Procedimiento y kit (1) para verificar, en una muestra de semen humano o animal,

la existencia de espermatozoides fecundantes, cuya importante finalidad, es la de ofrecer, desde una muestra de semen capacitado, un método sencillo, alternativo y garantizado de verificación. En el que, la combinación de sustancias como el ácido hialurónico (2) y el cloruro cálcico (3), componentes de la solución reactiva característica en la invención, causa modificaciones en los espermatozoides de dicha muestra de semen. Por lo que, tras la reacción acrosómica, se determina, mediante la observación o lectura a través de microscopio con suficientes aumentos, la existencia de espermatozoides fértiles (9). Y, del mismo modo, la existencia de espermatozoides infértiles (11) en la muestra de semen. Con lo cual, se obtienen conclusiones determinantes referidas a la fertilidad y la reproducción.

PROCEDIMIENTO Y KIT PARA VERIFICAR, EN UNA MUESTRA DE SEMEN HT..MANO O ANIMAL, IA EXISTENCIA DE ESPERMATOZOIDES FECUNDANTES

OBJETO DE LA INVENCION

La Patente objeto de la descripción, se refiere en este caso al novedoso diseño y creación de un método o procedimiento determinado, mediante el que se obtiene, por reacción de varias composiciones químicas en combinación y mezcla sobre una pequeña muestra de semen y con un soporte portaobjetos junto a otro cubreobjetos, tales como los de uso en observaciones microscópicas, una serie de cambios en todos los espermatozoides de la muestra de semen humano o animal empleada en el test de verificación, de manera que siempre, bajo la apreciación o lectura visual, se obtienen conclusiones evidentes y de gran exactitud según sean los cambios morfológicos causados en la muestra de semen, por lo que, la invención se concibe con la importante finalidad de poder determinarse verdaderamente la existencia de espermatozoides capaces de fecundar el óvulo, y a través de su aplicación, se consigue ofrecer al mercado la solución más simple, eficiente y veraz que resuelve en gran medida toda la problemática existente vinculada a la fecundidad o a la reproducción en general, y en particular la capacidad fecundante o fértil del espermatozoide.

CAMPO DE IA INVENCION

El ámbito de aplicación de la invención es el que abarca ampliamente el sector de mercado destinado a la realización de cualquier tipo de pruebas diagnosticas o de análisis de laboratorio, tanto pruebas o análisis dirigidos

a personas como asociados a la veterinaria que tengan una relación con la determinación de la capacidad fecundante de espermatozoides desde una muestra de semen, así como a sectores enmarcados en la fabricación o la comercialización de toda clase de productos farmacológicos en general, y en particular, el sector dedicado propiamente a la elaboración

o manipulación y producción o venta de sustancias como el cloruro cálcico y el ácido hialurónico, independientemente del estado físico en que se presenten.

y por otro lado, sectores fabricantes de fundas

o envases para el transporte de cristales portaobjetos y cubreobjetos empleados en observación por microscopio con carácter generalizado, y empresas fabricantes de ampollas o de envases monodosis que permitan contener la solución reactiva característica de la invención, incluso en otros formatos que posibiliten la dosificación y el uso combinado de las sustancias o compuestos químicos aplicables a la novedad.

ANTECEDENTES DE LA INVENCION

Por parte de la solicitante, se desconoce en la actualidad la existencia de una invención que se presente con las características descritas en la propia memoria de la Patente, siendo su empleo totalmente novedoso.

Existen métodos actualmente con los que es posible efectuar distintas determinaciones partiéndose de una muestra de semen, referidas básicamente al recuento, a la movilidad, la morfología, la supervivencia, la inmunología, la tinción vital o la fragmentación del ADN de los espermatozoides en dicha muestra de semen, además de diversos test como el test acrosina, test de Hamster, HOOS-test o MAR-test, entre los test comúnmente realizables de recuento y calidad en todos los espermatozoides, con lo cual solamente se logra verificar

determinados aspectos relativos al estado en que se encuentran los espermatozoides de la muestra, y por ello es importante mencionar por ejemplo que una cantidad de espermatozoides no implica ni significa que los espermatozoides de un semen de muestra y ensayo sean o no capaces de fecundar el óvulo, lo cual les desvincula totalmente de la presente novedad.

Por otra parte, se conoce la existencia de los procedimientos o los métodos de reproducción asistida, en casos en los que en general, pueden presentarse anomalías y problemas de fertilidad que deben ser tratados de forma que, con la ayuda de diversos medios desarrollados como es por ejemplo la propia reproducción asistida, se consiga la solución efectiva y favorable que derive en la fecundación y posteriormente en el embarazo.

