REACTIVO DE LATEX PARA ANÁLISIS DE ADIPONECTINA Y PROCEDIMIENTO DE ANÁLISIS DE ADIPONECTINA.

Un reactivo de látex para analizar la adiponectina que comprende una suspensión de partículas de látex que lleva un anticuerpo policlonal anti-adiponectina que se une específicamente a adiponectina,

en el que el reactivo de látex se selecciona de: (i) un sistema de componentes de un reactivo en el que un tampón y las partículas de látex están contenidos en un reactivo; y (ii) un kit compuesto de dos reactivos en el que el primer reactivo contiene un tampón y el segundo reactivo contiene las partículas de látex

Tipo: Patente Internacional (Tratado de Cooperación de Patentes). Resumen de patente/invención. Número de Solicitud: PCT/JP2004/004083.

Solicitante: Mitsubishi Chemical Medience Corporation
OTSUKA PHARMACEUTICAL CO., LTD
.

Nacionalidad solicitante: Japón.

Dirección: 2-8, Shibaura 4-chome Minato-ku Tokyo 108-8559 JAPON.

Inventor/es: AKAMATSU,SUGURU, SAWAI,TOKIO, TACHIKAWA,Tetsuya, NISHIMURA,Ayako.

Fecha de Publicación: .

Fecha Solicitud PCT: 24 de Marzo de 2004.

Clasificación PCT:

  • G01N33/53 SECCION G — FISICA.G01 METROLOGIA; ENSAYOS.G01N INVESTIGACION O ANALISIS DE MATERIALES POR DETERMINACION DE SUS PROPIEDADES QUIMICAS O FISICAS (procedimientos de medida, de investigación o de análisis diferentes de los ensayos inmunológicos, en los que intervienen enzimas o microorganismos C12M, C12Q). › G01N 33/00 Investigación o análisis de materiales por métodos específicos no cubiertos por los grupos G01N 1/00 - G01N 31/00. › Ensayos inmunológicos; Ensayos en los que interviene la formación de uniones bioespecíficas; Materiales a este efecto.
  • G01N33/543 G01N 33/00 […] › con un soporte insoluble para la inmovilización de compuestos inmunoquímicos.

Clasificación antigua:

  • G01N33/53 G01N 33/00 […] › Ensayos inmunológicos; Ensayos en los que interviene la formación de uniones bioespecíficas; Materiales a este efecto.
  • G01N33/543 G01N 33/00 […] › con un soporte insoluble para la inmovilización de compuestos inmunoquímicos.

Países PCT: Austria, Bélgica, Suiza, Alemania, Dinamarca, España, Francia, Reino Unido, Grecia, Italia, Liechtensein, Luxemburgo, Países Bajos, Suecia, Mónaco, Portugal, Irlanda, Eslovenia, Finlandia, Rumania, Chipre, Lituania, Letonia, Ex República Yugoslava de Macedonia, Albania.

PDF original: ES-2375188_T3.pdf

 


Fragmento de la descripción:

