Un péptido que tiene capacidad de modular el metabolismo de lípidos pero que no tiene efecto apreciable sobre IGF-1,

para su uso en un método de prevención o tratamiento de un trastorno óseo o para aumentar la formación ósea y/o la deposición de osteoblastos en un mamífero, en el que el péptido es un fragmento C-terminal de la hormona del crecimiento desde los restos de aminoácidos 2 a 50 y comprende los aminoácidos 182-189 de la hormona del crecimiento humano (hGH 182-189) o una variante de secuencia de aminoácidos seleccionada de las secuencias: Ref. Nº ESTRUCTURA 9502 Leu Arg Ile Val Gln Pen Arg Ser Val Glu Gly Ser Pen Gly Phe 9407 Leu Arg Ile Val Gln Cys Lys Ser Val Glu Gly Ser Cys Gly Phe 408 Leu Arg Ile Val Gln Cys Lys Ser Val Glu Gly Ser Cys Gly Phe (enlace amida) 9612 Leu Arg Ile Val Gln Cys Arg Ala Val Glu Gly Ser Cys Gly Phe 9613 Leu Arg Ile Val Gln Cys Arg Ser Ala Glu Gly Ser Cys Gly Phe 9615 Leu Arg Ile Val Gln Cys Arg Ser Val Glu Ala Ser Cys Gly Phe 9616 Leu Arg Ile Val Gln Cys Arg Ser Val Glu Gly Ala Cys Gly Phe 9501 Leu Arg Ile Val Gln Cys Arg Ser Val Glu D-Ala Ser Cys D-Ala Phe

Métodos para prevenir o tratar trastornos óseos

La presente invención se refiere a métodos para la prevención o el tratamiento de trastornos óseos y a compuestos para su uso en tales métodos. En particular, la invención se refiere a métodos para prevenir o tratar trastornos óseos que están caracterizados por un metabolismo óseo alterado, incluyendo osteoporosis, osteoporosis postmenopáusica, osteopenia, enfermedad de Paget, metástasis osteolíticas en pacientes con cáncer, osteodistrofia en enfermedades hepáticas y el metabolismo óseo alterado causado por insuficiencia renal o hemodiálisis, fractura

ósea, cirugía ósea, envejecimiento, embarazo y malnutrición.

Antecedentes de la invención

Todas las referencias, incluyendo cualquiera de las patentes o solicitudes de patente, citadas en esta memoria

descriptiva, no deben considerarse como que constituyen una admisión de que ninguno de estos documentos forme parte del conocimiento general común en la técnica, ni Australia o en ningún otro país. El análisis de las referencias pone de manifiesto las afirmaciones de sus autores y los solicitantes se reservan el derecho de cambiar la veracidad e incumbencia de los documentos citados.

El hueso es un tejido vivo que está en constante renovación. Contiene células y fibras de colágeno especializadas incrustadas con un mineral cristalino. Juntos, los minerales, células y fibras forman una matriz orgánica u “osteoide”.

El hueso está sometido constantemente a formación ósea por osteoblastos y a reabsorción ósea por osteoclastos. Si los niveles de calcio en sangre disminuyen, la reabsorción del hueso aumenta para suplir las necesidades de calcio

en cualquier parte del cuerpo.

El metabolismo alterado puede caracterizarse por un desequilibrio entre la formación ósea y la reabsorción ósea.

Esto puede suceder en relación a diversos tipos de trastornos. Son ejemplos la osteoporosis, osteopenia,

enfermedad de Paget, metástasis osteolíticas en pacientes con cáncer, osteodistrofia en enfermedades hepáticas y el metabolismo óseo alterado causado por insuficiencia renal o hemodiálisis, fractura ósea, cirugía ósea, envejecimiento, embarazo y malnutrición.

