro de la enzima a las células cancerosas, cuando la composición se administra al sujeto.

Se proporciona una composición farmacéutica para uso en el tratamiento del cáncer, que comprende una enzima ureasa; un componente de direccionamiento conjugado con dicha ureasa, en donde dicho componente de direccionamiento es un anticuerpo anti-antígeno tumoral o un fragmento del mismo, componente de direccionamiento que es eficaz para potenciar el suministro de la enzima a las células de un tumor sólido, cuando la composición se administra a un sujeto; y

un vehículo farmacéutico.

El componente de direccionamiento fijado a la ureasa es un anticuerpo anti-antígeno tumoral o un fragmento del mismo. Cuando el componente de direccionamiento es un polipéptido, la composición puede ser una proteína de fusión del componente de direccionamiento y la enzima ureasa.

En otro aspecto, la invención incluye el uso de ureasa para inhibir el crecimiento de células cancerosas en un sujeto mamífero. El método incluye exponer las células a ureasa en una cantidad eficaz para inhibir el crecimiento de las células cancerosas.

Cuando las células cancerosas comprenden un tumor sólido, la ureasa puede ser inyectada directamente en el tumor del sujeto o puede ser administrada parenteralmente salvo por administración directa, por ejemplo, por inyección. Además de ureasa en un vehículo farmacéuticamente aceptable, las diferentes composiciones que contienen ureasa anteriormente indicadas son adecuadas para uso en la invención.

La ureasa se puede administrar en dos fases: una primera fase que implica un producto de conjugación de un componente de direccionamiento tumoral y un primer componente ligante que tiene la capacidad para interaccionar con un segundo componente ligante; y una segunda fase con un segundo producto de conjugación que comprende el segundo componente ligante conjugado con ureasa.

Se describe además una composición para terapia génica, compuesta de un vector de direccionamiento eficaz, cuando se administra al sujeto, en cuanto a transfectar selectivamente células cancerosas, y, transportada en dicho vector, una secuencia de ácido nucleico recombinante eficaz en cuanto a producir una mRNA de ureasa en células cancerosas transfectadas. Un vector ejemplar es un adenovirus. Una secuencia de ácido nucleico ejemplar codifica ureasa y una secuencia líder secretora eficaz en cuanto a promover la secreción de la ureasa desde las células cancerosas transfectadas.

En un aspecto relacionado, se describe un método para potenciar la eficacia terapéutica de un compuesto antitumoral débilmente básico cuya eficacia está reducida por un gradiente de pH intracelular mayor/extracelular menor en un tumor sólido, en un sujeto que recibe el agente para tratamiento tumoral. Se administra por ello al sujeto una cantidad de ureasa eficaz en cuanto a reducir o invertir el gradiente de pH intracelular mayor/extracelular

menor en un tumor sólido. La cantidad de ureasa administrada es eficaz para elevar el pH del fluido extracelular del tumor a un valor de al menos 7, 2. La ureasa se puede inyectar directamente en el tumor o, como antes, se puede administrar parenteralmente salvo por administración directa.

El compuesto antitumoral puede ser, por ejemplo, doxorrubicina, daunorrubicina, mitoxantrona, epirrubicina, mitomicina, bleomicina, alcaloides de Vinca, tales como vinblastina y vincristina, agentes alquilantes, tales como ciclofosfamida e hidrocloruro de mecloretamina, y derivados... [Seguir leyendo]

1. Una composición farmacéutica para uso en el tratamiento del cáncer, que comprende una enzima ureasa;

un componente de direccionamiento conjugado con dicha ureasa, en donde dicho componente de direccionamiento es un anticuerpo anti-antígeno tumoral o un fragmento del mismo, componente de direccionamiento que es eficaz en cuanto a potenciar el suministro de la enzima a las células de un tumor sólido, cuando la composición se administra a un sujeto; y

un vehículo farmacéutico.

2. La composición para uso según la reivindicación 1, que comprende una proteína de fusión del componente de 10 direccionamiento y la enzima ureasa.

3. La composición para uso según la reivindicación 1, en donde dicho producto de conjugación comprende además un conector que conjuga dicha enzima ureasa con dicho componente de direccionamiento.

4. La composición para uso según la reivindicación 1, en donde dicha ureasa es una ureasa vegetal o bacteriana.