Calicivirus felino hemorrágico, vacuna contra calicivirus y procedimiento para prevenir la infección o enfermedad por calicivirus.

Un calicivirus felino hemorrágico aislado y purificado FCV-DD1 que tiene una denominación de depósito depatente ATCC PTA-6204 o un clon viral derivado del mismo.

Calicivirus felino hemorrágico, vacuna contra calicivirus y procedimiento para prevenir la infección o enfermedad por calicivirus Remisión a solicitudes de Estados Unidos relacionadas La presente solicitud no provisional reivindica el beneficio en virtud de 35 U.S.C. § 119 (e) de la solicitud provisional de Estados Unidos Nº 60/609.480, presentada el 13 de septiembre de 2004.

Antecedentes de la invención Campo de la invención La presente invención se refiere a una nueva cepa aislada y purificada de calicivirus felino hemorrágico virulento, vacunas producidas a partir de la misma y el uso de las vacunas para proteger a los gatos de la infección o enfermedad por calicivirus.

Descripción de la técnica relacionada El calicivirus felino (FCV) a menudo causa una crisis aguda en entornos con muchos gatos, particularmente hospitales de animales y, a un menor grado, refugios de animales. Típicamente, la infección por FCV presenta signos que se parecen a la rinotraqueítis vírica (FVR) afectando al tracto respiratorio superior y, en ocasiones, produciendo dolor en las articulaciones y cojera. Adicionalmente, el gato infectado desarrollará úlceras en la lengua y en la región de la boca. Parecen ser frecuentes vesículas y erosiones de los conductos nasales, el paladar duro y la lengua. Otros síntomas de la enfermedad por FCV incluyen fiebre alta, pérdida de pelo, ulceraciones cutáneas y edema (hinchamiento) en las patas y alrededor de la cara. Dependiendo de la virulencia de la cepa infectante, la infección por FCV puede llegar a ser letal. El modo principal de transmisión de la infección es a través de la vía oral, pero los gatos también pueden infectarse por inhalación de un virus infeccioso encontrado en la saliva, las heces o la orina de gatos infectados.

La infección por FCV puede afectar tanto a gatos domésticos como a algunas especies felinas salvajes. Como el FVR y el FCV comprenden casi el 90% de todas las infecciones respiratorias en felinos, la disponibilidad de vacunas eficaces para evitar estas dos enfermedades es de gran transcendencia. El FCV es un virus ARN monocatenario capaz de mutar en nuevas cepas (J. N. Burroughs y col., "Physio-chemical evidence for the re-classification of the caliciviruses, " Journal Gen. Virol. 22:281-286 (1974) ) . Existen más de sesenta y cinco calicivirus felinos en todo el mundo, lo que hace que la protección adecuada por vacunación usando una vacuna de un único componente sea en gran medida incompleta y difícil. Como el virus es capaz de mutar, las vacunas monovalentes basadas en una única cepa de FCV pueden no ser suficientemente protectoras contra otras cepas de FCV (véase, en líneas generales, N.

C. Pedersen y col., "Mechanisms for persistence of acute and chronic feline calicivirus infections in the face of vaccination, " Veterinar y Microbiol. 47 (1-2) :141-156 (noviembre 1995) ; A. Lauritzen y col., "Serological analysis of feline calicivirus isolates from the United States and United Kingdom, " Veterinar y Microbiol. 56 (1-2) :55-63 (mayo 1997) ; T. Hohdatsu y col., "neutralizing feature of commercially available feline calicivirus (FCV) vaccine immune sera against FCV field isolates, " Journal of Veterinar y Medicine Sci., 61 (3) :299-301 (marzo. 1999) ; A. D. Radford y col., "Comparison of serological and sequence-based methods for typing feline calicivirus isolates from vaccine failures, " Vet. Rec. 146 (5) :117-123 (29 de enero de 2000) ) .

Otro problema con el FCV es que el virus es altamente contagioso, los gatos infectados seguirán propagando el virus durante largos periodos de tiempo después de la infección y los gatos recuperados pueden seguir siendo portadores del virus infeccioso durante toda la vida. Los gatos asintomáticos pueden incluso propagar la enfermedad letal a otros gatos sanos. Se ha informado de brotes recientes en el Norte de California y Nueva Inglaterra de dos cepas genéticamente diversas de calicivirus hemorrágico altamente virulento que eran particularmente letales para la población felina en refugios de animales, llamadas FCV-Ari y FCV-Diva, respectivamente (N. C. Pedersen y col., "An isolated epizootic of hemorrhagic-like fever in cats caused by a novel and highly virulent strain of feline calicivirus, " Veterinar y Microbiol. 73:281-300 (mayo 2000) ; E. M. Schorr-Evans y col., An epizootic of highly virulent feline calicivirus disease in a hospital setting in New England, " Journal of Feline Medicine and Surger y 5:217-226 (2003) ) .