La pérdida ósea se acelera con el envejecimiento. La enfermedad ósea más importante en la población de edad

avanzada es la osteoporosis. Esta enfermedad se caracteriza por una enorme pérdida ósea que conduce a un aumento de la fragilidad ósea y existe mayor riesgo de que se produzcan fracturas. Produce un dolor considerable, discapacidad, deformidad y pérdida de independencia y supone un coste y una carga para los servicios sanitarios. A nivel internacional, como resultado de la osteoporosis, cada año se producen más de 1, 5 millones de fracturas.

Existen dos tipos de osteoporosis reconocidos. El primero se produce típicamente entre los años 50 y 75 y afecta seis veces más a la mujer (osteoporosis postmenopáusica) que al hombre. El segundo tipo se denomina osteoporosis senil y afecta tanto a hombres como a mujeres de una edad de aproximadamente 75 años y no implica una pérdida ósea mayor de lo normal. En ambos tipos de osteoporosis, los factores de riesgo son, elevada ingesta de cafeína, consumo de alcohol, bajo peso corporal y baja ingesta de calcio.

45 La causa más destacable y bien documentada de la osteoporosis postmenopáusica es la insuficiencia de estrógenos. Después de la menopausia, los ovarios dejan de producir esta hormona, que directamente se relaciona con pérdida de contenido mineral óseo. Un tratamiento conocido para los síntomas posmenopáusicos, incluyendo la osteoporosis, es la terapia de reemplazo hormonal (TRH) , y este reemplazo de estrógenos previene eficazmente el

50 desarrollo de la osteoporosis. Sin embargo el uso de la TRH puede tener efectos secundarios graves, por ejemplo, estimulación del crecimiento del tejido mamario, y se requiere un tratamiento alternativo para la osteoporosis postmenopáusica.

Las causas principales de otros tipos de trastornos óseos deben aún determinarse y se requiere un tratamiento para 55 dichos trastornos.

El documento PCT/AU98/00724 describe el tratamiento de la obesidad usando análogos de la secuencia carboxiterminal de una hormona de crecimiento, particularmente un análogo de la secuencia de carboxi-terminal de la hormona de crecimiento humano que contiene los restos de aminoácidos 177-191.

60 Giustina, A. et al., (1995) J. Clinical Endoc. and Metab. vol. 80, Nº 1, páginas 122-129 describen que la hormona del crecimiento humano estimula la síntesis de proteínas y la actividad de osteoblastos y aumenta la síntesis ósea. Se sugiere que la hormona del crecimiento es útil en la prevención de la osteoporosis inducida por glucocorticoides pero puede tener posibles efectos secundarios de resistencia a insulina e hiperinsulinemia que conducen a intolerancia a

65 los hidratos de carbono.

Un objetivo de una realización preferida de la presente invención es proporcionar un péptido para su uso en un método para la prevención o el tratamiento de trastornos óseos y composiciones para su uso en dichos métodos.

Resumen

En un primer aspecto, de acuerdo con la presente invención, en un mamífero se proporciona un péptido para su uso en un método de prevención o tratamiento de trastornos óseos, teniendo el péptido capacidad de modular el metabolismo de lípidos sin tener ningún efecto apreciable sobre el factor de crecimiento insulínico de tipo 1 (IGF-1) , comprendiendo el péptido un fragmento C terminal de la hormona del crecimiento. Este péptido se expone en la reivindicación 1.

En la patente australiana Nº 693478 de la Universidad de Monash, para el control de la obesidad, se describe el uso de un péptido derivado de la secuencia carboxilo-terminal de la hormona del crecimiento humano, o de regiones correspondientes de la hormona del crecimiento de otras especies de mamíferos. Esta región de la hormona del crecimiento tiene la capacidad de modular el metabolismo de lípidos. En particular, se descubrió un péptido sintético correspondiente a los restos de aminoácidos 177-191 de la secuencia de la hormona del crecimiento humano (a partir de ahora, en lo sucesivo en el presente documento, denominado, hGH 177-191) que reducía el aumento de peso corporal y la masa de tejido adiposo en un sistema de modelo para la obesidad, el ratón C57B1/6J (Ob/Ob) . Una solicitud posterior; PCT/AU98/00724 de Methabolic Pharmaceuticals Ltd, describe análogos del péptido hGH177-191 que comparten esta actividad.

