Composiciones inmunomoduladoras y métodos para su uso.

Una composición que comprende -1-6-glucano, opcionalmente enriquecido en grupos O-acetilados,

conjugado con una partícula o un soporte sólido, o con un resto de transporte dirigido.

Composiciones inmunomoduladoras y métodos para su uso.

Declaración sobre el interés del gobierno Esta invención se realizó total o parcialmente con apoyo del gobierno, mediante la subvención nº GM035010-22 concedida a the National Institutes of Health. El gobierno puede tener ciertos derechos en la invención.

Antecedentes de la invención Las paredes celulares de los hongos evocan una poderosa respuesta inmunoestimuladora, y se ha propuesto su uso como fármaco antiinfeccioso y antitumoral potencial. Las células fúngicas también pueden activar a las células dendríticas y cebar las respuestas de células T específicas de antígeno restringidas de clase II. La mayor parte de la pared celular (50-60%) de hongos patógenos ( Candida albicans ) y no patógenos (Saccharomyces cerevisiae) está compuesta por una capa interna de -glucano ( -1, 3- y -1, 6-glucano) unida covalentemente a una diversidad de manoproteínas de la superficie celular (Klis, F.M. et al., Med. Mycol., 39, supl. 1, 1-8, 2001; Klis, F.M. et al., FEMS Microbiol. Rev., 26, 239-256, 2002) .

El reconocimiento de los -glucanos por macrófagos se realiza principalmente a través de dectina-1 con la cooperación de TLR, incluyendo TLR2 (Brown, G.D. et al., Nature, 413, 36-37, 2001) . La actividad dectina-1 es inhibida por -1, 3-glucanos y -1, 6-glucanos, teniendo el mayor efecto las laminarinas de -1, 3-glucano. Sin embargo, los resultados de micromatrices de oligosacáridos demuestran que la dectina-1 se une de modo específico a -1, 3-glucanos. Los neutrófilos son asesinos profesionales, cuyo papel en la fagocitosis y la destrucción de bacterias y hongos está bien caracterizado. Los individuos neutropénicos son mucho más susceptibles a infecciones bacterianas y fúngicas, y el retorno a unos recuentos normales desempeña un papel importante en la resolución de la infección. Los neutrófilos, a diferencia de los macrófagos, requieren del suero para una fagocitosis y destrucción óptimas. Los principales receptores opsónicos son el receptor del complemento CR3 y el receptor de unión a inmunoglobulinas Fc R. El CR3 tiene un dominio de lectina (Brown, G.D. et al. , Immunity, 19, 311-315, 2003) que media en la mayor movilidad de los neutrófilos hacia una mezcla de -1, 3-y -1, 6-glucano (PGG-glucano) (Wakshull, E. et al., Immunopharmacology, 41, 89-107, 1999) . Aunque los neutrófilos expresan la dectina-1 (Taylor,

P.R. et al., J. Immunol., 169, 3876-3882, 2002, ) su papel en el reconocimiento fúngico aún no está claro.

Sumario de la invención Esta invención proporciona, en una realización, una composición que comprende -1-6-glucano opcionalmente enriquecido en grupos O-acetilados, conjugado con una partícula o un soporte sólido, o con un resto de transporte dirigido. En una realización, el glucano contiene al menos 25% en peso de glucano O-acetilado. En una realización, el glucano se aisla o se deriva de un liquen que, en una realización, pertenece al género Umbilicariaceae. En una realización, el glucano se aisla de un hongo. En una realización, el glucano se aisla de una levadura, o en otra realización el glucano se acetila o se sintétiza de modo químico. En otra realización, el glucano se conjuga con una partícula.

En otra realización, la composición comprende un adyuvante, un antígeno, un compuesto inmunomodulador, o sus combinaciones.

En otra realización, esta invención proporciona un método para modular una respuesta inmunológica en un sujeto, comprendiendo dicho método administrar a dicho sujeto una composición que comprende -1-6-glucano enriquecido en grupos O-acetilados. Según este aspecto de la invención, y en una realización, la modulación de la respuesta inmunológica comprende estimular dicha respuesta inmunológica que, en una realización, es una respuesta específica de antígeno. En una realización, la composición comprende también un compuesto inmunoestimulador, o en otra realización, un compuesto quimioterapéutico. En otra realización, la respuesta inmunológica se dirige contra un agente infeccioso, un cáncer u otro tipo de tumor, una lesión preneoplásica, o sus combinaciones. En otra realización, la respuesta inmunológica no se dirige contra un cáncer u otro tipo de tumor.

