La invención se relaciona con un método para el enriquecimiento de nematodos con ácidos grasos para su uso en acuicultura.

Asimismo, la invención se relaciona con un método que consiste en alimentar a los nematodos con una bacteria productora de ácidos grasos y en un método para alimentar peces, moluscos o crustáceos con dichos nematodos.

MÉTODO DE ENRIQUECIMIENTO DE NEMATODOS CON ÁCIDOS GRASOS

CAMPO DE LA INVENCIÓN

La invención se relaciona con un método para el enriquecimiento de nematodos con ácidos grasos para su uso en acuicultura. Dicho método consiste en alimentar a los nematodos con una bacteria productora de dichos ácidos grasos y posteriormente, alimentar a peces, moluscos o crustáceos con dichos nematodos.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN

Los ácidos grasos, constituyentes de los triacilgliceroles, son necesarios para todos los seres vivos, pues no sólo son una fuente de energía, sino que además son fundamentales para el crecimiento, desarrollo y reproducción. Aquellos ácidos grasos que contienen dos o más dobles enlaces se denominan ácidos grasos poli-insaturados (del inglés, PUFA) . Los PUF As son constituyentes de las membranas celulares y forman parte de los sistemas de señalización celular. Su deficiencia puede afectar negativamente la función celular y eventualmente puede conducir a la muerte. En particular, el PUF A de cadena larga de la serie omega 3 (m3) , ácido eicosapentaenoico (C20:5m3, EPA) , ha sido objeto de diversas investigaciones debido a sus efectos beneficiosos observados en los lípidos plasmáticos de personas con cardiomiopatías coronarias, en el cáncer yen la artritis reumatoide. Desde el punto de vista fisiológico, una de las funciones más importantes de los PUF As es la de ser precursores de los eicosanoides, compuestos de veinte átomos de carbono (C20) . Los eicosanoides corresponden a prostaglandinas, prostacic1inas y leucotrienos (Simopoulos, 1991. J. Clin. Nutr. 54: 438-63) . Los eicosanoides derivados de los PUFAs omega 6 (m6) tienen propiedades fisiológicas diferentes a aquellos que se originan de los PUF As m3. Las prostaglandinas se sintetizan por medio de la oxidación de los ácidos y-linolénico (C18:3m6, GLA) , araquidónico (C20:4m6, ArA) y EP A, los cuales regulan funciones secretoras, digestivas, reproductivas, procesos inmunológicos y de circulación sanguínea.

Distintas investigaciones han demostrado también la esencialidad de los PUF As m3, en especial de ArA, EPA Y ácido docosahexaenoico (C22:6m3, DHA) , en la formulación de alimentos empleados en acuicultura (peces y larvas de crustáceos) . Normalmente, la dieta para el cultivo de muchas especies marinas requiere alrededor del 1 al 2% de PUFAs de cadena larga (Rees et al., 1994. Aquaculture 122, 193-207) . Actualmente, los aceites de pescado son la principal fuente de PUF As del tipo co3, como el EPA y el DHA. Sin embargo, existen algunos problemas al obtener el alimento para peces de los propios peces, como la dificultad de obtener productos muy puros y el olor desagradable, así como la baja sostenibilidad ecológica. Se estima que en los próximos años la demanda de PUF A co3 aumentará debido al crecimiento de la industria acuícola y al incremento en la demanda de PUFAs específicos para la elaboración de suplementos alimenticios para humanos y animales. Fuentes alternativas para la producción de PUF As co3 son bacterias, hongos y microalgas.

La síntesis de ácidos grasos poli-insaturados co3 por bacterias depende no sólo del microorganismo sino también de las condiciones ambientales en las que se desarrollan dichas bacterias. No obstante, la producción bajo condiciones de crecimiento controladas permite obtener productos consistentes y reproducibles. La producción de PUF As a través de bacterias es atractiva ya que algunas especies sintetizan sólo un ácido graso, a diferencia de la complej a mezcla de ácidos grasos producida por microalgas o acumulada en los peces (Russell et al. 1999; Microbiology; 145: 767-79) . Las bacterias marinas productoras de ácidos grasos poli-insaturados, en particular EPA y DHA, pertenecen a los géneros Shewanella, Pseudoalteromonas, Colwellia y Moritella (Russell, N. J. & Nichols, D. S. (1999) . Microbiology 145, 767-779) . Estas especies marinas se encuentran en ambientes donde prevalecen altas presiones y bajas temperaturas.