La solicitud de los autores de la presente invención, PCT/AU00/01362 (WO01/33977) , describe la sorprendente actividad oral de dichos péptidos.

Actualmente se han realizado estudios del AOD9604 (Tyr-hgH 177-191) sobre el esqueleto en un modelo de rata envejecida para la osteoporosis postmenopáusica. Como los péptidos que corresponden a fragmentos C terminal de la hormona del crecimiento humano, descritos en las solicitudes anteriores de los autores de la presente invención, no tienen ninguno de los efectos del crecimiento normal de la hormona del crecimiento de longitud completa normal y no tienen efecto sobre el IGF-1 (que media los efectos del crecimiento de la hormona de crecimiento humano) , se esperaba no encontrar ningún efecto sobre el metabolismo óseo. Sorprendentemente, los autores encontraron, en dos estudios, que el AOD9604 tiene efectos sobre el crecimiento óseo y de hecho se encontró que el efecto sobre la prevención de la pérdida ósea era mejor que el del estrógeno.

Por lo tanto, el autor de la presente invención, ha reconocido que un péptido, correspondiente a un fragmento Cterminal de la hormona del crecimiento humano (AOD9604) , tiene un efecto sobre el metabolismo óseo. Por lo tanto el autor de la presente invención propone que todos los fragmentos C-terminal de la hormona del crecimiento humano, que previamente hayan mostrado tener capacidad de modular el metabolismo de lípidos, tendrá un efecto similar al AOD9604 sobre el metabolismo óseo. Por consiguiente, los autores de la presente invención proponen que todos los péptidos, que previamente hayan mostrado tener capacidad de modular el metabolismo de lípidos sin tener ningún efecto sobre el IGF-1, puedan usarse para tratar o prevenir trastornos óseos.

1. Un péptido que tiene capacidad de modular el metabolismo de lípidos pero que no tiene efecto apreciable sobre IGF-1, para su uso en un método de prevención o tratamiento de un trastorno óseo o para aumentar la formación

ósea y/o la deposición de osteoblastos en un mamífero, en el que el péptido es un fragmento C-terminal de la hormona del crecimiento desde los restos de aminoácidos 2 a 50 y comprende los aminoácido.

18. 189 de la hormona del crecimiento humano (hG.

18. 189) o una variante de secuencia de aminoácidos seleccionada de las secuencias:

Ref. Nº ESTRUCTURA 9502 Leu Arg Ile Val Gln Pen Arg Ser Val Glu Gly Ser Pen Gly Phe 9407 Leu Arg Ile Val Gln Cys Lys Ser Val Glu Gly Ser Cys Gly Phe

408 Leu Arg Ile Val Gln Cys Lys Ser Val Glu Gly Ser Cys Gly Phe

(enlace amida) 9612 Leu Arg Ile Val Gln Cys Arg Ala Val Glu Gly Ser Cys Gly Phe 9613 Leu Arg Ile Val Gln Cys Arg Ser Ala Glu Gly Ser Cys Gly Phe 9615 Leu Arg Ile Val Gln Cys Arg Ser Val Glu Ala Ser Cys Gly Phe 9616 Leu Arg Ile Val Gln Cys Arg Ser Val Glu Gly Ala Cys Gly Phe 9501 Leu Arg Ile Val Gln Cys Arg Ser Val Glu D-Ala Ser Cys D-Ala Phe

2. El péptido de acuerdo con la reivindicación 1 para su uso en un método de acuerdo con la reivindicación 1, en el que el fragmento comprende una de las secuencias:

