PROCESO PARA PREPARAR COMPUESTOS BETA-LACTÁMICOS.

La presente invención se refiere a un proceso para preparar compuestos ß-lactámicos semisintéticos mediante acilación enzimática de la amino-ß-lactama de partida con un agente acilante. La producción enzimática de antibióticos ß-lactámicos semisintéticos mediante acilación del resto de amino-ßlactama de partida con un derivado de ácido de cadena lateral, tal como una amida o un éster, se ha descrito en numerosas ocasiones en la bibliografía de patentes, por ejemplo, EP-A-339751, EP-A-473008, WO92/01061, WO93/12250, WO96/02663, WO96/05318, WO96/23796, WO97/04086, WO98/56946, WO99/20786, WO2005/00367, WO2006/069984, US 3.816.253 y los documentos de patentes alemanas 2163792 y 2621618. En la mayoría de los casos, las enzimas utilizadas en la técnica son penicilina acilasas obtenidas a partir de Escherichia coli y se inmovilizan sobre varios tipos de materiales insolubles en agua (por ejemplo, WO97/04086). La desventaja principal de los procesos anteriores de la técnica es que los ésteres de cadena lateral se deben aislar en forma sólida para poder purificar dichos ésteres de cadena lateral, por ejemplo, para reducir la cantidad de cadena lateral libre en el éster. Se ha descubierto que, en el caso particular de las cadenas laterales más hidrofóbicas, tales como la D-fenilglicina y la D-dihidrofenilglicina, la presencia de cadena lateral libre en la reacción enzimática de acoplamiento posterior tiene un efecto muy negativo en el rendimiento de la reacción enzimática de acoplamiento. Esto se atribuye al hecho de que, debido a la escasa solubilidad de las cadenas laterales libres en las condiciones de la reacción enzimática de acoplamiento, existe un límite superior de la concentración de cadena lateral libre en la reacción enzimática de acoplamiento. Este límite viene determinado por la condición de que la cadena lateral libre no debe cristalizar ni precipitar, ya que el precipitado afecta negativamente a la procesabilidad de la reacción enzimática de acoplamiento. Además, en los pasos finales del procesado posterior del compuesto ßlactámico semisintético, se debe eliminar la cadena lateral libre contaminante, por ejemplo, con las aguas madres de un paso de cristalización final del compuesto ß-lactámico semisintético. Cuanto más elevados sean los niveles de cadena lateral libre, mayor será la cantidad de aguas madres necesaria para eliminar la cadena lateral libre, la cual, a su vez, es responsable de pérdidas mayores del compuesto ß-lactámico semisintético. La operación de la unidad que lleva a cabo el aislamiento del éster de cadena lateral en forma sólida complica el proceso de producción del antibiótico semisintético y contribuye significativamente al precio de coste de este. Por lo tanto, se necesita urgentemente un proceso de producción en el cual el éster de cadena lateral formado durante la reacción de esterificación se pueda utilizar en la reacción enzimática de acoplamiento posterior sin necesidad de aislarlo en forma sólida. En los Ejemplos 1, 3 y 4 del documento WO98/04732 se describe la síntesis de Cefprozilo, Cefadroxilo y Amoxicilina a partir de 7-PACA, 7-ADCA y 6-APA, respectivamente, con el 2-hidroxiéster de la D-4-hidroxifenilglicina, donde, tras la síntesis del éster, este se añade directamente a la reacción enzimática de acoplamiento posterior siendo aislado en forma sólida. La D-4-hidroxifenilglicina es muy soluble en las condiciones de la reacción enzimática de acoplamiento y, por lo tanto, no genera los problemas que se dan en el caso de la D-fenilglicina y la Ddihidrofenilglicina durante la reacción enzimática de acoplamiento. Para evitar que precipiten, estas deben estar presentes solamente en concentraciones muy bajas debido a su escasa solubilidad. Un objetivo de la presente invención es proporcionar un proceso de producción de derivados ß-lactámicos de la Dfenilglicina y la D-dihidrofenilglicina, tales como Ampicilina, Cefalexina, Cefaclor y Cefradina, donde la síntesis del éster de cadena lateral se caracteriza por tener un rendimiento elevado y el éster de cadena lateral resultante contiene solamente una concentración pequeña de cadenas laterales libres y donde se omite el aislamiento del éster de cadena lateral en forma sólida para purificar dicho éster de cadena lateral. En la presente, se define el núcleo como el resto ß-lactámico de la ß-lactama semisintética y puede ser cualquier penem o cefem, por ejemplo, ácido 6-aminopenicilánico (6-APA), ácido 7-aminodesacetoxicefalosporánico (7- ADCA), ácido 7-aminocefalosporánico (7-ACA) o 7-amino-3-cloro-3-cefem-4-carboxilato (7-ACCA). En la presente, se define la cadena lateral como el resto del compuesto ß-lactámico semisintético que está unido a la posición 6-amino o 7-amino del núcleo como se ha definido en la presente, por ejemplo, la D-fenilglicina en Ampicilina, Cefalexina, Cefaclor o la D-dihidrofenilglicina en Cefradina. La cadena lateral libre es la forma no derivatizada de la cadena lateral, por ejemplo, la D-fenilglicina o la Ddihidrofenilglicina. El éster de cadena lateral es la forma de tipo éster de la cadena lateral libre, donde el grupo carboxilo de la cadena lateral libre está esterificado con un alcohol, por ejemplo, el éster metílico de la D-fenilglicina o el éster metílico de la D-dihidrofenilglicina. El éster de cadena lateral puede estar en forma de base libre o como una sal, por ejemplo 2 como la sal de HCl, y el éster de cadena lateral puede estar en forma sólida o disuelto en un disolvente adecuado. En la presente, se define proporción como: [cantidad de éster de cadena