Un producto de degradación de rosuvastatina que tiene la siguiente estructura:

Campo de la invención

La presente invención se refiere a productos de degradación de rosuvastatina y a su uso como estándar de referencia para el análisis de rosuvastatina.

Antecedentes de la invención

Las estatinas son actualmente los fármacos terapéuticamente más efectivos disponibles para reducir la concentración de partículas de lipoproteínas de baja densidad (LDL), en el torrente circulatorio de pacientes con riesgo de enfermedad cardiovascular. Por tanto, las estatinas se usan en el tratamiento de hipercolesterolemia, hiperlipoproteinemia y aterosclerosis. Se ha relacionado un nivel alto de LDL en el torrente circulatorio a la formación de lesiones coronarias que obstruyen el flujo de sangre y que se pueden romper y provocar trombosis. Goodman y Gilman, The Pharmacological Basis of Therapeutics, página 879 (9ª Ed. 1996).

Las estatinas inhiben la biosíntesis del colesterol en seres humanos inhibiendo de forma competitiva la enzima 3-hidroxi-3-metil-glutaril-coenzima A ("HMG-CoA") reductasa. La HMG-CoA reductasa cataliza la conversión de HMG a mevalonato, que es la etapa determinante de la velocidad en la biosíntesis del colesterol. La disminución en la producción de colesterol provoca un incremento en el número de receptores de LDL y la correspondiente reducción en la concentración de partículas de LDL en el torrente sanguíneo. La reducción en el nivel de LDL en el torrente sanguíneo reduce el riesgo de arteriopatía coronaria. J.A.M.A. 1984, 251, 351-74.

Las estatinas actualmente disponibles incluyen lovastatina, simvastatina, pravastatina, fluvastatina, cerivastatina y atorvastatina. La lovastatina (dada a conocer en la patente de los Estados Unidos N.º 4.231.938) y la simvastatina (dada a conocer en la patente de los Estados Unidos N.º 4.444.784) se administra en forma de lactona. Después de la absorción, el anillo de lactona se abre en el hígado mediante hidrólisis química o enzimática, y se genera el hidroxiácido activo. La pravastatina (dada a conocer en la patente de los Estados Unidos N.º 4.346.227) se administra como la sal de sodio. La fluvastatina (dada a conocer en la patente de los Estados Unidos N.º 4.739.073) y la cerivastatina (dada a conocer en la patente de los Estados Unidos Nos. 5.006.530 y 5.177.080), también administradas como la sal de sodio, son compuestos completamente sintéticos que son en parte estructuralmente distintos de los derivados fúngicos de esta clase que contienen un anillo hexahidronaftaleno. La atorvastatina y dos nuevas "superestatinas", rosuvastatina y pitavastatina, se administran como sales de calcio.

La rosuvastatina de calcio (bis (+) 7-[4-(4-fluorofenil)-6-isopropil-2-(N-metil-N-metilsulfonilaminopirimidin)-5-il]-(3R, 5S)-dihidroxi-(E)-6-heptenoato monocálcico) es un inhibidor de la HMG-CoA reductasa, desarrollado por Shionogi para el tratamiento oral una vez al día de la hiperlipidemia (Ann Rep, Shionogi, 1996; Direct communications, Shionogi, 8 de febrero de 1999 y 25 de febrero de 2000). La rosuvastatina cálcica es una superestatina, que puede disminuir el colesterol-LDL y los triglicéridos de forma más efectiva que los fármacos de primera generación. La rosuvastatina cálcica tiene la siguiente fórmula química:

**(Ver fórmula)**

La rosuvastatina cálcica se comercializa bajo el nombre CRESTOR para el tratamiento de un mamífero tal como un ser humano. De acuerdo con el fabricante de CRESTOR, se administra en una dosis diaria de desde aproximadamente 5 mg hasta aproximadamente 40 mg. Para pacientes que requieren reducciones menos agresivas de LDL-C o que tengan factores de predisposición para la miopatía, se recomienda la dosis de 5 mg, mientras que se recomienda la dosis de 10 mg para el paciente promedio, dosis de 20 mg para pacientes con hipercolesterolemia y objetivos lipídicos agresivos (> 190 mg/dl), y la dosis de 40 mg para pacientes que no han respondido a dosis menores.

