IMIDAZOQUINOLINA COADYUVANTE DE VACUNAS ADN.

Un compuesto para su uso en un método para intensificar o estimular en un individuo una respuesta inmunitaria mediada por células a un antígeno,

donde el compuesto es una imidazoquinolinamina, imidazopiridin-amina, 6,7cicloalquilimidazopiridinamina fusionada, 1,2- imidazoquinolinamina puenteada, tiazolo- u oxazolo-quinolinamina, tiazolo- u oxazolo-piridinamina, imidazonaftiridina o tetrahidroimidazonaftiridinamina, y donde el compuesto se administra tópicamente o transdérmicamente al individuo de 12 a 36 horas después de administrar un polinucleótido recombinante aislado capaz de expresar el antígeno

Campo de la invención

La invención se refiere a los campos de las vacunas, los coadyuvantes de vacunas, la biología molecular y la inmunología, y generalmente se refiere a técnicas de inmunización con ácidos nucleicos y coadyuvantes. Más específicamente, la invención se refiere a ciertas composiciones de coadyuvantes, y a estrategias de inmunización con 5 vacunas y/o ácidos nucleicos empleando tales composiciones.

Antecedentes de la invención

Los mecanismos para la inyección de ADN y ARNm en tejidos de mamíferos con fines de inmunización frente a un producto de expresión han sido descritos en la técnica. Se ha demostrado que los mecanismos, denominados "inmunización con ácidos nucleicos" en la presente memoria, logran respuestas inmunitarias tanto humorales como 10 mediadas por células. Por ejemplo, se demostró que los sueros de ratones inmunizados con un constructo de ADN que codifica la glicoproteína de la envoltura, gp160, reaccionaban con gp160 recombinante en inmunoanálisis, y se demostró que los linfocitos de los ratones inyectados proliferaban en respuesta a gp120 recombinante, Wang et al. (1993) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 90:4156-4160.

De un modo similar, los ratones inmunizados con el gen de la hormona del crecimiento humana (hGH) 15 demostraron una respuesta inmunitaria basada en anticuerpos. Tang et al. (1992) Nature 356:152-154. Se ha demostrado que la inyección intramuscular de ADN que codifica la nucleoproteína de influenza dirigida por un promotor de mamífero logra una respuesta de CTL CD8+ que puede proteger a los ratones frente a la posterior sensibilización letal con virus. Ulmer et al. (1993) Science 259:1745-1749. Los estudios inmunohistoquímicos del sitio de inyección revelaron que el ADN era absorbido por los mieloblastos, y la producción citoplásmica de proteína viral pudo ser 20 demostrada durante al menos 6 meses.

El documento WO 93/20847 se refiere a composiciones de inmunógeno/coadyuvante de vacuna que comprenden un inmunógeno y como coadyuvante de vacuna una 1H-imidazo[4,5-c]quinolin-4-amina. Los inmunógenos adecuados incluyen inmunógenos virales y bacterianos vivos e inmunógenos virales, derivados de tumores, protozoicos, derivados de organismos, fúngicos y bacterianos inactivados, toxoides, toxinas, polisacáridos, proteínas, glicoproteínas, 25 péptidos, y similares.

Clin. Microbiol. Rev. 7:277-289 (1994) revisa el uso del coadyuvante imiquimod en una vacuna de glicoproteína de virus herpes simplex de tipo 2 en cobayas.

Compendio de la invención

Los autores de la presente invención han encontrado que un compuesto de imidazoquinolinamina actúa como 30 un coadyuvante eficaz cuando se administra tópicamente de 12 a 36 horas después de una inmunización de cebado o refuerzo. Además se encontró que el compuesto era eficaz en la estimulación de la inmunidad mediada por células. El compuesto es de una serie de compuestos relacionados que se sabe que son capaces de modificar las respuestas inmunitarias.