En otra realización, la modulación de la respuesta inmunológica comprende inframodular o abrogar la respuesta inmunológica. Según este aspecto, y en una realización, la composición comprende además un inmunosupresor. En una realización, la respuesta inmunológica se dirige contra un autoantígeno, o en otra realización, un alergeno, o en otra realización, la respuesta inmunológica se dirige contra tejido transplantado, o en otra realización, células transplantadas. En una realización, la composición se administra a un sujeto que padece un trastorno autoinmunológico. En una realización, el trastorno autoinmunológico está asociado con una excesiva actividad de los neutrófilos, infiltración de neutrófilos, desgranulación de neutrófilos, etc. En una realización, el trastorno es un trastorno que afecta a la piel; la composición puede aplicarse directamente a la piel.

En otra realización, esta invención proporciona una composición que comprende -1-6-glucano, en la que el glucano está conjugado con una partícula. Según este aspecto, y en una realización, el glucano está enriquecido en grupos O-acetilados, y en una realización, contiene al menos 25% en peso de glucano O-acetilado. En otra realización, el glucano se aisla o se deriva de un liquen o de una levadura. En una realización, el glucano se aisla o se deriva de Umbilicariaceae. En otra realización, el glucano se acetila o se sintetiza de modo químico. En una realización, el glucano se conjuga con una microesfera que, en una realización, tiene un diámetro de aproximadamente 0, 1-15 micrómetros.

En otra realización, la composición comprende un adyuvante, un antígeno, un compuesto inmunomodulador, o sus combinaciones. En otra realización, esta invención proporciona un método para modular una respuesta inmunológica en un sujeto, comprendiendo dicho método administrar al sujeto una composición que comprende -1-6-glucano, en el que el glucano está conjugado con un soporte sólido, tal como una partícula. En otra realización, la invención proporciona una partícula que comprende -1-6-glucano. En ciertas realizaciones, la partícula consiste en al menos 10%, 20%, 30%, 40%, 50%, 60%, 70%, 80%, 90%, 95%, 96%, 97%, 98% o 99% de -1-6-glucano en peso seco. En ciertas realizaciones, la partícula consiste fundamentalmente en -1-6-glucano. Opcionalmente, en ciertas realizaciones, el -1-6-glucano está enriquecido en grupos O-acetilados. La invención proporciona además un método para modular la respuesta inmunológica de un sujeto mamífero, que comprende administrar cualquiera de las partículas mencionadas anteriormente, o una composición que contiene cualquiera de las partículas mencionadas anteriormente, al sujeto.

En una realización, la modulación de la respuesta inmunológica comprende estimular la respuesta inmunológica, que en una realización es una respuesta específica de antígeno. Según este aspecto de la invención y en una realización, la composición comprende además un compuesto inmunoestimulador, o en otra realización, un compuesto quimioterapéutico. En una realización, la respuesta inmunológica se dirige contra un agente infeccioso, un cáncer u otro tipo de tumor, una lesión preneoplásica o sus combinaciones.

En otra realización, la modulación de la respuesta inmunológica comprende inframodular o abrogar la respuesta inmunológica. Según este aspecto de la invención, y en una realización, la composición comprende además un inmunosupresor. En una realización, la respuesta inmunológica se dirige contra un autoantígeno, o en otra realización, un alergeno, o en otra realización, tejido transplantado, o en otra realización, células transplantadas. En una realización, la composición se administra a un sujeto que padece un trastorno autoinmunológico. En una realización, el trastorno autoinmunológico está asociado con una excesiva actividad de los neutrófilos, infiltración de neutrófilos, desgranulación de neutrófilos, etc. En una realización, el trastorno es un trastorno que afecta a la piel; la composición puede aplicarse directamente a la piel.

En otra realización, esta invención proporciona un método para tratar, retrasar el avance, prolongar la remisión, o reducir la incidencia o la gravedad de un cáncer en un sujeto, comprendiendo dicho método administrar a dicho sujeto una composición que comprende -1-6-glucano purificado. En otra realización, esta invención proporciona un método para tratar, retrasar el avance, prolongar... [Seguir leyendo]

1. Una composición que comprende -1-6-glucano, opcionalmente enriquecido en grupos O-acetilados, conjugado con una partícula o un soporte sólido, o con un resto de transporte dirigido.