En el pasado, se han descrito vacunas virales monovalentes y se han fabricado varias para prevenir enfermedades felinas usando una diversidad de antígenos tales como la cepa F9 de calicivirus felino (patente de Estados Unidos Nº 3.944.469 (J. L. Bittle y col.) ) , Chlamydia psittaci felina (patentes de Estados Unidos Nº 5.972.350 y Nº 5.242.686 (H. J. Chu y col.) ) , el virus de la leucemia felina (patente de Estados Unidos Nº 4.264.587 (N. C. Pedersen y col.) ) y similares. También se ha aislado y descrito previamente otras cepas de calicivirus tales como la FCV-M8 y FCV-255 y el virus de la rinotraqueítis felina para su uso en vacunas (E. V. Davis y col., "Studies on the safety and efficacy of an intranasal feline rhinotracheitis-calici virus vaccine, " VM-SAC 71:1405-1410 (1976) ; D. E. Kahn y col., "Induction of immunity to feline caliciviral disease, " Infect. Immun. 11:1003-1009 (1975) ; D. E. Kahn, "Feline viruses: pathogenesis of picornavirus infection in the cat, " Am. J. Vet. Research 32:521-531 (1971) ) . Además, la patente de Estados Unidos Nº 4.522.810 (N. C. Pedersen) describe una vacuna contra calicivirus felino que contiene la cepa FCV-2280. La patente de Estados Unidos Nº 6.231.863 (D. Colau y col.) describe secuencias de nucleótidos a partir del genoma de la cepa FCV-2280 y vacunas que usan las secuencias de nucleótidos del gen de la cápsida para prevenir la enfermedad por calicivirus felino. La patente de Estados Unidos Nº 5.106.619 (G. P. Wiesehahn y col.) describe la preparación de vacunas virales inactivadas que incluyen calicivirus felino entre otros. La patente de Estados Unidos Nº 6.051.239 (L. Simpson y col.) describe vacunas orales que usan una toxina botulínica modificada junto con antígenos tales como el calicivirus.

Más recientemente, se identificó una cepa de FCV-Kaos (K. F. Hurley y col., "An Outbreak of virulent systemic feline calicivirus disease, J. Am. Vet. Med. Assoc. 224 (2) :241-249 (15 de enero de 2004) ) y, posteriormente, se aislaron tanto la cepa FCV-Kaos como la FCV-Ari (solicitud de patente de Estados Unidos Nº 20040180064 A1, Hemorrhagic feline calicivirus, pub. 16 de septiembre de 2004) . Las cepas de calicivirus sistémico virulento aisladas (VS-FCV) , incluyendo FCV-Kaos, FCV-Ari y FCV-Bellingham, se han descrito comprendiendo una proteína de cápsida que incluye un resto aminoacídico seleccionado entre el grupo compuesto por lisina (k) en la posición del aminoácido 448; ácido glutámico (E) en la posición del aminoácido 452; lisina (K) en la posición del aminoácido 581; y ácido apartico (D) en la posición del aminoácido 581 (solicitud de patente de Estados Unidos Nº 20040259225 A1, Virulent systemic feline calicivirus, pub. 23 de diciembre de 2004) .

Se han preparado o descrito vacunas multivalentes que contienen mezclas de muchos antígenos víricos tales como Chlamydophila felis (anteriormente conocida como Chlamydia psittaci felina) en combinación con uno o más patógenos que comprenden el virus de la leucemia felina, el virus de la panleucopenia felina, el calicivirus felino, el virus de la rinotraqueítis felina, el virus de la inmunodeficiencia felina adquirida, el virus de la rabia, el virus de la peritonitis infecciosa felina, Borrelia burgdorferi y similares (patente de Estados Unidos Nº 6.004.563 (H. J. Chu y col.) ) . Otra mezcla del virus de la leucemia felina del aislado Rickard, el virus de la rinotraqueítis felina, el calicivirus felino y el virus de la panleucemia felina se ha descrito de forma similar como una vacuna (patente de Estados Unidos Nº 5.374.424 (W. H. Kelsey y col.) ) .

Desafortunadamente, ninguna de las vacunas anteriores que contienen cepas usadas previamente del calicivirus felino protege adecuadamente al felino contra la aparición de cepas hemorrágicas del calicivirus felino. En los recientes brotes de calicivirus felino hemorrágico, hubo una cantidad significativa de muertes a pesar del hecho de que los gatos habían recibido vacunaciones contra el calicivirus.