La patente de los Estados Unidos N.º 5.260.440 da a conocer y reivindica la rosuvastatina, su sal de calcio (2:1) y su forma de lactona. El procedimiento de la patente 440 prepara la rosuvastatina haciendo reaccionar 4-(4-fluorofenil)-6-isopropil-2-(N-metil-N-metilsulfonilamino)-5-pirimidincarbaldehído con (3R)-3-(terc-butildimetilsililoxi)-5-oxo-6-trifenilfosforanilidenhexanato de metilo en acetonitrilo bajo reflujo. El grupo sililo se escinde entonces con fluoruro de hidrógeno, seguido de reducción con NaBH4 y dietilmetoxiborano en THF para obtener un éster metílico de rosuvastatina.

El éster se hidroliza entonces con hidróxido de sodio en etanol a temperatura ambiente, seguido de la retirada de etanol y la adición de éter, para obtener la sal de sodio de rosuvastatina. La sal de sodio se convierte entonces en sal de calcio. La sal de sodio se disuelve en agua y se mantiene bajo una atmósfera de nitrógeno. El cloruro de calcio se añade entonces a la solución, dando como resultado la precipitación de rosuvastatina cálcica (2:1). El procedimiento para la preparación de intermedios dados a conocer en la patente 440 se incorpora en el presente documento por referencia.

La patente de los Estados Unidos N.º 6.316.460 da a conocer una composición farmacéutica de rosuvastatina. Las composiciones farmacéuticas contienen rosuvastatina o su sal y una sal de fosfato tribásica multivalente.

La mezcla de producto de una reacción raramente es un compuesto único suficientemente puro para cumplir con los estándares farmacéuticos. En la mayoría de los casos, estarán presentes productos secundarios y subproductos de la reacción y reactivos complementarios usados en la reacción. En determinadas fases durante el procesamiento de la rosuvastatina contenida en la mezcla de producto en un ingrediente farmacéuticamente activo ("IFA"), se debe analizar la rosuvastatina para determinar su pureza, normalmente por análisis de HPLC o de CG, para determinar si es adecuada para el procesamiento continuo o finalmente para su uso en un producto farmacéutico. No es necesario que la rosuvastatina sea absolutamente pura. La pureza absoluta es un ideal teórico que es inalcanzable. Más bien, hay estándares de pureza destinados a asegurar que un IFA no se fabrique menos seguro para su uso clínico debido a la presencia de impurezas. En los Estados Unidos, las directrices de la Administración para alimentos y fármacos recomendaron que los solicitantes limiten algunas impurezas por debajo del 0,1%.

En general, los productos secundarios, subproductos y reactivos complementarios (colectivamente "impurezas") se identifican espectroscópicamente y mediante otros procedimientos físicos y después las impurezas se asocian con una posición de pico en un cromatograma (o un punto sobre una placa de TLC). (Strobel p. 953) (Strobel, H.A.; Heineman, W.R., Chemical Instrumentación: A Systematic Approach, 3ª dd. (Wiley & Sons: Nueva York 1989)). Posteriormente, la impureza se puede identificar por su posición en el cromatograma, que se mide convencionalmente en minutos entre la inyección de la muestra en la columna y la elución del componente particular a través del detector, conocido como el "tiempo de retención". Este periodo de tiempo varía diariamente en base al estado de la instrumentación y a muchos otros factores. Para mitigar el efecto que tales variaciones tiene sobre la identificación cuidadosa de una impureza, los médicos usan el "tiempo de retención relativo" ("TRR") para identificar las impurezas. (Strobel p. 922). El TRR de una impureza es su tiempo de retención dividido por el tiempo de retención de algún marcador de referencia. En teoría, se puede usar la rosuvastatina por sí misma como marcador de referencia, pero como problema principal está presente en una proporción tan inmensa que tiende a saturar la columna, lo que condice a tiempos de retención irreproducibles, es decir, el máximo del pico que corresponde a la rosuvastatina tiende a desviarse (Strobel, fig. 24.8 (b), p. 879, contiene una ilustración del tipo de pico asimétrico que se observa cuando se sobrecarga una columna). Por tanto, a veces es deseable seleccionar un compuesto alternativo que se añada a, o que esté presente en, la mezcla en una cantidad suficientemente significativa para detectarse y suficientemente baja como para no saturar la columna y para usar ese compuesto como el marcador de referencia.