2. La composición de la reivindicación 1 conjugada con una partícula o un soporte sólido y con un resto de transporte dirigido.

3. La composición de la reivindicación 1 o la reivindicación 2, en la que el -1-6-glucano está enriquecido en grupos O-acetilados.

4. La composición de la reivindicación 1 o la reivindicación 2,

(a) en la que dicho glucano contiene al menos 25% en peso de glucano O-acetilado;

(b) en la que dicho glucano se aisla o se deriva de un líquen, un hongo, una levadura, o Umbilicariaceae;

(c) en la que dicho glucano está genéticamente modificado, o se sintetiza o se acetila de modo químico;

(d) que comprende además un adyuvante, un antígeno, un compuesto inmunomodulador, o sus combinaciones.

5. Las composiciones de una cualquiera de las reivindicaciones 1-3, para su uso para modular una respuesta inmunológica. 6. La composición de la reivindicación 5, en la que:

(a) la modulación de dicha respueseta inmunológica comprende estimular dicha respuesta inmunológica;

(b) dicha respuesta inmunológica es una respuesta específica de antígeno;

(c) dicha composición comprende además un compuesto quimioterapéutico o un compuesto inmunoestimulador;

(d) dicha respuesta inmunológica depende del complemento;

(e) dicha respuesta inmunológica se dirige contra un agente infecciosos, un cáncer, una lesión preneoplásica, o sus combinaciones;

(f) la modulación de dicha respuesta inmunológica comprende inframodular o abrogar dicha respuesta inmunológica;

(g) dicha respuesta inmunológica se dirige contra un autoantígeno, un alergeno, tejido transplantado, o células transplantadas;

(h) dicha respuesta inmunológica es la enfermedad del hospedante frente al injerto, o la enfermedad del injerto frente al hospedante;

(i) dicha respuesta inmunológica es una respuesta autoinmunológica.

7. La composición de la reivindicación 6, en la que:

(a) dicho agente infeccioso provoca sepsis;

(b) dicho agente infeccioso es un parásito, un helminto, un virus o una bacteria;

(c) dicha composición comprende además un inmunosupresor; o

(d) dicha respuesta inmunológica se dirige contra un autoantígeno o un alergeno, tejido o células transplantados.

8. La composición de la reivindicación 1,

(a) que comprende además un adyuvante, un antígeno, un compuesto inmunomodulador, o sus combinaciones;

(b) en la que dicha partícula es una microesfera o una nanopartícula;

(c) en la que la partícula comprende al menos 50% de -1-6-glucano en peso;

(d) en la que la partícula comprende glucano, y en la que al menos 50% del glucano es -1-6-glucano;

(e) en la que el -1-6-glucano se distribuye de modo homogéneo en la partícula; o

(f) en la que la partícula tiene un tamaño apropiado para la fagocitosis por neutrófilos, monocitos, macrófagos, o

células dendríticas.

9. La composición de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, para su uso para tratar, retrasar el avance, prolongar la remisión, o reducir la incidencia o la gravedad del cáncer o de una infección en un sujeto.

10. La composición de la reivindicación 9,

(a) que comprende además un adyuvante, un antígeno, un péptido, un compuesto inmunoestimulador, un compuesto quimioterapéutico, o sus combinaciones;

(b) en la que dicho sujeto tiene una lesión hiperplásica o preneoplásica; o

(c) en la que dicho resto de transporte dirigido interacciona de modo específico con un antígeno asociado a un tumor o una célula neoplásica.

11. La composición de la reivindicación 10, en la que:

(a) dicho antígeno o péptido es un antígeno asociado a un tumor o se deriva de la fuente de infección; o

(b) dicho compuesto inmunoestimulador es una citoquina; o

(c) en la que dicho compuesto quimioterapéutico es un antibiótico o un compuesto antivírico.

12. Un método in vitro para estimular o potenciar la expresión de proteínas de choque térmico en una célula, comprendiendo dicho método poner en contacto dicha célula con la composición de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3.

13. El método de la reivindicación 12,

(a) en el que dicho glucano está unido a una partícula;

(b) en el que dicha célula es una célula presentadora de antígenos;

(c) en el que dicha célula es un neutrófilo; o

(d) en el que dicha célula está infectada.