Como consecuencia, existe una necesidad definitiva reconocida en la técnica en el campo de la veterinaria de producir una vacuna eficaz y segura contra infecciones del calicivirus felino hemorrágico... [Seguir leyendo]

1. Un calicivirus felino hemorrágico aislado y purificado FCV-DD1 que tiene una denominación de depósito de patente ATCC PTA-6204 o un clon viral derivado del mismo.

2. Una vacuna que comprende una cantidad inmunológicamente eficaz del calicivirus felino de acuerdo con la reivindicación 1, y un vehículo o diluyente no tóxico, fisiológicamente aceptable, y que opcionalmente comprende además uno o más calicivirus felinos adicionales.

3. La vacuna de acuerdo con la reivindicación 2, en la que el calicivirus felino adicional se selecciona entre el grupo que consiste en FCV-255, FCV-2280, FCV-Diva, FCV-Kaos, FCV-Bellingham, FCV-F9, FCV-F4, FCV-M8 y una combinación de los mismos.

4. La vacuna de acuerdo con la reivindicación 3, en la que el calicivirus felino adicional comprende FCV-255, FCV2280 o la combinación de FCV-255 y FCV-2280.

5. La vacuna de acuerdo con la reivindicación 4, en la que el calicivirus felino adicional comprende FCV-255.

6. La vacuna de acuerdo con la reivindicación 4, que comprende además un antígeno seleccionado entre el grupo que consiste en Chlamydophila felis, el virus de la leucemia felina, el virus de la panleucopenia felina, el virus de la rinotraqueítis felina, el virus de la inmunodeficiencia felina, el virus de la rabia, el virus de la peritonitis infecciosa felina, Bartonella y una combinación de los mismos.

7. La vacuna de acuerdo con la reivindicación 6, en la que el antígeno comprende la combinación de Chlamydophila felis, el virus de la leucemia felina, el virus de la panleucopenia felina y el virus de la rinotraqueítis felina.

8. La vacuna de acuerdo con la reivindicación 6, en la que el antígeno comprende la combinación de Chlamydophila felis, el virus de la panleucopenia felina y el virus de la rinotraqueítis felina.

9. La vacuna de acuerdo con la reivindicación 6, en la que el antígeno comprende la combinación del virus de la panleucopenia felina y el virus de la rinotraqueítis felina.

10. La vacuna de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 2-9, que comprende además un adyuvante seleccionado entre el grupo que consiste en fosfato de aluminio, hidróxido de aluminio, un tensioactivo, un polianión, un policatión, un detergente, un péptido, un aceite animal o vegetal metabolizable, un aceite mineral, una emulsión de aceite mineral, un inmunomodulador, un copolímero de bloque de polioxietileno-polioxipropileno, un copolímero de estireno con una mezcla de ácido acrílico y ácido metacrílico, un adyuvante derivado de corinebacterias, un adyuvante derivado de propionibacterias, Mycobacterium bovis (bacilo de Calmette-Guerin) , una interleuquina, un interferón, un liposoma, un adyuvante iscom, un extracto de pared celular micobacteriana, un glucopéptido sintético, avridina, Lípido A, sulfato de dextrano, DEAE-dextrano, carboxipolimetileno, copolímero de etileno/anhídrido maleico, una emulsión de copolímero acrílico, una proteína de poxvirus animal, un adyuvante de partícula subviral, toxina colérica, bromuro de dimetildioctadecilamonio y una combinación de los mismos.

11. La vacuna de acuerdo con la reivindicación 10, en la que el adyuvante es un copolímero de etileno/anhídrido maleico, un copolímero de estireno con una mezcla de ácido acrílico y ácido metacrílico, una emulsión de aceite mineral o la combinación de los mismos.

12. La vacuna de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 2-11, en la que el vehículo o diluyente no tóxico, fisiológicamente aceptable comprende solución salina o medio esencial mínimo de Eagle.

13. La vacuna de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 2-12, que comprende además un conservante seleccionado entre el grupo que consiste en timerosal, neomicina, polimixina B, anfotericina B y una combinación de los mismos.

14. Uso de una cantidad inmunológicamente eficaz de la vacuna de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 2-13 en la fabricación de un medicamento para proteger a un felino contra una infección o para prevenir una enfermedad causada por calicivirus felino, Chlamydophila felis, el virus de la leucemia felina, el virus de la panleucopenia felina, el virus de la rinotraqueítis felina, el virus de la inmunodeficiencia felina, el virus de la rabia, el virus de la peritonitis infecciosa felina, Bartonella o una combinación de los mismos.

15. El uso de acuerdo con la reivindicación 14, en el que la vacuna se administra por vía parenteral, oral, intranasal, oronasal o transdérmica al felino.