Reactivo de látex para análisis de adiponectina y procedimiento de análisis de adiponectina Campo técnico La presente invención se refiere a un reactivo de látex para análisis de adiponectina y a un procedimiento de análisis de adiponectina. El término "análisis" o "analizar" como se usa en el presente documento, incluye una medida para determinar cuantitativa o semicuantitativamente una cantidad de una sustancia que se va a analizar, y una detección para juzgar la presencia o ausencia de una sustancia que se va a analizar. Técnica anterior E04723044 09-01-2012 La adiponectina es una proteína secretora compuesta de 244 aminoácidos, que se identificó en 1996 por Matsuzawa (Departamento de medicina interna y ciencia molecular, Universidad de Osaka; Hospital Sumitomo en la actualidad) et al. como producto génico de un gen apM1 (tránscrito del gen más abundante adiposo) expresado específicamente en tejidos adiposos (referencias distintas de patente 1 y 2). La adiponectina se encuentra en una concentración alta (aproximadamente de 1 µg/ml a varias decenas de µg/ml) en sangre humana normal. Aunque la adiponectina se secreta específicamente a partir de los adipocitos, las personas obesas muestran una concentración significativamente baja de los mismos en la sangre, y la adiponectina se reduce en pacientes que padecen enfermedades coronarias o diabetes de tipo II, en particular macroangiopatía diabética. La adiponectina se puede considerar como una molécula implicada en la resistencia a la insulina y en arteriosclerosis. Para evitar enfermedades coronarias, es importante medir la adiponectina de forma rápida y con exactitud. Como procedimiento para medir la adiponectina, se conoce un procedimiento de medición inmunológico que usa un anticuerpo específico para una sustancia que se va a analizar (referencia distinta de patente 3). En el procedimiento de medición inmunológico, se utiliza un radioinmunoensayo o un inmunoensayo de enzima, en el que se usa una sustancia radioactiva o una enzima como marca, para medir un inmunocomplejo formado por una reacción antígeno-anticuerpo (referencias distintas de patente 4-7 y referencias de patente 1 y 2). En el radioinmunoensayo, las instalaciones para la medida son limitadas, ya que se usa una sustancia radioactiva. Además, en general es necesario diluir una muestra hasta 1/500, y se tarda de 20 a 24 horas en llevar a cabo la medida. En el inmunoensayo de enzima, en general es necesario pretratar una muestra con dodecil sulfato de sodio (SDS) y prediluir una muestra hasta aproximadamente 1/5000, y se tarde 2 horas o más en llevar a cabo la medida. Como antes, las medidas de adiponectina convencionales necesitan instalaciones especiales, procedimientos complicados, y un tiempo de medición largo. Cuando se usa sangre, lo que refleja fielmente una patología, como muestra en lo anterior, se necesitan procedimientos convencionales, procedimientos complicados y un tiempo de medición largo, y por tanto, los procedimientos no son adecuados para un ensayo de propósito general o un ensayo multimuestras. Se desea desarrollar un reactivo de medición para un análisis automático en el que se pueda realizar el análisis de forma rápida y conveniente, y las instalaciones para ello no estén limitadas. Más en particular, la referencia de patente 1 da a conocer un procedimiento de ELISA para analizar la adiponectina, en el que se usan un anticuerpo policlonal y un anticuerpo monoclonal preparado usando como inmunógeno adiponectina expresada en un Escherichia coli por técnicas de recombinación genética. La referencia de patente 1 dio a conocer que cuando se usó el procedimiento de ELISA para medir una concentración de adiponectina contenida en plasma humano normal, sin un pretratamiento de la muestra de plasma, el valor medido fue menor que el previsto previamente a partir de un resultado obtenido por transferencia de Western. Como motivo de esto, la referencia de patente 1 da a conocer una posibilidad de que se pueda enmascarar un sitio que se va a reconocer por el anticuerpo, ya que la adiponectina en sangre se ensambla con otros componentes del plasma para formar una macromolécula de 290 kDa o más. En el procedimiento de ELISA dado a conocer en la referencia de patente 1, se puede medir la adiponectina en plasma diluyendo el plasma hasta 1/10 con un tampón que contiene SDS, hirviendo el plasma diluido durante 5 minutos, diluyendo el plasma hervido hasta