Ref. Nº ESTRUCTURA

9405 CH3CO-Leu Arg Ile Val Gln Cys Arg Ser Val Glu Gly Ser Cys Gly Phe 9410 H -Leu Arg Ile Val Gln Cys Arg Ser Val Glu Gly Ser Cys Gly Phe 9404 Leu Arg Ile Val Gln Cys Arg Ser Val Glu Gly Ser Cys Gly Phe -CONH2 9604 Tyr Leu Arg Ile Val Gln Cys Arg Ser Val Glu Gly Ser Cys Gly Phe 9605 Lys Leu Arg Ile Val Gln Cys Arg Ser Val Glu Gly Ser Cys Gly Phe 9618 Lys Lys Leu Arg Ile Val Gln Cys Arg Ser Val Glu Gly Ser Cys Gly Phe 9607 Ala Arg Ile Val Gln Cys Arg Ser Val Glu Gly Ser Cys Gly Phe 9606 Leu Lys Ile Val Gln Cys Arg Ser Val Glu Gly Ser Cys Gly Phe 9608 Leu Arg Ala Val Gln Cys Arg Ser Val Glu Gly Ser Cys Gly Phe 9403 Leu Arg Lys Val Gln Cys Arg Ser Val Glu Gly Ser Cys Gly Phe 9609 Leu Arg Ile Ala Gln Cys Arg Ser Val Glu Gly Ser Cys Gly Phe 9610 Leu Arg Ile Val Ala Cys Arg Ser Val Glu Gly Ser Cys Gly Phe 9602 Leu Arg Ile Val Gln Cys Arg Ser Val Glu Gly Ser Cys Ala Phe 9601 Leu Arg Ile Val Gln Cys Arg Ser Val Glu Gly Ser Cys Gly Ala

3. El péptido de acuerdo con la reivindicación 1 ó 2 para su uso en un método de acuerdo con la reivindicación 1, en el que el péptido comprende los restos de aminoácido.

17. 191 de la secuencia de la hormona del crecimiento humano.

4. El péptido de acuerdo con cualquier reivindicación anterior para su uso en un método de acuerdo con la

reivindicación 1, en el que el péptido comprende al menos el bucle de una hormona del crecimiento de mamífero unido por disulfuro.

5. El péptido de acuerdo con la reivindicación 3 para su uso en un método de acuerdo con la reivindicación 1, en el

que el péptido es los aminoácido.

17. 191 de la hormona del crecimiento humano (hG.

17. 191) . 25

6. El péptido de acuerdo con la reivindicación 1 ó 2 para su uso en un método de acuerdo con la reivindicación 1, en el que el péptido es Tyr-hG.

17. 191, y tiene la secuencia Tyr Leu Arg Ile Val Gln Cys Arg Ser Val Glu Gly Ser Cys Gly Phe.

7. El péptido de acuerdo con cualquier reivindicación anterior para su uso en un método de acuerdo con la reivindicación 1, en el que el péptido se conjuga con un compañero de fusión.

8. El péptido de acuerdo con cualquiera reivindicación anterior para su uso en un método de acuerdo con la

reivindicación 1 en combinación con otro agente activo contra trastornos óseos. 35

9. El péptido de acuerdo con la reivindicación 8 para uso en un método de acuerdo con la reivindicación 1, en el que el otro agente activo es calcio, minerales óseos, ácido gamma linolénico, vitamina D, vitamina K, estrógenos, compuestos que imitan a estrógenos, bifosfatos o isoflavonas.

10. El péptido de acuerdo con la reivindicación 8 o reivindicación 9 para su uso en un método de acuerdo con la reivindicación 1, en combinación con una fuente de energía.

11. El péptido de acuerdo con cualquier reivindicación anterior para su uso en un método de acuerdo con la reivindicación 1 por administración por vía oral, sublingual, bucal, intranasal, por inhalación, transdérmica, tópica o parenteral, por técnicas de inyección o infusión subcutánea, intravenosa, intramuscular, intratecal, intracraneal o en formulaciones de dosificación unitaria que contienen transportadores, adyuvantes y vehículos no tóxicos

convencionales farmacéuticamente aceptables.