Los investigadores y desarrolladores en la fabricación de fármacos entienden que un compuesto en un estado relativamente puro se puede usar como un "estándar de referencia" (un "marcador de referencia"... [Seguir leyendo]

1. Un producto de degradación de rosuvastatina que tiene la siguiente estructura:

2. Un producto de degradación de rosuvastatina que tiene la siguiente estructura:

3. Un producto de degradación de rosuvastatina que tiene la siguiente estructura:

**(Ver fórmula)**

**(Ver fórmula)**

**(Ver fórmula)**

en la que M es un metal alcalino o alcalinotérreo. 4. Un producto de degradación de rosuvastatina que tiene la siguiente estructura:

**(Ver fórmula)**

en la que M es un metal alcalino o alcalinotérreo.

5. El producto de degradación de rosuvastatina de la reivindicación 3 ó 4, en el que M es calcio.

6. Un procedimiento para convertir la sal de calcio de la reivindicación 5 a la forma de lactona que comprende 5 combinar acetonitrilo, ácido clorhídrico y la sal de calcio para obtener la lactona.

7. Un procedimiento para convertir la sal de calcio de la reivindicación 5 a un ácido libre que comprende disolver la sal de calcio en una mezcla de acetonitrilo y agua para obtener una solución, y poner en contacto la solución con una columna de sílice.

8. El procedimiento de la reivindicación 7, que comprende además aislar el ácido libre de la columna de sílice.

10 9. Una forma de lactona de un producto de degradación de rosuvastatina que tiene la siguiente estructura:

**(Ver fórmula)**

10. Una forma de lactona de un producto de degradación de rosuvastatina que tiene la siguiente estructura:

11. Un procedimiento para convertir la lactona de la reivindicación 9 ó 10 a una sal de calcio que comprende hidrolizar la lactona bajo condiciones básicas acuosas, y hacer reaccionar la lactona hidrolizada con una fuente de calcio.

12. El procedimiento de la reivindicación 11, en el que se combina una solución acuosa básica con una solución de la lactona en acetonitrilo, seguido de la retirada de acetonitrilo y la adición de una fuente de calcio, y la recuperación de la sal de calcio.

13. El procedimiento de la reivindicación 12, en el que el procedimiento comprende disolver la lactona en una mezcla de acetonitrilo e hidróxido de sodio acuoso, evaporar el acetonitrilo, añadir cloruro de calcio al agua restante para precipitar la sal de calcio.

14. Un procedimiento para convertir la lactona de la reivindicación 9 ó 10 a la forma de ácido libre que comprende hidrolizar la lactona bajo condiciones básicas acuosas para obtener una sal y poner en contacto la sal con una columna de sílice para obtener el ácido libre.

15. El producto de degradación de rosuvastatina de la reivindicación 1, 2, 3, 4, 9 ó 10, en el que el producto de degradación está libre aproximadamente en un 95% del % de área por HPLC de su correspondiente estereoisómero en la posición 6.

16. El producto de degradación de rosuvastatina de la reivindicación 1, 2, 3, 4, 9 ó 10, en el que el producto de degradación de rosuvastatina está aislado o purificado.

17. Un procedimiento para analizar una muestra de rosuvastatina que comprende las etapas de: a) realizar cromatografía sobre la muestra para obtener datos; y b) comparar los datos con los datos de cromatografía del producto de degradación de la reivindicación 1, 2, 3, 4,

9 ó 10.

18. El procedimiento de la reivindicación 17, en el que el procedimiento comprende las siguientes etapas:

(a) preparar una solución de rosuvastatina que contiene el producto de degradación;

(b) someter la solución a una cromatografía líquida de alta presión para obtener un cromatograma; y

(c) comparar un pico obtenido en el cromatograma con un pico que resulta del producto de degradación.

19. El procedimiento de la reivindicación 17, en el que el procedimiento comprende las siguientes etapas:

(a) preparar una solución de rosuvastatina que contiene el producto de degradación;

(b) someter la solución a una cromatografía en capa fina para obtener un cromatograma; y

(c) comparar una banda o punto obtenido en el cromatograma con un pico o banda que resulta del producto de degradación.