En la mayoría de las espeCIes acuícolas cultivadas, en sus pnmeros estadios de desarrollo (estadio larvario) , la alimentación requiere principalmente tres características: que dicha alimentación presente organismos que estén vivos para que resulten atractivos a la larva, que presenten pequeño tamaño (alrededor de 1 mm) y que sean ricos en PUF As. El zooplancton marino, que es el alimento natural de estas especies, es dificil de cultivar y el sustituto que se ha encontrado más efectivo para el cultivo larvario es un crustáceo conocido como Artemia que se captura en grandes lagos salados, principalmente en el lago salado de Utah. La demanda que se produce de Artemia a nivel internacional es enorme, por 10 tanto su disponibilidad fluctúa enormemente, así como su precio, que es habitualmente elevado. La Artemia no produce DHA, uno de los PUF As esenciales, pero existen protocolos para enriquecerlas en este ácido graso, por ejemplo, en W00150880 se describe un método para enriquecer con DHA Artemia y rotíferos, cultivando dichos organismos en un medio que comprende DHA. Aunque se han desarrollado algunos protocolos para enriquecer Artemia en varios compuestos, al ser un organismo que no se cultiva presenta muy poca plasticidad para modificar su composición nutricional o servir de vector para compuestos importantes en el cultivo de larvas de peces. Los nematodos, en contraste, sí son cultivables y además contienen de forma natural altas concentraciones de ArA y EPA, aunque no de DHA, por 10 que son buenos candidatos para su uso en acuicultura.

Una vez superado el estadio larvario, en el proceso de engorde, la alimentación de los organismos de interés en acuicultura se realiza mediante piensos basados en harinas de pescado que provienen de la actividad pesquera, por 10 que la actividad de la acuicultura no es sostenible desde el punto de vista medioambiental, ya que finalmente se basa en la pesca extractiva. El principal problema para desarrollar piensos provenientes de otras fuentes es la necesidad que tienen los peces de alimentarse con dietas ricas en PUF As, los cuales son producidos principalmente por organismos marinos como algas, fitoplancton y otros microorganismos, que aunque se puedan cultivar, son dificiles de incorporar a la dieta de la mayoría de los peces de interés en acuicultura, ya que éstos son carnívoros.

Se han descrito en el estado de la técnica métodos para enriquecer nematodos con ácidos grasos, por ejemplo en el documento W003001909, en donde se describe un proceso para preservar y almacenar nematodos que presentan un valor alimentario aumentado para su uso en acuicultura. En concreto, los nematodos se enriquecen añadiendo a liposomas, entre otros aditivos, DHA. El inconveniente que presenta el uso de liposomas que incluyen DHA para enriquecer nematodos reside en que los liposomas tienen que presentar un tamaño adecuado para que puedan ser ingeridos por el nematodo y resulta un procedimiento complicado y caro de poner en práctica. Asimismo, la cantidad de DHA que se tiene que incluir en elliposoma debe ser bastante alta para que el nematodo incorpore una cantidad suficiente que posteriormente pueda ser utilizada para la alimentación de peces.

Asimismo, se han desarrollado otros métodos para enriquecer organismos con DHA, tal como algas, hongos y plantas y se han incluido como alimentos para peces (W004080196) . También se han generado bacterias recombinantes para la producción de DHA, clonando un gen de Moritella marina en E. coli (Orikasa, Y et al. Biotechnol. Lett. 28: 1841-47) .