aproximadamente 1/5000 como la concentración final, y el midiendo el plasma diluido a 1/5000. Esto es, el procedimiento de ELISA dado a conocer en la referencia de patente 1 necesita el pretratamiento (el tratamiento con calor en presencia de SDS) y la predilución de una muestra. Como procedimiento de ELISA para analizar la adiponectina que no necesita un pretratamiento de este tipo, la referencia de patente da a conocer un procedimiento de ELISA en el que se usa uno o más anticuerpos monoclonales que reaccionan específicamente con una adiponectina de origen natural en sangre (en particular, un anticuerpo monoclonal que reacciona específicamente con una estructura trimérica de adiponectina y/o una adiponectina de origen natural que tiene una estructura en la que los trímeros están ensamblados adicionalmente). De acuerdo con la divulgación en la referencia de patente 2, se sabe que la adiponectina en sangre forma una estructura en la que están ensamblados 4 ó 6 trímeros compuestos de 3 monómeros (referencia distinta de patente 8), y no es necesario el pretratamiento de una muestra en el procedimiento de ELISA dado a conocer en la referencia de patente 2, ya que se usan uno o más anticuerpos monoclonales específicos para una adiponectina de origen natural. Sin embargo, la predilución de una muestra es una etapa esencial en el procedimiento de ELISA dado a conocer en la referencia de patente 2. Como ensayo, la referencia de patente 2 ejemplifica, por ejemplo, un procedimiento de fase sólida, un 2   procedimiento competitivo, un procedimiento de aglutinación, un procedimiento turbidimétrico y un inmunoensayo de enzima tipo sándwich, y da a conocer que ELISA es lo más preferible. Los ejemplos descritos en la referencia de patente 2 no incluyen realizaciones aparte de ELISA. La referencia de patente 3 se refiere a una proteína similar a adiponectina que tiene efectos terapéuticos y/o preventivos sobre arteriosclerosis. La referencia de patente 4 se refiere a una composición inhibidora de crecimiento de músculo liso y una composición para inhibir la expresión de moléculas de adhesión en células del endotelio vascular, comprendiendo cada una el factor secretor específico de tejido apM1 como ingrediente activo. La referencia de patente 5 describe un procedimiento para detectar fosfolípido del bacilo tuberculoso observando la imagen de aglutinación formada cuando el látex que contiene las partículas de látex sensibilizadas que llevan el fosfolípido de bacilo tuberculoso sobre la superficie se hace reaccionar con un fluido corporal. (referencia No. de patente 1) Biochemical and Biophysical Research Communications, (U.S.A.), 1996, vol. 221, p. 286-289 (referencia No. de patente 2) Gene, (Países Bajos), 1997, vol. 190, p.227-235 (referencia No. de patente 3) Hiroshi Hirose et al., N.º 163, "Kessei adiponectin noudo to insulin teikousei: kenjyojin oyobi 2-gata tonyoubyou kanjya ni okeru kentou", "Meeting of the 75th Japanese endocrinology association study, Abstracts", The Japan Endocrine Society, 2002, p.118 (referencia No. de patente 4) Yasuichi Ohmoto et al., "Adiponectin no ELISA kit ni tuite", Bio Clinica, 2002, vol. 17, p. 156-159 (referencia No de patente 5) Yasuichi Ohmoto et al., "Adiponectin ELISA kit no kaihatsu to kecchu sonzai youshiki no kaiseki", Medical Science Digest, 2002, vol. 28, No. 12, p.40-43 (referencia No. de patente 6) Arteriosclerosis, thrombosis, and vascular biology, (U.S.A.), 2003, vol. 23, p.85-89 (referencia No. de patente 7) Circulation, (U.S.A.), 2003, vol. 107, p.671-674 (referencia No. de patente 8) Journal of Biochemistry, 1996, vol. 120, p.803-812 (referencia de patente 1) WO 99/21577 (referencia de patente 2) WO 03/016906 (referencia de patente 3) EP-A-1 365 022 (referencia de patente 4) EP-A-1 033 134 (referencia de patente 5) JP-A-60111159 Divulgación de la invención Un objeto de la presente invención es remediar las desventajas mencionadas anteriormente de la técnica anterior, y proporcionar un reactivo de análisis (en particular, un reactivo de análisis para un analizador automatizado) en el que no es necesario una predilución o un pretratamiento de un líquido biológico (por ejemplo, sangre, orina, cultivos celulares, extractos de tejido, un líquido cefalorraquídeo, o fluidos secretores, en particular sangre) que se va a analizar, se puede realizar el análisis de forma rápida y conveniente, y las instalaciones para ello no estén... [Seguir leyendo]