Sin conocerse hasta el momento, ningún tipo de procedimiento que permita determinar, con la mayor veracidad tras su aplicación en una muestra de semen animal o humano, las cualidades de los espermatozoides integrados en dicha muestra, para saber si hay espermatozoides característicos que indiquen una capacidad fecundante, además de poder ser un procedimiento tanto de calificación y verificación con la precisión y exactitud que la propia muestra realmente ofrezca, como de valoración y recuento de espermatozoides fecundantes, para poder aplicar en su caso, tratamientos que mejoren la calidad del semen, todo ello, siempre bajo la finalidad de predecir con antelación y de manera muy sencilla y económica, que la causa de cualquier problema de fertilidad o reproducción pueda ser o no el semen y la parte masculina o el macho, sin necesidad de someter a la parte femenina o la hembra, a la reproducción asistida y a la fecundación del óvulo por procedimientos de laboratorio que económicamente suponen un importante coste, y un desgaste emocional elevado para la pareja, ya que con la aplicación

de la invención, se consigue verificar así como descartar

o afirmar que el problema en la reproducción esté originado por los espermatozoides, simplemente con la reacción de los componentes en la muestra de semen, por lo que el novedoso

procedimiento también permite, al poderse mejorar la calidad seminal en un alto porcentaje de los casos con tratamiento farmacológico, evitar las técnicas de reproducción asistida y conseguir el embarazo de forma espontánea.

y con la posibilidad, contemplada como parte de la novedad, consistente en ofrecer prácticamente un envase

o kit con los accesorios necesarios para que el usuario en laboratorios o en departamentos y centros de reproducción, indistintamente públicos o privados, disponga de un producto

perfectamente diseñado y apto para su función, de test o de comprobación determinante.

Además, es importante citar en este apartado, por considerar de interés su mención, que existe paralelamente

al registro de la actual solicitud de Patente, un registro de Marca comunitaria con la denominación: "FERTITEST", de la cual es Titular la misma solicitante de esta Patente, para vincularse la Marca comercial con este procedimiento y kit.

2 5 DESCRIPCION DE LA INVENCION

El procedimiento y kit para verificar, en una muestra de semen humano o animal, la existencia de espermatozoides fecundantes, a los cuales se refiere propiamente la presente

descripción, corresponde en este caso a la creación de un procedimiento novedoso por el que puede saberse con certeza y de forma muy práctica si existen espermatozoides fecundantes

o fértiles, en una muestra de semen humano o de animales,

que además, incluye el diseño de un kit, compuesto de funda 35 o envase con un cristal portaobjetos impregnado de la solución

reactiva para que sobre ella se deposite una muestra de semen ya capacitado, o bien, ofreciéndose la dosificación necesaria de dicha solución en cualquier forma de envase monodosis por separado, sin mostrarse entonces impregnada la superficie del cristal portaobjetos, y aportándose en ambos casos, integrado en este kit característico, también un cristal cubreobjetos.

Concretamente, este procedimiento, consta de una combinación de sustancias o de compuestos químicos constituidos por un porcentaje mayoritario y variable de ácido hialurónico, y otro porcentaje complementario para alcanzar el 100%, de cloruro cálcico, que con su mezcla preparada previamente y con su aplicación posterior en la muestra, reacciona globalmente con el semen y de forma directa con la cabeza de cada espermatozoide, compuesta por acrosoma, membrana nuclear y núcleo que junto a la pieza intermedia, la cola y la pieza terminal constituyen esquemáticamente el espermatozoide humano o animal.

El acrosoma está formado por enzimas como la hialuronidasa y la acrosina, cuyas funciones son las de degradar la pared del óvulo para que la cabeza penetre al interior del mismo, de donde resulta la fecundación y progresivamente el embrión y el feto humano o animal en la reproducción.

La reacción, ocasionada por la solución...

1. Procedimiento para verificar la existencia

de espermatozoides fecundantes en una muestra de semen humano o animal, que se caracteriza por comprender las siguientes fases o etapas:

Poner en contacto la solución reactiva de ácido hialurónico (2) y cloruro cálcico (3) con una muestra de semen previamente capacitado.

Provocar la reacción acrosómica característica en la cabeza de cada uno de los espermatozoides de la muestra de semen.

y observar los resultados por microscopio con suficientes aumentos.

De manera que los espermatozoides que presenten un halo blanquecino (10) perfectamente apreciable en su cabeza, que además se muestra completamente íntegra, son espermatozoides fértiles (9) .

y los espermatozoides que al reaccionar con la solución reactiva estén exentos del halo blanquecino (10) característico en los espermatozoides fértiles (9) , además de figurar deformaciones irregulares en la cabeza o una notable reducción de las dimensiones de la misma, son siempre espermatozoides infértiles (11) .

2. Kit (1) para verificar, en una muestra de semen humano o animal, la existencia de espermatozoides fecundantes, que se caracteriza por constar de un cristal portaobjetos (4) impregnado con la solución reactiva de ácido hialurónico (2) y cloruro cálcico (3) , y además, de un cristal cubreobj etos (5) , ambos aloj ados en una funda o envase (6) con nervios separadores (7) internos por los que se insertan separadamente los cristales, de forma que permitan ser prácticamente transportados en dicha funda (6) sin entrar en contacto uno con el otro.

3. Uso del ácido hialurónico (2) y el cloruro cálcico (3) en combinación y mezcla para llevar a cabo un procedimiento según la reivindicación 1.