Por lo tanto, la invención proporciona un compuesto para su uso en un método para intensificar o estimular en 35 un individuo una respuesta inmunitaria mediada por células a un antígeno, donde el compuesto es una imidazoquinolinamina, imidazopiridinamina, 6,7-cicloalquilimidazopiridinamina fusionada, 1,2-imidazoquinolinamina puenteada, tiazolo- u oxazolo-quinolinamina, tiazolo- u oxazolo-piridinamina, imidazonaftiridina o tetrahidroimida zonaftiridinamina, y donde el compuesto se administra tópicamente o transdérmicamente al individuo de 12 a 36 horas después de administrar un polinucleótido recombinante aislado capaz de expresar el antígeno. 40

La invención también proporciona un polinucleótido recombinante aislado capaz de expresar un antígeno para su uso en un método para intensificar o estimular en un individuo una respuesta inmunitaria mediada por células a dicho antígeno, donde el polinucleótido se administra de 12 a 36 horas antes de la administración tópica o transdérmica al individuo de un compuesto, esto es una imidazoquinolin-amina, imidazopiridinamina, 6,7-cicloalquilimidazopiridinamina fusionada, 1,2- imidazoquinolinamina puenteada, tiazolo- u oxazolo-quinolinamina, tiazolo- u oxazolo-piridinamina, 45 imidazonaftiridina o tetrahidro-imidazonaftiridinamina.

Además, la invención proporciona el uso de un compuesto en la fabricación de un medicamento para intensificar o estimular en un individuo una respuesta inmunitaria mediada por células a un antígeno, donde el compuesto es una imidazoquinolinamina, imidazopiridinamina, 6,7-cicloalquilimidazopiridinamina fusionada, 1,2-imidazoquinolinamina puenteada, tiazolo- u oxazolo-quinolinamina, tiazolo- u oxazolo-piridinamina, imidazonaftiridina o 50 tetrahidroimidazonaftiridinamina, y donde el compuesto es va a administrar tópicamente o transdérmicamente al individuo de 12 a 36 horas después de administrar un polinucleótido recombinante aislado capaz de expresar el antígeno.

Breve Descripción de las Figuras

Las Figuras 1 a 17 muestran la actividad coadyuvante del compuesto de la invención en una serie de 55 experimentos de vacunación.

La Figura 16 muestra los Elispot de IFN-γ para sAg 2 semanas después del cebado cuando se utiliza imiquimod como coadyuvante con pdpsC18.1. Las administraciones para las columnas 1 a 13 de la Figura son las siguientes:

1. 1. 2,0 μg de pdpsc 18

2. 2. 0,2 μg de pdpsc 18

3. 3. 0,02 μg de pdpsc 18

4. 4. 2,0 μg de 18 IMQ antes

6. 6. 0,02 μg de pdpsc 18 IMQ antes 5

7. 7, 2,0 μg de pdpsc 18 IMQ inmediatamente después

8. 8. 0,2 μg de pdpsc 18 IMQ inmediatamente después

9. 9. 0,02 μg de pdpsc 18 IMQ inmediatamente después

10. 10. 2,0 μg de pdpsc 18 IMQ 24 hr pp

11. 11. 0,2 μg de pdpsc 18 IMQ 24 hr pp 10

12. 12. 0,02 μg de pdpsc 18 IMQ 24 hr pp

13. 13. 2 μg de p7313p1c

La Figura 17 muestra Elispot de IFN-γ para el péptido sAg de HBV.

Descripción detallada de la invención

Se debe entender que esta invención no está limitada a antígenos concretos o a secuencias de nucleótidos 15 codificantes de antígenos concretas. También se debe entender que se pueden adaptar diferentes aplicaciones de los métodos descritos a las necesidades específicas de la técnica. También se debe entender que la terminología utilizada en la presente memoria tiene el propósito de describir realizaciones concretas de la invención solamente, y no se pretende que sea limitante.

Además, según se utiliza en esta memoria y en las reivindicaciones adjuntas, las formas en singular "un", 20 "uno", "una", y "el", "la" incluyen sus referentes plurales a menos que el contenido dicte claramente lo contrario. De este modo, por ejemplo, la referencia a "un antígeno" incluye una mezcla de dos o más de tales agentes, la referencia a "una partícula" incluye la referencia a mezclas de dos o más partículas, la referencia a "una célula receptora" incluye dos o más de tales células, y similares.

La invención proporciona la intensificación de una respuesta inmunitaria a un antígeno. El compuesto se 25 administra tópicamente o transdérmicamente a un individuo de 12 a 36 horas después de la administración de un polinucleótido recombinante aislado capaz de expresar un antígeno. Típicamente, el compuesto se administra de 16 a 32, de 20 a 28 o preferiblemente de 22 a 26 horas después de la administración del polinucleótido. De este modo el compuesto se puede administrar aproximadamente 24 horas después de la administración del polinucleótido.