12. El péptido de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones 1 a 10 para su uso en un método de acuerdo con la reivindicación 1, por administración por vía oral en forma de un alimento modificado genéticamente.

13. El péptido de acuerdo con cualquier reivindicación anterior para su uso en un método de acuerdo con la reivindicación 1, en el que el trastorno óseo se caracteriza por un metabolismo óseo alterado.

14. El péptido de acuerdo con la reivindicación 13 para su uso en un método de acuerdo con la reivindicación 1, en el que el trastorno óseo se selecciona de osteoporosis, incluyendo osteoporosis postmenopáusica, osteopenia,

enfermedad de Paget, metástasis osteolíticas en pacientes con cáncer, osteodistrofia en enfermedades hepáticas y el metabolismo óseo alterado causado por insuficiencia renal, hemodiálisis, fractura ósea, cirugía ósea, envejecimiento, embarazo y malnutrición.

15. El péptido de acuerdo con cualquier reivindicación anterior para su uso en un método de acuerdo con la 20 reivindicación 1, en el que el mamífero también carece de hormona de crecimiento y/o es un ser humano.

16. El uso de un péptido que tiene capacidad de modular el metabolismo de lípidos pero que no tiene efecto apreciable sobre IGF-1, en la preparación de un medicamento para la prevención o el tratamiento de un trastorno óseo para aumentar la formación ósea y/o la deposición de osteoblastos en un mamífero, en el que el péptido es un

fragmento C-terminal de la hormona de crecimiento desde los restos de aminoácidos 2 a 50 y comprende los aminoácido.

18. 189 de la hormona del crecimiento humano (hG.

18. 189) o una variante de secuencia de aminoácidos seleccionada de la secuencia:

Ref. Nº ESTRUCTURA 9502 Leu Arg Ile Val Gln Pen Arg Ser Val Glu Gly Ser Pen Gly Phe 9407 Leu Arg Ile Val Gln Cys Lys Ser Val Glu Gly Ser Cys Gly Phe 9408 Leu Arg Ile Val Gln Cys Lys Ser Val Glu Gly Ser Cys Gly Phe

(enlace amida) 9612 Leu Arg Ile Val Gln Cys Arg Ala Val Glu Gly Ser Cys Gly Phe 9613 Leu Arg Ile Val Gln Cys Arg Ser Ala Glu Gly Ser Cys Gly Phe 9615 Leu Arg Ile Val Gln Cys Arg Ser Val Glu Ala Ser Cys Gly Phe 9616 Leu Arg Ile Val Gln Cys Arg Ser Val Glu Gly Ala Cys Gly Phe 9501 Leu Arg Ile Val Gln Cys Arg Ser Val Glu D-Ala Ser Cys D-Ala Phe

17. El uso de acuerdo con la reivindicación 17, en el que:

(i) el péptido es como se define en cualquiera de las reivindicaciones 2 a 7;

(ii) el medicamento comprende adicionalmente otro agente como se define en la reivindicación 8 ó 9 y

opcionalmente también comprende una fuente de energía; 35 (iii) el medicamento es para la administración como se define en la reivindicación 11 ó 12;

(iv) el trastorno óseo es como se define en la reivindicación 13 ó 14; o

(v) el mamífero es como se define en la reivindicación 15 ó 16.

18. El péptido de la reivindicación 6 para su uso en un método de acuerdo con la reivindicación 1 o el uso de

acuerdo con la reivindicación 16 (cuando el péptido es Tyr-hG.

17. 191) para su uso en un método de aumentar la proliferación de osteoblastos.

Efectos de AOD9604 en un ensayo de proliferación de osteoblastos primarios en rata