 


Reivindicaciones:

1. Un reactivo de látex para analizar la adiponectina que comprende una suspensión de partículas de látex que lleva un anticuerpo policlonal anti-adiponectina que se une específicamente a adiponectina, en el que el reactivo de látex se selecciona de: (i) un sistema de componentes de un reactivo en el que un tampón y las partículas de látex están contenidos en un reactivo; y (ii) un kit compuesto de dos reactivos en el que el primer reactivo contiene un tampón y el segundo reactivo contiene las partículas de látex. 2. Un procedimiento para analizar la adiponectina en un líquido biológico que contiene posiblemente adiponectina, comprendiendo las etapas de: poner el líquido biológico sin un pretratamiento, en el que dicho pretratamiento es desnaturalización química del líquido biológico con dodecilsulfato de sodio, en contacto con un reactivo de látex para analizar la adiponectina como se define en la reivindicación 1; y analizar ópticamente un grado de aglutinación de partículas de látex. E04723044 09-01-2012   16 E04723044 09-01-2012

 

Patentes similares o relacionadas:

Detección de CD31 desprendido derivado de plaquetas, del 8 de Mayo de 2019, de INSTITUT NATIONAL DE LA SANTE ET DE LA RECHERCHE MEDICALE (INSERM): Un fragmento de una proteína CD31 de longitud completa, que comprende al menos una parte del sexto dominio extracelular de tipo inmunoglobulina de dicha proteína […]

Dispositivo de análisis de muestras, del 8 de Mayo de 2019, de Takano Co., Ltd: Un dispositivo de análisis de muestras que comprende: un chip de análisis ; un soporte de chip que permite instalación de un chip […]

Sistema y procedimiento para pruebas de inmunoensayo de flujo lateral, del 8 de Mayo de 2019, de AMERICAN BIO MEDICA CORPORATION: Un sistema de inmunoensayo de flujo lateral , que comprende: un alojamiento que incluye una porción de cuerpo y una porción de base que tiene […]

Inmunoensayo basado en partículas que usa un agente de unión específica a un analito pegilado, del 8 de Mayo de 2019, de F. HOFFMANN-LA ROCHE AG: Un procedimiento para la medición de un analito en un ensayo de unión específica a un analito basado en micropartículas, en el que dichas micropartículas […]

Ensayo multiplex para Hepatitis B, del 3 de Mayo de 2019, de BIO-RAD LABORATORIES, INC.: Un kit que comprende: (a) un primer receptáculo que comprende: (i) perlas que se conjugan con antígeno de superficie de Hepatitis B (HBsAg) de humano y marcador […]

Procedimiento de captura de una molécula en una muestra, del 3 de Mayo de 2019, de CENTRE NATIONAL DE LA RECHERCHE SCIENTIFIQUE (CNRS): Procedimiento de captura de una molécula en una muestra, que comprende las siguientes etapas: a) la mezcla de dicha muestra con partículas magnéticas, […]

Procedimiento para reducir falsos negativos en inmunoensayo para ensayar muestra derivada de biomembrana, del 3 de Mayo de 2019, de DENKA SEIKEN CO., LTD.: Un procedimiento para suprimir un falso negativo en un inmunoensayo para analizar una sustancia diana en una muestra derivada de una membrana mucosa biológica, en […]

Composiciones, kits y métodos para presentación de antígenos in vitro, evaluación de eficacia de vacunas y evaluación de la inmunotoxicidad de productos biológicos y fármacos, del 1 de Mayo de 2019, de UNIVERSITY OF MIAMI: Método de evaluación de una respuesta de células T frente a una vacuna o un producto biológico, comprendiendo el método las etapas de: a) preparar o proporcionar […]

Otras patentes de la CIP G01N33/543