La administración del polinucleótido (después de lo cual se administra el compuesto) puede ser una de una 30 serie de administraciones de polinucleótidos o antígenos que se produce en un régimen de administración. Por lo tanto, la administración del polinucleótido puede ser una administración de cebado o refuerzo. De este modo, en una realización de la invención el compuesto se administra de 12 a 36 horas después de la administración de cebado y/o de 12 a 36 horas después de la administración de refuerzo.

En una realización, no se administra...

1. Un compuesto para su uso en un método para intensificar o estimular en un individuo una respuesta inmunitaria mediada por células a un antígeno, donde el compuesto es una imidazoquinolinamina, imidazopiridin-amina, 6,7-cicloalquilimidazopiridinamina fusionada, 1,2- imidazoquinolinamina puenteada, tiazolo- u oxazolo-quinolinamina, tiazolo- u oxazolo-piridinamina, imidazonaftiridina o tetrahidroimidazonaftiridinamina, y donde el compuesto se 5 administra tópicamente o transdérmicamente al individuo de 12 a 36 horas después de administrar un polinucleótido recombinante aislado capaz de expresar el antígeno.

2. Un compuesto para su uso de acuerdo con la reivindicación 1, donde el compuesto es una imidazoquinolina.

3. Un compuesto para su uso de acuerdo con la reivindicación 1 o 2, donde el compuesto es imiquimod.

4. Un compuesto para su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, donde el polinucleótido 10 se administra tópicamente o transdérmicamente.

5. Un compuesto para su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, donde el compuesto y/o el polinucleótido está/se administra en forma de partículas.

6. Un compuesto para su uso de acuerdo con la reivindicación 4 o 5, donde el polinucleótido y/o el compuesto están recubiertos sobre un portador núcleo. 15

7. Un compuesto para su uso de acuerdo con la reivindicación 6, donde el portador núcleo está constituido por partículas de oro.

8. Un compuesto para su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 5 a 7, donde las partículas se administran utilizando una jeringa sin aguja.

9. Un compuesto para su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones 1 a 4, en el que el compuesto se 20 administra en forma de crema.

10. Un compuesto para su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, donde el polinucleótido se administra repetidamente para proporcionar una administración de cebado y refuerzo.

11. Un compuesto para su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, donde el polinucleótido intensifica o estimula una respuesta inmunitaria contra una infección viral. 25

12. Un compuesto para su uso de acuerdo con reivindicación 11, donde el virus es el virus de la hepatitis B, el virus herpes simplex, el virus de la inmunodeficiencia humana, el virus influenza o el papilomavirus.

13. Un compuesto para su uso de acuerdo con una cualquiera de las reivindicaciones anteriores, donde el polinucleótido es ADN.

14. Un polinucleótido recombinante aislado capaz de expresar un antígeno para su uso en un método para intensificar o 30 estimular en un individuo una respuesta inmunitaria mediada por células a dicho antígeno, donde el polinucleótido se administra de 12 a 36 horas antes de la administración tópica o transdérmica al individuo de un compuesto que es una imidazoquinolinamina, imidazopiridinamina, 6,7-cicloalquilimidazopiridinamina fusionada, 1,2-imidazoquinolinamina puenteada, tiazolo- u oxazolo-quinolinamina, tiazolo- u oxazolo-piridinamina, imidazonaftiridina o tetrahidroimida zonaftiridinamina. 35

15. El uso de un compuesto en la fabricación de un medicamento para intensificar o estimular en un individuo una respuesta inmunitaria mediada por células a un antígeno, donde el compuesto es una imidazoquinolinamina, imidazopiridinamina, 6,7-cicloalquilimidazopiridinamina fusionada, 1,2-imidazoquinolinamina puenteada, tiazolo- u oxazolo-quinolinamina, tiazolo- u oxazolo-piridinamina, imidazonaftiridina o tetrahidroimidazonaftiridinamina, y donde el compuesto es para la administración tópicamente o transdérmicamente al individuo de 12 a 36 horas después de 40 administrar un polinucleótido recombinante aislado capaz de expresar el antígeno.