A pesar de que se han descrito en el estado de la técnica nematodos enriquecidos con ácidos grasos poli-insaturados, en concreto con DHA, existe la necesidad de encontrar un método sencillo de obtener nematodos enriquecidos con ácidos grasos poliinsaturados que no provengan de la pesca extractiva, que presente un alto rendimiento y en donde los nematodos sirvan como alimento en acuicultura, tanto para animales adultos como para animales en estadio larval.

COMPENDIO DE LA INVENCIÓN

Los autores de la presente invención han observado que los nematodos alimentados con bacterias productoras de al menos un ácido graso, en concreto de un ácido graso poliinsaturado, son capaces de incorporar dichos ácido graso. De esta manera, han obtenido nematodos enriquecidos con ácidos grasos, útiles por ejemplo en acuicultura.

Así, en un primer aspecto, la invención se relaciona con un método para obtener un nematodo enriquecido con al menos un ácido graso que comprende cultivar dicho nematodo con una bacteria productora de dicho ácido graso.

En un segundo... [Seguir leyendo]

l. Un método para obtener un nematodo enriquecido con al menos un ácido graso que comprende cultivar dicho nematodo con una bacteria productora de dicho ácido graso.

2. Método según la reivindicación 1, en donde el ácido graso es un ácido graso poli -insaturado.

3. Método según la reivindicación 1, en donde el ácido graso se selecciona del grupo de ácido mirístico (C14:1) , ácido docosahexanoico (C22:6m3, DHA) , ácido eicosapentaenoico (C20:5m3, EPA) , ácido palmítico (C16:0) , ácido oleico (C 18: 1 m9) , áci do linol ei co (C 18: 2m6) , ácido dihomo-gama-linolénico (C20:3m6, DGLA) y ácido araquidónico (C20:4m6) .

4. Método según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3 en donde la bacteria productora de dicho ácido graso es una bacteria marina.

5. Método según la reivindicación 4 en donde la bacteria marina es una bacteria seleccionada entre los géneros Moritella, Shewanella, Photobacterium, Pseudoalteromonas y Colwellia.

6. Método según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 3 en donde la bacteria productora de dicho ácido graso es una bacteria recombinante que produce dicho ácido graso.

7. Método según cualquiera de las reivindicaciones 1 a 6, en donde el nematodo se selecciona entre Caenorhabditis elegans y Panagrellus redivivus.

8. Un método de alimentación de un animal seleccionado del grupo formado por un pez, un molusco y un crustáceo, que comprende alimentar dicho animal con un nematodo enriquecido con al menos un ácido graso.

9. Método según la reivindicación 8, en donde el ácido graso es un ácido graso poli -insaturado.

10. Método según la reivindicación 9, en donde el ácido graso se selecciona del grupo de ácido mirístico (C14:1) , ácido docosahexanoico (C22:6m3, DHA) , ácido eicosapentaenoico (C20:5m3, EPA) , ácido palmítico (C16:0) , ácido oleico (C 18: 1 m9) , áci do linol ei co (C 18: 2m6) , ácido dihomo-gama-linolénico (C20:3m6, DGLA) y ácido araquidónico (C20:4m6) .

11. Método según cualquiera de las reivindicaciones 8 a 10 en donde el nematodo enriquecido con al menos un ácido graso se ha obtenido mediante el cultivo de dicho nematodo con una bacteria productora de dicho ácido graso.

12. Método según la reivindicación 11, en donde la bacteria productora de dicho 5 ácido graso es una bacteria marina.

13. Método según la reivindicación 12, en donde la bacteria marina es una bacteria seleccionada entre los géneros Moritella, Shewanella, Photobacterium, Pseudoalteromonas y Colwellia.

14. Método según la reivindicación 11, en donde la bacteria productora de al menos 10 un ácido graso es una bacteria recombinante que produce dicho ácido graso.

15. Método según cualquiera de las reivindicaciones 8 a 14, en donde el nematodo se selecciona entre Caenorhabditis elegans y Panagrellus redivivus.

16. Método según cualquiera de las reivindicaciones 8 a 15, en donde el animal se encuentra en un estadio larval de su desarrollo.

17. Método según cualquiera de las reivindicaciones 8 a 15, en donde el animal es un animal adulto.