14. La composición de una cualquiera de las reivindicacione 1 a 3, en la que la composición es una composición farmacéutica, un alimento o un producto alimentario, un suplemento alimentario, o una composición cosmética.

15. La composición de la reivindicación 14, en la que la composición comprende -1-6-glucano que ha sido procesado para aumentar su capacidad para modular la respuesta inmunológica con relación al -1-6-glucano sin procesar, o en la que al menos 50% del glucano contenido en la composición es -1-6-glucano.

16. Una micela que comprende la composición de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3.

17. Una composición que comprende la composición de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3 en un polímero biodegradable, en la que dicho polímero biodegradable se degrada para formar restos alfa-hidroxiácido o salicilato biológicamente activos.

18. Una partícula o un dispositivo médico que comprende la composición de la reivindicación 17.

19. Un dispositivo médico o un implante en el que al menos una porción de la superficie del implante o del dispositivo comprende o está revestida con la composición de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3.

20. El dispositivo médico de la reivindicación 19, en el que el dispositivo se selecciona del grupo que consiste en un catéter, un implante de estenosis, una válvula, un marcapasos, una línea central, un pesario, un tubo, un implante de derivación, un tubo de alimentación, un drenaje, y aparatos ortopédicos; o en el que la composición comprende un polímero biodegradable.

21. Un material revestido, que comprende:

(a) un sustrato; y

(b) una composición de una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3, físicamente asociada con al menos una porción de una superficie de dicho sustrato, en el que dicha composición está opcionalmente en forma de un gel o una película.

22. El material revestido de la reivindicación 21, en el que,

(a) la composición comprende un polímero;

(b) la composición comprende un polímero biodegradable; o

(c) el sustrato está compuesto al menos en parte de metal, material cerámico, o polímero.

23. La composición de la reivindicación 1 o la reivindicación 2, en la que dicho resto de transporte dirigido es un anticuerpo, un fragmento de anticuerpo, un péptido, un aptámero, o una molécula pequeña.

24. La composición de la reivindicación 23, en la que dicho resto de transporte dirigido se une a un antígeno tumoral, una célula infectada, una célula neoplásica, una célula preneoplásica, o un patógeno, o a uno de sus componentes.

25. La composición de la reivindicación 23, en la que:

(a) dicho anticuerpo es un anticuerpo monoclonal o un anticuerpo humano;

(b) dicho fragmento de anticuerpo es un fragmento Fab, un fragmento Fab’, un fragmento (Fab’) 2, un fragmento Fv, un anticuerpo monocatenario, o un péptido que codifica una única región determinante de la complementariedad.

26. La composición de la reivindicación 23, en la que dicho anticuerpo es un anticuerpo humanizado.

27. La composición de la reivindicación 23, en la que dicho resto de transporte dirigido es alemtuzumab, bevacizumab, cetuximab, gemtuzumab, ibritumomab, panitumumab, rituximab, tositumomab, trastuzumab, o palivizumab.

28. La composición de la reivindicación 1 o la reivindicación 2, en la que dicho resto de transporte dirigido se dirige a una célula neoplásica o preneoplásica, para su uso para estimular las respuestas anticáncer del hospedante, estimular la lisis de células tumorales, o potenciar las respuestas antitumorales del hospedante.

29. La composición de la reivindicación 1 o la reivindicación 2, para su uso en el tratamiento de tumores que son resistentes a la lisis mediada por el complemento.

30. La composición de la reivindicación 1 o la reivindicación 2, en la que dicho resto de transporte dirigido se dirige a un antígeno expresado específicamente sobre células cancerosas y, con ello, potencia la lisis mediada por el complemento de las células.

31. La composición de una cualquiera de las reivindicacione.

2. 30, en la que dicho resto de transporte dirigido es un anticuerpo, un fragmento de anticuerpos, un péptido, un aptámero, o una molécula pequeña.

32. La composición de la reivindicación 6:

(a) para su uso en el tratamiento de una enfermedad autoinmunológica seleccionada del grupo que consiste en artritis reumatoide, esclerosis múltiple, diabetes mellitus, miastenia gravis, anemia perniciosa, enfermedad de Addison, lupus eritematoso, síndrome de Reiter, dermatitis atópica, psoriasis, y enfermedad de Graves; o

(b) para su uso en el tratamiento de un trastorno autoinmunológico que afecta a la piel.