Un método para identificar un animal que tiene enfermedad renal temprana o riesgo de desarrollar la enfermedad renal en fase final,

dicho método comprendiendo la determinación de la cantidad de albúmina en una muestra de orina obtenida del animal, donde una cantidad de albúmina en un rango desde unos 10 μg/ml a unos 300 μg/ml en la muestra de orina, cuando el peso especifica de la muestra es normalizado a 1.010 g/ml, es indicativa de un animal que tiene la enfermedad renal temprana o esta en riesgo de enfermedad renal en su fase final, donde el animal es seleccionado del grupo que consiste de cánidos, félidos y équidos

Métodos de detección de enfermedades renales tempranas en animales.

Campo de la invención

La presente invención se refiere a la detección de la enfermedad renal temprana en animales, y más particularmente a la utilización de la microalbuminuria como marcador de la enfermedad renal temprana.

Antecedentes de la invención

La enfermedad glomerular es un término amplio utilizado para describir un número de enfermedades renales que puedan conducir a insuficiencia renal y la muerte. El daño al glomérulo incrementa la permeabilidad capilar a proteínas tales como la albúmina, que resultan en la presencia de proteínas en la orina (referido como proteinuria).

En humanos, la proteinuria puede resultar de un número de enfermedades, incluyendo diabetes, hipertensión y nefropatía por IgA. La prueba convencional de proteinuria en seres humanos es utilizar un análisis de la proteína de tira reactiva normal como se describe, por ejemplo, en Bakris, Curr. Opin. en Neph. y Hipertensión, 5:219-223 (1996). Las tiras reactivas que son químicamente impregnadas con ácido sulfosalicilico para medir proteínas en una muestra están disponibles comercialmente, por ejemplo de Boehringer-Mannheim, Germany (Chemstrips^TM) y Ames Co., USA (Albustix^TM). Un inconveniente de estos ensayos de tiras reactivas es que requieren una cantidad significativa de proteína en la orina para ser detectada. Cantidades de proteínas en seres humanos de menos de 300 miligramos por día no son detectables por el análisis de tira reactiva, sin embargo, la proteinuria puede estar aun presente. Otro inconveniente de estos ensayos a base de proteínas es que son incapaces de discriminar entre diferentes tipos de proteínas (ej., albúmina, globulina, etc.) que pueden estar presentes en la orina. La proteinuria puede resultar de la fuga de proteínas séricas en filtrado glomerular debido a glomerulernefritis; sin embargo, la proteinuria puede también estar presente debido a problemas no relacionados con enfermedad renal tales como infecciones de la vejiga o una dieta alta en proteínas.

Cantidades mas bajas de albúmina en la orina, a lo que se hace referencia como "microalbuminuria", indican un nivel de albúmina que es mayor que en los pacientes normales, pero menor que en los pacientes con proteinuria franca, i.e., clínicamente proteinuricos. En seres humanos, microalbuminuria se refiere a cantidades de albúmina entre 30 miligramos por día y 300 miligramos por día según Watts, Clin. Chem., 32(8):1544-1548 (1986). Los métodos para detectar microalbuminuria humana son conocidos e incluyen métodos que utilizan un anticuerpo de albúmina anti-humano para detectar cantidades de albúmina humana que no son detectables por métodos conocidos de tiras reactivas. Tales métodos para la detección de microalbuminuria humana son descritos, por ejemplo, en la Patente U.S. No. 5,246,835, publicado el 21 de septiembre de 1993 a Suzuki et al.

Aunque la microalbuminuria puede ser detectada en humanos, la utilidad de detectar microalbuminuria en humanos puede ser muy limitada, al menos según algunos informes. Por ejemplo, utilizar las pruebas de microalbuminuria para predecir la enfermedad renal solo ha sido recomendado para los seres humanos con diabetes según Bakris, supra. Dado que los trastornos distintos de la diabetes, como la hipertensión, enfermedad cardíaca y la neuropatía IgA no dan lugar a la microalbuminuria consistente en seres humanos, según Bakris, supra, la detección de microalbuminuria tiene un valor predictivo pobre para la enfermedad renal mas avanzada asociada con estos estados de trastornos no diabéticos. En consecuencia, usar pruebas de microalbuminuria para detectar el potencial o la enfermedad renal temprana en pacientes humanos no diabéticos es generalmente no recomendado por Bakris, supra.

La enfermedad renal es también un problema de salud significativa en animales de compañía, en particular perros y gatos. En perros, la causa primaria de la enfermedad renal es el daño a los glomérulos del riñón. Aunque el daño glomerular en perros puede ocurrir en cualquier numero de formas, es mas comúnmente causado cuando complejos inmunes circulantes (i.e., anticuerpos/complejos antígeno) son depositados en los capilares glomerular como consecuencia de una enfermedad sistemática como se describe en Batamuzi, et al., Vet Record, 143; 16-20 (1988). Varias enfermedades han sido implicadas en la patogénesis de la formación e complejos inmunes, que incluyen por ejemplo, dirofilariosis y otras infecciones parasitarias, diabetes, hipotiroidismo y otros.