lateral] [cantidad de éster de cadena lateral] + [cantidad de cadena lateral libre] donde las cantidades se expresan en moles. ES 2 365 831 T3 En un aspecto, la invención proporciona un proceso para sintetizar un compuesto ß-lactámico semisintético a partir de un núcleo y una cadena lateral seleccionada del grupo que consiste en D-fenilglicina y D-dihidrofenilglicina en forma de un éster de cadena lateral y una enzima que cataliza el acoplamiento entre el éster de cadena lateral y el núcleo, que se caracteriza por que el proceso comprende la formación del éster de cadena lateral de la cadena lateral, donde dicho éster de cadena lateral no se aísla como un intermedio sólido. El proceso puede comprender, por ejemplo, los pasos siguientes: a) convertir una cadena lateral libre seleccionada del grupo que consiste en D-fenilglicina y D-dihidrofenilglicina, por reacción con un alcohol, para formar una mezcla que comprende el éster de cadena lateral correspondiente; la formación del éster de cadena lateral en este paso preferentemente proporciona una mezcla con una conversión que se expresa mediante la proporción como se ha definido anteriormente en la presente y donde la proporción es preferentemente 85%, más preferentemente 90%, más preferentemente 95%, más preferentemente 96%, más preferentemente 97%, más preferentemente 98%, aún más preferentemente 99%; b) formar el compuesto ß-lactámico semisintético mezclando la mezcla obtenida en el paso (a) con un núcleo y la enzima para formar el compuesto ß-lactámico semisintético, con la condición de que el éster de cadena lateral formado en el paso (a) no se aísle como un intermedio sólido. El núcleo utilizado en el proceso de la presente invención y como se ha definido en la presente anteriormente, se puede seleccionar del grupo que consiste en ácido 6-aminopenicilánico (6-APA), ácido 7aminodesacetoxicefalosporánico (7-ADCA), ácido 7-aminocefalosporánico (7-ACA) y 7-amino-3-cloro-3-cefem-4carboxilato (7-ACCA), de manera que proporcione penicilinas semisintéticas (derivadas de 6-APA) y cefalosporinas semisintéticas (derivadas de 7-ADCA, 7-ACA y 7-ACCA), respectivamente. Una realización preferida de la presente invención es el proceso para preparar un compuesto ß-lactámico semisintético seleccionado del grupo que consiste en Ampicilina, Cefalexina, Cefradina y Cefaclor. En el paso de conversión (paso (a)) del proceso de la invención, se convierte una cadena lateral libre seleccionada del grupo que consiste en D-fenilglicina y D-dihidrofenilglicina, por reacción con un alcohol, para formar una mezcla que comprende el éster de cadena lateral correspondiente. El alcohol utilizado en el proceso de la invención se puede seleccionar del grupo que consiste en metanol y etanol, y de esta manera se forman el éster metílico y el éster etílico de la cadena lateral, respectivamente. El alcohol más preferido es el metanol. El paso (a) se puede llevar a cabo de diferentes maneras. Una realización del paso de conversión (a) comprende calentar una mezcla que comprende una cadena lateral libre seleccionada del grupo que consiste en D-fenilglicina y D-dihidrofenilglicina, un alcohol seleccionado en función del éster que se desea formar, por ejemplo metanol... [Seguir leyendo]

1. Un proceso para sintetizar un compuesto ß-lactámico semisintético a partir del resto ß-lactámico del compuesto ß-lactámico semisintético y una cadena lateral seleccionada del grupo que consiste en D-fenilglicina y Ddihidrofenilglicina en forma de un éster de cadena lateral y una enzima que cataliza el acoplamiento del éster de cadena lateral con el resto ß-lactámico del compuesto ß-lactámico semisintético, que se caracteriza por que el proceso comprende la formación del éster de cadena lateral donde dicho éster de cadena lateral no se aísla como un intermedio sólido. 2. Un proceso de acuerdo con la reivindicación anterior, que comprende los pasos de: a) convertir la forma no derivatizada de la cadena lateral seleccionada del grupo que consiste en D-fenilglicina y D-dihidrofenilglicina, por reacción con un alcohol, para formar una mezcla que comprende el éster de cadena lateral correspondiente; b) formar el compuesto ß-lactámico semisintético mezclando la mezcla obtenida en el paso (a) con un resto ßlactámico del compuesto ß-lactámico semisintético y la enzima para formar el compuesto ß-lactámico semisintético, con la condición de que el éster de cadena lateral formado en el paso (a) no se aísle como un intermedio sólido. 3. Un proceso de acuerdo con la reivindicación 2, donde la mezcla obtenida en el paso (a) se purifica antes de formar el compuesto ß-lactámico semisintético en el paso (b). 4. Un proceso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, donde el resto ß-lactámico del compuesto ß-lactámico semisintético se selecciona del grupo que consiste en ácido 6-aminopenicilánico (6-APA), ácido 7-aminodesacetoxicefalosporánico (7-ADCA), ácido 7-aminocefalosporánico (7-ACA) y 7-amino-3-cloro-3cefem-4-carboxilato (7-ACCA). 5. Un proceso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, donde el compuesto ß-lactámico semisintético se selecciona del grupo que consiste en Ampicilina, Cefalexina, Cefradina y Cefaclor. 6. Un proceso de acuerdo con la reivindicación 2, donde el alcohol es metanol o etanol, preferentemente metanol. 7. Un proceso de acuerdo con cualquiera de las reivindicaciones anteriores, donde la enzima es una penicilina G acilasa, preferentemente en una forma inmovilizada. 8. Un proceso de acuerdo con la reivindicación 7, donde la penicilina G acilasa es de Escherichia coli. 11 ES 2 365 831 T3 12