20. Un procedimiento para preparar el producto de degradación de la reivindicación 1, 2, 3, 4, 9 ó 10, que comprende la etapa de irradiar con luz visible ácido de rosuvastatina, sal alcalina o de metal alcalinotérreo de rosuvastatina o lactona de rosuvastatina.

**(Ver fórmula)**

21. Un procedimiento para la preparación del compuesto:

o

**(Ver fórmula)**

5 en el que M es calcio, que comprende irradiar con luz visible la rosuvastatina cálcica en solución en una mezcla de un disolvente orgánico y agua.

22. El procedimiento de la reivindicación 21, en el que el disolvente orgánico es acetonitrilo.

23. El procedimiento de la reivindicación 21, en el que la radiación de luz visible es de aproximadamente 750 w a aproximadamente 35ºC.

10 24. Un procedimiento de preparación de la forma de lactona del compuesto o

**(Ver fórmula)**

que comprende irradiar con luz visible lactona de rosuvastatina en un disolvente.

25. El procedimiento de la reivindicación 24, en el que la radiación de luz visible es de aproximadamente 20ºC a aproximadamente 100ºC.

26. El procedimiento de la reivindicación 24, en el que el disolvente es acetonitrilo.

27. Un procedimiento para determinar el tiempo de retención de una columna de cromatografía para rosuvastatina, que comprende las etapas de llevar a cabo una cromatografía con el siguiente compuesto como estándar,

**(Ver fórmula)**

en el que R1 y R2 son independientemente hidrógeno o un grupo protector hidrolizable; R3 es hidrógeno, un grupo alquilo de C1 a C4, o un metal alcalino o alcalinotérreo; o en el que C1 y C5 forman una lactona.

28. El procedimiento de la reivindicación 27, en el que el estándar de referencia es un marcador de referencia.

29. El procedimiento de la reivindicación 27, en el que el estándar es el producto de degradación de la reivindicación 1, 2, 3, 4, 9 ó 10.

30. Un procedimiento para preparar el producto de degradación de rosuvastatina de la reivindicación 1 ó 2 que comprende las etapas de:

(a) irradiar con luz visible rosuvastatina cálcica en una mezcla de un disolvente orgánico y agua para obtener el producto de degradación de rosuvastatina que tiene la siguiente estructura

o

**(Ver fórmula)**

10 en la que M es calcio;

(b) recuperar el producto obtenido en la etapa (a);

(c) disolver el compuesto obtenido en la etapa (b) en un disolvente adecuado y combinar la solución con ácido clorhídrico acuoso;

15 (d) recuperar el producto de la etapa (c);

(e) hidrolizar el producto recuperado en la etapa (d) bajo condiciones básicas acuosas y hacer reaccionar el producto hidrolizado con una fuente de calcio para precipitar un sólido;

(f) recuperar el sólido precipitado en la etapa (e); y

(g) disolver el producto recuperado en la etapa (f) en una mezcla de acetonitrilo y agua, y poner en contacto la 20 solución con una columna de sílice para obtener un ácido libre.

31. Un procedimiento para preparar el producto de degradación de rosuvastatina de la reivindicación 1 ó 2 que comprende las etapas de:

(a) irradiar con luz visible lactona de rosuvastatina en una mezcla de un disolvente orgánico y agua para obtener el producto de degradación de rosuvastatina que tiene la siguiente estructura

**(Ver fórmula)**

o

(b) recuperar el producto obtenido en la etapa (a);

(c) hidrolizar el producto recuperado en la etapa (b) bajo condiciones básicas acuosas y hacer reaccionar el producto hidrolizado con una fuente de calcio para precipitar un sólido;

(d) recuperar el sólido precipitado en la etapa (c); y

10 (e) disolver el producto recuperado en la etapa (d) en una mezcla de acetonitrilo y agua, y poner en contacto la solución con una columna de sílice para obtener un ácido libre.

32. Un producto de degradación de rosuvastatina que tiene la siguiente estructura:

33. El producto de degradación de rosuvastatina de la reivindicación 32, en el que R1 y R2 son independientemente hidrógeno.

34. El producto de degradación de rosuvastatina de la reivindicación 32 o reivindicación 33, en el que R3 es metilo.