La enfermedad renal temprana en la medicina veterinaria ha sido caracterizado por cambios glomerulares detectable por histopatología, que incluyen el uso de microcopia de luz o en ocasiones inmunofluorescencia como se reporta en Vaden, Proc. 17th ACVIM, 420 (1999). Sin embargo, según se informa en ese documento, estas técnicas pueden conducir a errores de diagnostico de la causa de la enfermedad renal. La determinación de la causa de la enfermedad renal es útil en la formulación de un régimen de tratamiento adecuado. Por ejemplo, si la causa de la enfermedad renal es inmune mediada, entonces la terapia inmunosupresora puede ser adecuada. Sin embargo, ensayos disponibles actualmente para detectar la microalbuminuria humana no son lo suficientemente sensibles para detectar la microalbuminuria canina.

WO 00/37944 describe un método para la detección y tratamiento de la enfermedad renal.

EP 0 198 639 se refiere a un método para la determinación de la albúmina.

Así, existe la necesidad de ensayos para detectar la enfermedad renal temprana en animales de compañía. La presente invención satisface esta necesidad y proporciona ventajas relacionadas.

Resumen de la invención

La presente invención se refiere a un método para la detección de la enfermedad renal temprana en cánidos, felinos y equinos. Los animales preferidos para la prueba de la enfermedad renal temprana son los perros, gatos y caballos. Realizaciones de método descritas en este documento están basadas en el descubrimiento de que la presencia de albúmina en una muestra de una animal, en el rango de 10 μg/ml a 300 μg/ml puede ser usada como un indicador de la enfermedad renal temprana. La muestra a probar es una muestra de orina.

Cualquier ensayo capaz de detectar albúmina puede ser utilizada en el método instantáneo aunque métodos preferidos emplean ensayos basados inmunologicamente, preferiblemente ensayos de un solo paso. El ensayo de mayor preferencia es un ensayo basado inmunologicamente que utiliza un anticuerpo anti-albúmina.

Cualquier anticuerpo que se una a la albúmina del animal experimentado puede ser utilizado; anticuerpos preferidos se unen a la albúmina canina y/o albúmina felina y/o albúmina equina. Anticuerpos preferidos son TNB1, TNB3, TNB4, TNB5, TNB6, H352, H386, H387, H388, H389, H390, H391, H393, H394, H395, H396, H397, H398, H399, H400, H401, y H402. Células cultivadas producen anticuerpos adecuados para la práctica de la siguiente invención.

Descripción detallada de la invención

La presente invención generalmente se refiere a un método nuevo en la detección de la enfermedad renal temprana en cánidos, felinos y equinos y para el uso en el de nuevos anticuerpos que selectivamente se unen a la albúmina de uno o más especies de animales. Mas particularmente, la presente invención se refiere al descubrimiento de que la presencia de microalbuminuria puede ser usada para predecir la enfermedad renal temprana en cánidos, felinos y equinos, particularmente las enfermedades renales autoinmunes. Por lo tanto, los métodos pueden también ser útiles para la prescripción de un tratamiento para un animal. Un tratamiento adecuado puede ser diseñado para retrasar o prevenir la aparición de la última etapa de la enfermedad renal. Ejemplos de tal tratamiento incluyen, por ejemplo, modificación farmacológica o de la dieta. La presente invención es también útil en el monitoreo de la efectividad de un tratamiento prescrito. La invención proporciona un método según la reivindicación 1. Una cantidad de albúmina en un rango de unos 10 μg/ml a unos 300 μg/ml en la muestra es indicativa de la enfermedad renal temprana.

Debe notarse que el término "una" entidad se refiere a uno o mas de esa entidad. Por ejemplo, una proteína se refiere a una o mas proteínas o al menos una proteína. Como tal, los términos... [Seguir leyendo]

1. Un método para identificar un animal que tiene enfermedad renal temprana o riesgo de desarrollar la enfermedad renal en fase final, dicho método comprendiendo la determinación de la cantidad de albúmina en una muestra de orina obtenida del animal, donde una cantidad de albúmina en un rango desde unos 10 μg/ml a unos 300 μg/ml en la muestra de orina, cuando el peso especifica de la muestra es normalizado a 1.010 g/ml, es indicativa de un animal que tiene la enfermedad renal temprana o esta en riesgo de enfermedad renal en su fase final, donde el animal es seleccionado del grupo que consiste de cánidos, félidos y équidos.

2. El método de la reivindicación 1, donde la cantidad de albúmina en la muestra es determinada por:

3. El método de la Reivindicación 1, donde la cantidad de albúmina en la muestra de orina es determinada utilizando un ensayo seleccionado del grupo que consiste en un inmunoensayo ligado a enzimas, un radioinmunoensayo, un inmunoensayo fluorescente, un ensayo quimioluminiscente, un ensayo de flujo lateral, un ensayo de tira reactiva, un ensayo de aglutinación, un ensayo basado en partículas, un ensayo de inmunoprecipitación, un ensayo inmunodot, un ensayo inmunoblot, un ensayo de inmunodifusión, un ensayo de fosforescencia, un ensayo de flujo continuo, un ensayo de cromatografía, un ensayo basado en PAGe, un ensayo electrónico-sensorial, un ensayo de resonancia de plasmones de superficie y un ensayo de espectroscopia de correlación de fluorescencia.